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细胞核连缀分析实验_从组织中制备细胞核

实验材料动物组织试剂、试剂盒PBS蔗糖仪器、耗材电动匀浆器特氟隆研杵实验步骤一、用超速离心法从组织中分离细胞核1. 切下动物组织，放入置于冰上的平皿中，用冰冷的 PBS 冲洗。2. 加少量蔗糖Ⅰ溶液，用剪刀或剃须刀片将组织切碎，转入一个干净试管中，加蔗糖Ⅰ溶液至终体积为每克组织 10 ml。3. 用特氟隆研杵在电动匀浆器中将细胞匀浆裂解。4. 于 1000 g 低温离心 5 分钟收集细胞核。5. 用 2 ml 蔗糖Ⅱ，用移液管猛力吹打重悬沉淀，然后加蔗糖Ⅱ至每克组织 10 ml。6. 离心：(1) 取一个 SW41 离心管（Beckman)，加入 2 ml 蔗糖Ⅱ，再将上一步所得悬液加于其上。(2) 于 20000 r/min，4℃ 用 SW41 转头离心 1 小时，沉淀即是去除了膜成分与细胞碎片的干净的细胞核。7. 吸去上层的细胞碎片和透明的垫层，一定要吸彻底，以免沉淀受到任何细胞碎片的污染。然后用干净的 Kimwipe 吸水......阅读全文