目前临床血液学一般检查最常用的检测仪器是血细胞分析仪,它以检测速度快、精确度高、操作简便的优势为临床提供着有用的实验指标,对疾病的诊断和治疗有重要的意义。
全血细胞分析常用的抗凝剂EDTA对细胞形态和血小板计数影响很小,它不影响细胞数目及体积大小,对红细胞形态影响最小,而且还可以抑制血小板聚集。根据国际血液学标准化委员会1993年文件建议血细胞计数用EDTA�K2作抗凝剂,用量为EDTA�K2�2H2O 1.5 mg/ml~2 mg/ml血液。近年来因EDTA引起血小板聚集发生血小板假性减少并不少见,下面是1例血小板减少患者,经试验分析为EDTA依赖性假性血小板减少(EDTA�PTCT)。
1 资料与方法
1.1 临床资料 患者,男,64岁,因肺癌多次入院化疗,此患者在门诊行血常规化验示血小板正常(检测结果距抽血不超过30 min),入院血球分析示血小板计数明显低于参考值范围。(检测结果距抽血时间2 h)。
1.2 仪器与试剂 深圳迈瑞公司Bc-3000全血细胞分析仪,与仪器配套试剂及质控品。
1.3 材料 EDTA�K2真空静脉采血管,枸橼酸钠(1∶9)真空静脉采血管,草酸铵稀释液,瑞氏染液,盐酸稀释液。
1.4 方法 分别用EDTA�K2、枸橼酸钠抗凝管各采外周静脉血2.0 ml,于采血后即刻、0.5 h、1 h、2 h在血细胞分析仪上测定并记录WBC、PLT及MPV,采集患者手指末稍血20 μl加0.38 ml盐酸及草酸铵稀释液进行手工WBC、PLT计数,并制备血涂片观察血小板数量,形态和分布情况。
2 结果
使用EDTA�K2抗凝剂的样本PLT随着时间延长快速下降,MPV增大,WBC计数增高,使用枸橼酸钠抗凝剂的样本三项参数结果在2 h内稳定,手工计数WBC、PLT数与仪器上即刻测定的数值相一致,血涂片镜检血小板聚集,随着时间延长血小板聚集越明显。该患者血凝分析正常,全身皮肤无出血现象,住院后血小板减少属于假性减少,跟样本周转时间长有关。
3 讨论
目前血液分析仪多采用电阻抗法为原理进行血细胞分类和计数。根据血细胞相对非导电性质悬浮在电解质溶液中的细胞颗粒在通过计数小孔时可引起电阻的变化为基础,对血细胞进行计数和体积测定,可见它只是以细胞体积大小来进行。采用EDTA�K2抗凝的样本随着时间延长血小板聚集,分析仪不能计数凝集的血小板,导致本在正常范围的血小板计数很低,当聚集成堆与白细胞体积接近时可被细胞分析仪当作白细胞进行计数,造成此患者血小板假性减少和白细胞假性增多。涂片显微镜下血小板形态也有所变化,EDTA抗凝血中的血小板形态由�盘状变为椭形球状,体积增大,使电阻抗法血细胞分析仪脉冲增大,引起MPV增大。
研究资料表明,EDTA依赖性假性血小板减少症是由EDTA盐抗凝时可诱导血小板互相聚集,堆积发生卫星现象(血小板围绕在单核细胞或淋巴细胞周围呈现卫星现象)致使全自动血细胞分析仪不能确认血小板而计数偏低[1]。EDTA抗凝血引起的假性血小板减少可见于正常人,但多数情况下伴发某些疾病如癌症、自身免疫性疾病、传染性单核细胞增多症、肺心病、肝病及一些原因不明的病症[2]。
EDTA依赖性假性血小板减少现象应该受到重视,特别是住院患者的抗凝血样本,在临床工作中,对于出现的单纯血小板减少应结合患者的病情、体征、血凝分析等实验室检查综合分析,首先排除EDTA�PTCT的可能,力求为临床提供最准确的信息。遇到类似现象,我们可采取相应的措施予以纠正,以获取准确的实验数据。如采用抽血后立即检测、手工计数血小板及血涂片镜检或采用其他种类抗凝剂来鉴别。有文献报道,当EDTA依赖性血小板减少时,可用其他抗凝剂作血小板计数,可避免血小板假性减少,如枸椽酸钠或NaF[3]。
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