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实验材料组织试剂、试剂盒EDTASDS蛋白酶 K仪器、耗材玻璃试管实验步骤1. 融解从 1 g 组织或 5 瓶培养皿细胞制备、冻存于 NSB 中的细胞核。1000 g 离心 5 分钟，去上清，用 200 μl HRB 轻轻吹打重悬。2. 将悬液转至一个带有抗酚螺帽的硅化玻璃试管，37℃ 水浴 5 到 15 分钟（由预实验决定)。孵育过程中，偶尔轻轻搅动细胞核，避免沉于管底。3. 加入 1.5 ml HSB 和 90 μl DNA 酶Ⅰ（终浓度 100 单位/ml）终止反应，37℃ 水浴 3~5 分钟，同时剧烈吹打直至不再黏稠。4. 依次加入 40 μl 0.5 mol/L EDTA，40 μl 25% SDS 与 20 mg/ml 蛋白酶 K，混匀，37℃ 水浴 30 分钟。5. 热酸酚抽提除去蛋白质和大部分 DNA：加 2.5 ml 抽提缓冲液，然后加等量预热到 65℃ 的由抽提缓冲液饱和的酚，于 65℃ 剧烈混合 10 分钟......阅读全文
从组织中制备细胞核体外细胞核连缀反应体外细胞核连缀反应产物的分析实验材料动物组织 &nbs
从组织中制备细胞核 体外细胞核连缀反应 体外细胞核连缀反应产物的分析 实验材料
核连缀分析用于确定某个克隆的基因是否受转录调控。理论上，核连缀分析应该在检测稳定状态 mRNA 水平变化的杂交实验之后，而在启动子分析之前进行。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）下册，作者：〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。实验方法原理离心机和转头，沸腾的水浴锅， Dounce 匀浆器，
实验材料环状质粒 DNA试剂、试剂盒氢氧化钠SSPE预杂交缓冲液仪器、耗材狭线印迹装置实验步骤一、狭线印迹的制备1. 如果用的是环状质粒 DNA，用适当的限制酶使 DNA 探针线性化。每个狭线需用 5 μg DNA。2. 往线性 DNA 溶液中加氢氧化钠至 0.1 mol/L，混匀，室温放置 30