ELISA试剂盒实验步骤详解

做任何实验，都不行能完全没有差错，我们能做的就是尽最大的努力削减实验差错。在ELISA试剂盒实验操作中，差错分有系统差错、偶然差错、过错差错，而一个小小的差错主意可以影响到实验，那么怎样才干缩小实验差错呢？除了需求仔细之外，还有一些需求要点留意的当地。

1：留意试剂盒保存期，过保存期的试剂不能运用。

2：评价试剂的实用性，试剂的稳定与否，对率的高低到头重要。在试剂启用前，应进行阴、阳对照及样品重复对比实验，断定试剂符合要求后方可运用。

3：严厉把握显色时刻，显色时刻过短，参加停止液反应停止后，底物结合物的量过少，易呈现假阴性。超过显色要求时刻后显色，应判为假阳性，这可能与试剂本身有关。加显色剂后当即显色，不行报阳性，这可能是本底显色的成果。

4：加样要、快速。如果加样不，酶生成物的量不能断定，直接影响显色成果。显色的深浅及A值的测定与参加显色剂和停止液的量有关，所以加样应稳重。要求在必定时刻内加样结束的实验，如果加样缓慢，便呈现差错，并且试剂长时刻暴露在外，特别室温过高时，保存期会缩短乃至失效。

5：检验技师应具有从事实验室操作的基本素质和实践经验。能娴熟操作实验仪器、器械，具有必定总结和剖析问题的才干，对实验中呈现的意外情况能及时妥善解决。

6：运用校对过的微量移液器，扫除自然差错。移液器与否对定量检测尤为重要。

7：仔细阅读说明书，严厉依照说明书要求进行规范化操作。不同批号的试剂不行混用。值得改善的当地，重复实验断定建立后才干改善。

8：洗刷完全，如若洗板不完全，酶结合物本底显色会呈现假阳性。洗刷液要新鲜，现用现配，陈腐的洗刷液会呈现本底增高现象，也可能呈现假阳性。

9：严控反应时刻，反应时刻过长，酶失活；反应时刻过短，酶结合物不能与血清中的微生物抗原抗体充沛结合，生成物结构松懈不结实，容易洗掉，都可能造成假阴性。