发布时间:2021-02-23 14:50 原文链接: A549(人非小细胞肺癌细胞)细胞培养的优点

1.研究的对象是活细胞

在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。

2.研究条件可以人为控制

pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。

3.研究的样本可以达到比较均一性

通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。

4.研究内容便于观察、检测和记录

采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备  细胞特性:
1)】EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0906价格组织来源于实验动物的正常眼组织。
2)细胞鉴定:细胞角蛋白-18(CK-18)免疫荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5)细胞生长方式:上皮样,不规则细胞,贴壁培养。
注意事项:
(1)冻存前细胞状态,细胞最好在对数生长期,细胞密度适合,刚刚发生细胞融合,过密或连成片的细胞状态不好,而且消化时不容易分散;
(2)冻存的密度不宜过低,10的6次方-7次方的数量级比较好,我冻存的细胞一般T25培养瓶(5*107),一瓶冻一管(1.5ml冻存管),10cm培养皿(大概10的8次方个细胞)分成两管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化过度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培养基吹打哦,不是加入冻存液再吹打。
(4)离心后加入冻存液。冻存液中FBS的用量对于肿瘤细胞株而言要求不是很严格,我从10%-90%都用过,问题不大,个人认为10%-20%可以了,能节约处就节约点嘛!另外,冻存液可以在处理细胞前配置,放在4度冰箱预冷。细胞离心后直接用预冷的冻存液重悬,移入冻存管。
(5)关于“慢冻”,传统的方法,LLC细胞冻存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更长,-80度过夜,最后液氮。对于条件较好的实验室和细胞冻存数量多的实验室,推荐使用程序降温盒,内装异丙醇,在-80度并内可以逐渐降温,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。

相关文章

我国科学家首次制备成功厘米级细胞培养鱼肉

近日,中国工程院院士、中国海洋大学教授薛长湖团队首次成功制备了厘米级细胞培养鱼肉,相关研究性论文发表在国际食品Top期刊《农业与食品化学杂志》。随着环境污染、粮食短缺、人畜共患疾病、动物福利和可持续发......

实验室培养的脂肪现在可以释放出真实的肉类质地与味道

科学家们已经成功地大规模生产了实验室培养的脂肪组织,这反映了自然衍生的动物脂肪的纹理和组成。最近发表在《eLife》杂志上的这一发现可用于制造细胞培养的肉类,增强其质地和味道,使之与传统肉类非常相似。......

基于植物的支架可促进培养肉的生产

创造实验室培养的肉的挑战之一是使其具有与真实事物一样的质地。一种新的细胞培养支架可能会有所帮助,因为据说它价格低廉、可以食用,而且是由植物性物质制成。在生产培养肉时,科学家通常会从某种类型的动物(如牛......

细胞培养注意事项(入门级)

总的原则:无菌操作、保证细胞培养环境的稳定性按时间顺序整理1、细胞房和生物安全柜(或超净工作台)先开紫外照射30min。作用:对环境灭菌(空气)。(备注:如果着急,至少也要开15分钟)在做实验之前考虑......

龙沙布局CART:细胞临床生产和细胞培养合作

2018年12月,瑞士生物科技巨头LONZA(龙沙)集团最近在以色列海法的生命科学园开设了新的以色列协同创新研发中心(CIC)。中心旨在利用以色列在软件和细胞/分子生物学和工程方面的前沿专业技术,提高......

细胞培养攻略:细节决定成败

培养细胞就像养育BABY一样,要精心照料,用心呵护。最好每天都去看看它们,满足它们所需要的物质需求,防止出现培养箱缺水、二氧化碳不足、温度不够等各种小意外,还要注意很多小细节,以免开展重复的实验导致不......

如何成为细胞培养大神?

问世间谁人无忧,唯神仙逍遥自在。作为一名终日泡在实验室的实验君,如何在细胞实验中无所不能,超脱轮回做到一个人人羡慕的细胞大神呢?且看向这里,成为细胞大神的六个细节。1.过滤体系自从出现瓶装培养基之后,......

赛多利斯携实验室过滤新产品亮相CPHI2018

分析测试百科网讯2018年6月20日-22日,由欧洲博闻展览咨询有限公司、中国医药保健品进出口商会主办,上海博华国际展览有限公司协办的第十八届世界制药原料中国展——CPHIChina2018在上海新国......

岛津推出细胞培养基分析平台C2MAP2000优化工艺提高产量

分析测试百科网讯岛津科学仪器公司(SSI)宣布推出细胞培养基分析平台C2MAPTM-2000,这是一款全自动化和集成化的样品制备工作站,用于分析细胞培养基。C2MAP系统测量培养上清液中95种成分(包......

C100HT:助力生物制药研发中细胞培养条件优化和克隆筛选

一个生物药的诞生,从发现/筛选到商品化需要很长时间,其中靶标发现和验证靶标消耗的时间就需要几周。最近,SCIEX在其2018年年会期间推出一款颠覆传统筛选方法的新型生物制品分析仪C100HT,它将为生......