ELISA试剂盒测定中表达产物的检测

ELISA试剂盒表达产物分真核表达产物和原核表达产物，下面看看ELISA试剂盒是如何检测这两种表达产物的吧！

（一）原核（大肠杆菌表达系统）表达产物

1、表达上清（非融合性蛋白）

直接将培养物和上清吸出，10000rmp x10min， 取上清，-20℃或4℃保存，作为标本进行检测，如有需要可进行透析或纯化处理；

2、菌体裂解物（融合性蛋白）

直接将培养物和上清吸出，10000rmp x10min，弃上清，沉淀用洗一遍，500-800rmp x10min，弃上清，DDW重悬沉淀，冰水浴中用超声波裂解仪进行裂解，10000rmp x10min，取上清，-20℃或4℃保存，作为标本进行ELISA试剂盒检测，如有需要可进行透析或纯化处理；

（二）ELISA试剂盒真核表达产物

1、 细胞上清（分泌性蛋白）

1.2、贴壁细胞或半贴壁，直接将细胞培养上清吸出，10000rmp x10min， 取上清，-20℃或4℃保存，作为标本进行检测，如有需要可进行透析或纯化处理；

1.2、不贴壁细胞，将培养基和细胞转移至10ml离心管，500-800rmp x10min，吸取上清至另一10ml离心管中，10000rmp x10min， -20℃或4℃保存，作为标本进行检测，如有需要可进行透析或纯化处理；

2、 细胞裂解物（非分泌性蛋白）

2.1、贴壁细胞或半贴壁，直接将细胞培养上清吸出，然后用001M （pH 7.4）将细胞吹下至10ml离心管，500-800rmp x10min，弃上清，沉淀转移至1.5ml离心管中， DDW重悬，置冰水浴中用超声波裂解仪进行裂解，10000rmp x10min，取上清，-20℃或4℃保存，作为标本进行检测，如有需要可进行透析或纯化处理；

2.2、ELISA试剂盒不贴壁细胞，将培养基和细胞转移至10ml离心管，500-800rmp x10min，弃上清，沉淀移至另一10ml离心管中，0.01M （pH 7.4）重悬，500-800rmp x10min，弃上清，沉淀移至1.5ml离心管中， DDW重悬，置冰水浴中用超声波裂解仪进行裂解，10000rmp x10min，取上清， -20℃或4℃保存，作为标本进行ELISA试剂盒检测，如有需要可进行透析或纯化处理