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EttanDIGE荧光差异蛋白表达分析系统

原理和应用: Ettan DIGE荧光差异蛋白表达分析系统在传统双向电泳技术的基础上,结合了多重荧光分析的方法,在同一块胶上共同分离多个分别由不同荧光标记的样品,并第一次引入了内标的概念,极大地提高了结果的准确性,可靠性和重复性。在DIGE技术中,每个蛋白点都有它自己的内标,并且软件全自动根据每个蛋白点的内标对其表达量进行校准,保证所检测到的蛋白丰度变化是真实的。DIGE技术可检测到样品间小于10%的蛋白表达差异,统计学可信度达到95%以上。利用Ettan DIGE技术还可以对微量(少到5μg)样本进行蛋白质组学分析,例如激光捕获显微切割(LCM)得到的样品或者很难获得的珍贵样品等。 Ettan DIGE系统包括CyDye DIGE荧光标记物,IPGphor II/Ettan DALT电泳系统,Typhoon多功能激光共聚焦扫描仪和DeCyder差异分析软件......阅读全文

番茄叶和根二维差异凝胶电泳(DIGE)实验

试剂、试剂盒:叶片悬浮缓冲液                                       &n

番茄叶和根二维差异凝胶电泳(DIGE)实验(二)

( 7 ) 关上泵,加入水饱和的丁醇以确保覆盖住胶的顶部和下部(丁醇在分隔液的上部),放置 1 h,然后倒掉丁醇,覆盖 Milli-Q H2O。( 8 ) 胶最好是在室温放置过夜,当彻底凝固时再用。拆除灌胶仪器,洗掉玻璃板上的丙烯酰胺。立刻用胶或者放冰箱暂存(最多可以保存一个星期)。3.6 二向蛋白

番茄叶和根二维差异凝胶电泳(DIGE)实验

试剂、试剂盒叶片悬浮缓冲液EDTA 水溶液硫脲缓冲液硫酸铵溶液SDS 溶液仪器、耗材细胞等电聚焦电泳仪等电聚焦托盘及盖实验步骤3.1 叶和根组织的收集和沉淀蛋白( 1 ) 从植物的中部切取绿色叶片,迅速放入塑料袋里冷却。如果没有冰箱,可先放到冰上,再放入 -20°C 保存。( 2 ) 对于根部组织,

双向电泳的新进展和新工具

  随着蛋白质组学概念的提出,双向电泳(2D gel electrophoresis)一度曾变得很流行。近几年,因质谱技术的快速发展,LC-MS的热度似乎更高。然而,在某些应用上,双向电泳更有优势。   双向电泳提供了整个样品的鸟瞰图,而这是质谱无法比拟的。它可以对样品中复杂的蛋白质进行整体性