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拟南芥微管结合蛋白CSI1

3月16日,植物科学研究权威期刊Plant Cell在线发表了中科院上海生命科学研究院植生生态所植物分子遗传国家重点实验室薛红卫研究组的最新研究成果:拟南芥ARCP蛋白CSI1通过结合微管,维持微管稳定性并调控根和花药的发育。 微管是由α、β微管蛋白异二聚体通过非共价键形成的管状结构。微管结合蛋白通过调控微管的排列以及聚合-解聚状态,在许多生理活动,如细胞形态与结构、胞质流动、细胞分裂、细胞极性生长、细胞壁构建、细胞分化、信号转导等中起到调控作用。近年来陆续报道了一系列植物微管结合蛋白,它们可以调控植物微管骨架的动态和组织,以及微管与其他细胞结构间的连接,从而在植物细胞的形态、分化和植物的生长、发育、适应逆境等生理过程中起作用,为解释很多植物特异的生理过程的分子机理提供了很大的帮助。 薛红卫研究组通过遗传学筛选得到了一个花药不能正常开裂的突变体,表型分析发现,该突变体花药细胞形态和形状发生异常,根以及幼苗......阅读全文

污水碳源分离新概念——筛分纤维素

追求污水处理碳中和运行目标产生了从污水中前端分离碳源(碳捕捉)的欧洲概念,使之用于后端厌氧消化转化甲烷。我国市政污水碳源(COD)浓度普遍偏低,连脱氮除磷碳源需求都难以满足,这就限制了碳捕捉的理论和实践。然而,另外一种碳捕捉概念似乎是普遍适用的,那就是前端筛分纤维素。纤维素物质本身化学结构异常复杂、

层析技术(Layer-analise technique)

离子交换层析技术是以离子交换纤维素或以离子交换葡聚糖凝胶为固定相,以蛋白质等样品为移动相,分离和提纯蛋白质、核酸、酶、激素和多糖等的一项技术。(一)原理在纤维素与葡聚糖分子上结合有一定的离子基团,当结合阳离子基团时,可换出阴离子,则称为阴离子交换剂。如二乙氨乙基(Dicthylaminoethyl,

分子生物学常用实验技术(page 3)

分子杂交技术    互补的核苷酸序列通过Walson-Crick 碱基配对形成稳定的杂合双链分子DNA 分子的过程称为杂交。杂交过程是高度特异性的,可以根据所使用的探针已知序列进行特异性的靶序列检测。杂交的双方是所使用探针和要检测的核酸。该检测对象可以是克隆化的基因组DNA,也可以是细胞总DN

Western Blot详解

  Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。   本文主要通过以下几个方面来详细地介绍一下Western Blot技术:   一、原理   二、分类

瘤胃微生物也会“挑食”

  瘤胃微生物也有不同口味,会“挑食”? 12月1日,《国际微生物生态学会杂志》在线发表了来自国际团队的最新成果。他们利用微生物16S扩增子和宏基因组测序等研究手段,深入解析了土种黄牛瘤胃微生物对不同木质纤维素饲用植物降解的“嗜好”,为瘤胃微生物和瘤胃酶在木质纤维饲料资源价值

Western Blot实验技术详解和常见问题解答

Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。一、原理与Southern或Northern杂交方法类似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被

葡糖醋杆菌的研究最新进展

葡糖醋杆菌属(Gluconacetobacter)是醋酸菌科的一个重要属,与人类关系密切.一些葡糖醋杆菌属菌株如Ga.europaeus和Ga.entanii等在工业醋特别是高酸度醋的发酵中起重要作用;Ga.xylinus等是重要的细菌纤维素产生菌;而Ga.diazotrophicus等则具有固氮作

葡糖醋杆菌的研究最新进展

  葡糖醋杆菌属(Gluconacetobacter)是醋酸菌科的一个重要属,与人类关系密切.一些葡糖醋杆菌属菌株如Ga.europaeus和Ga.entanii等在工业醋特别是高酸度醋的发酵中起重要作用;Ga.xylinus等是重要的细菌纤维素产生菌;而Ga.diazotrophicus等则具有固

分子杂交技术(三)

五、核酸分子杂交的类型  随着基因工程研究技术的迅猛发展,新的核酸分子杂交类型和方法在不断涌现和完善。核酸分子杂交可按作用环境大致分为固相杂交和液相杂交两种类型。固相杂交是将参加反应的一条核酸链先固定在固体支持物上,一条反应核酸游离在溶液中。固体支持物有硝酸纤维素滤膜、尼龙膜、乳胶颗粒、磁珠和微孔板

分子杂交技术(三)

五、核酸分子杂交的类型  随着基因工程研究技术的迅猛发展,新的核酸分子杂交类型和方法在不断涌现和完善。核酸分子杂交可按作用环境大致分为固相杂交和液相杂交两种类型。固相杂交是将参加反应的一条核酸链先固定在固体支持物上,一条反应核酸游离在溶液中。固体支持物有硝酸纤维素滤膜、尼龙膜、乳胶颗粒、磁珠和微孔板

Western Blot详解-常见的问题指南(二)

4. 滤纸、胶和膜的问题X. NC膜\ PVDF膜\ 尼龙膜怎样鉴别?解答:尼龙膜是较理想的核酸固相支持物,有多种类型;硝酸纤维素膜是目前应用最广的一种固相支持物,价格最便宜;PVDF膜介于二者之间。就结合能力而言:尼龙膜结合DNA和RNA能力可达480-600μg/cm2,可结合短至10bp的核酸

DEAE—离子交换剂纯化血清IgG

(一)原理离子交换是指液相中的离子与固定相上可解离基团的可逆交换反应。利用这个反应先将要分离的混合物在一定pH的溶液中解离,而后流经固定相,使之与固定相上的可解离基团进行离子交换,吸附于固定相上,凡不能进行交换吸附的成分,则流出层析柱外。再根据交换吸附于固定相上的各组分解离度的差别,运用不同的pH值

DEAE—离子交换剂纯化血清IgG

实验概要本文介绍了DEAE—离子交换剂纯化血清IgG的原理及操作步骤等。实验原理离子交换是指液相中的离子与固定相上可解离基团的可逆交换反应。利用这个反应先将要分离的混合物在一定pH的溶液中解离,而后流经固定相,使之与固定相上的可解离基团进行离子交换,吸附于固定相上,凡不能进行交换吸附的成分,则流出层

孙润仓小组农林废弃物研究取得重要进展

农林废弃物转化产物已开始进入现代工业和社会生活。木质素在沙柳纤维细胞壁的分布,右为不同壁层木素化程度比较(沙柳横切面的CLSM图像)在石油等化石资源逐渐减少,我们面临用不用粮食、饲料来转化生物质能源的两难选择时,研究人员将目光投向农林废弃物清洁、高效转化利用。在国家自然

Western Blot详解(三)

3.抗体T.做细胞信号传导,要做磷酸化某因子Western Blot,其二抗有何要求?解答:对二抗无要求,要看你实验条件来选择,一般推荐用HRP标记的二抗。U.同一公司的另外抗体用这个稀释度做出来效果很好,所以没做预试,怕费时间,用什么样的稀释度比较好呢?我用的ELL+plus试剂盒显色。转膜过夜,

知识分享:mRNA的分离和纯化

  实验原理   从细胞或组织中得到RNA是一种混合物,其中包括tRNA,rRNA和mRNA,其中RNA为75%~ 85%,tRNA占10%~16%,而mRNA仅占1%~5%,并且mRNA基因序列不同,分子量大小不均一,各基因的表达丰度也不一样。每克细胞可分离出5-10mg RNA。   真核生

分子杂交技术 -2

 一、Southern杂交 Southern杂交可用来检测经限制性内切酶切割后的DNA片段中是否存在与探针同源的序列,它包括下列步骤:  (1) 酶切DNA, 凝胶电泳分离各酶切片段,然后使DNA原位变性。   (2) 将DNA片段转移到固体支持物(硝酸纤维素滤膜或尼龙膜)上。&

层析技术(Layer-analise technique)(1)

离子交换层析技术是以离子交换纤维素或以离子交换葡聚糖凝胶为固定相,以蛋白质等样品为移动相,分离和提纯蛋白质、核酸、酶、激素和多糖等的一项技术。 (一)原理 在纤维素与葡聚糖分子上结合有一定的离子基团,当结合阳离子基团时,可换出阴离子,则称为阴离子交换剂。如二乙氨乙基(Dicthy

Northern blot技术

经乙二醛和二甲基亚砜变性处理后进行的RNA电泳  这一方法原于McMaster和Carmichael(1977)。 含有乙二醛-DMSO的凝胶比含有甲醛的凝胶更难于进行电泳, 因为前者泳动速率较慢而且需将电泳液时行循环以避免电泳过程中形成过高的H+梯度。尽管上述两种凝胶具有近乎相等的分辨率(Mill

Northern blot技术

经乙二醛和二甲基亚砜变性处理后进行的RNA电泳  这一方法原于McMaster和Carmichael(1977)。 含有乙二醛-DMSO的凝胶比含有甲醛的凝胶更难于进行电泳, 因为前者泳动速率较慢而且需将电泳液时行循环以避免电泳过程中形成过高的H+梯度。尽管上述两种凝胶具有近乎相等的分辨率(Mill

抗原的制备方法-2

表2-1 室温下由S1提高到S2时每升加固体硫酸铵的克数  0.10 0.20 0.25 0.30 0.35 0.40 0.45 0.50 0.55 0.60 0.65 0.70 0.75 0.80 0.85 0.90 0.95 1.00 0 55 113 114 175 209 242

木质纤维素原料的生物-化学联合预处理方法获专利

  中科院成都生物研究所“一种木质纤维素原料的生物-化学联合预处理方法”近日获国家知识产权局发明专利(专利号:ZL 201010182173.1)。   木质纤维素原料经过酶解糖化后,可得到以葡萄糖为主的六碳糖及以木糖为主的五碳糖,是食品和化工等行业的重要原料。木质纤维素原料主要由纤维素、半纤

Northern blot实验技术

一、经乙二醛和二甲基亚砜变性处理后进行的RNA电泳这一方法原于McMaster和Carmichael(1977)。 含有乙二醛-DMSO的凝胶比含有甲醛的凝胶更难于进行电泳,因为前者泳动速率较慢而且需将电泳液时行循环以避免电泳过程中形成过高的H+梯度。尽管上述两种凝胶具有近乎相等的分辨率(Mille

纤维素转化为淀粉找到新途径

来自非食用植物的纤维素或许能够转化为可食用的淀粉。  木材中的主要成分纤维素是地球上含量最丰富的有机化合物之一,并且是可再生能源的一种理想来源。如今,生物工程师指出,它还能够解决人类的温饱问题。在一项新的研究中,研究人员找到了一种将纤维素转化为淀粉的新途径,后者是人类食物中最常见的碳水化合物。  乙

几种粗纤维含量测定方法的比较

  由于膳食纤维与人体健康的关系日益受到重视,迫切需要食物中膳食纤维各成分的数据,这对测定食物中膳食纤维的方法学研究提出了要求。总结膳食纤维分析方法,其原理主要是依据膳食纤维可进行的化学反应和酶反应,历史上膳食纤维分析的重要方法包括非酶重量法如粗纤维、中性洗涤剂纤维和酸性洗涤剂纤维的分析方法;酶重量

宁波材料所在纤维素化学转化技术研究中取得进展

  随着石化资源的日益减少和环境问题不断恶化,生物质因其可再生性、二氧化碳零排放等良好环境效应成为全球关注的焦点。纤维素作为非粮食作物,广泛存在于农林废弃物(如玉米秸秆、甘蔗渣以及废弃木屑等),是地球上最丰富的生物质资源,每年产量超过1000亿吨。将纤维素通过化学或者生物法水解制备葡萄糖,进而生产乙

植物组织中纤维素含量的测定

纤维素是植物  细胞壁的主要成分之一,纤维素含量的多少,关系到植物细胞机械组织发达与否。因而影响作物的抗倒伏,抗病虫害能力的强弱。测定粮食、蔬菜及纤维作物产品中纤维素含量是鉴定其品质好坏的重要指标。 一、原理 纤维素(Cell  ulose)为β-葡萄糖残基组成的多糖,在酸性条

纳米纤维素“植物生物学最重要的发现之一”

纳米纤维素比凯夫拉芳纶更坚固,比纸更薄,而且再过几年,它有可能仅通过水和阳光就能大规模制备。   本周,美国科学家公布了一种制备纳米纤维素的新方法,它很有可能是突破性的。纳米纤维素被称为“神奇材料”,树纤维中就含有这种物质,它可以应用于制造超薄显示器、轻薄防弹衣以及许多种不同的产品。   科学家

Western Blot详解(原理、试剂、步骤及问题解答)-4

HH. 跑电泳的时候配的胶总是“缩”是什么原因呢?是有的成分不对吗? 解答:没什么问题,就是你胶里的水分被蒸发了。过夜时拿保鲜膜包起来,在里面加点水保持湿度就可以了。如果过夜,胶里的水分被蒸发,采用保鲜膜包上也可以;也可能母液(30%聚丙酰胺)有问题,你可以重新配制一份观察;能够替换的试剂,尽量

杂交膜转印膜*纤维素膜NC膜与PVDF膜的区别

1. *纤维素膜*纤维素膜是蛋白印迹广泛使用的转移介质,对蛋白有很强的结合能力,而且适用于各种显色方法,包括同位素,化学发光(Luminol类)、常规显色、染色和荧光显色;背景低,信噪比高。NC膜的使用也很简便,比如不需要甲醛预处理,只要在无离子水面浸润排出膜内气泡,再在电泳缓冲液中平衡几