ELISA试剂盒的选择方法（三）

第三步：检测什么样本？试验周期多长？

如需要检测的是尿液，柠檬酸盐血浆样本，需在订购前仔细查看ELISA试剂盒说明书中的验证样本。简单的说，如果ELISA试剂盒是没有用过试剂盒检测尿样，柠檬酸盐血浆，使用该试剂盒检测尿样会存在极大的风险；而且很多ELISA试剂盒中还会特别说明“不能检测柠檬酸盐血浆”。Vplex试剂盒验证过的样本有血清， EDTA血浆，肝素血浆，柠檬酸盐血浆，尿液，细胞上清液。

如自己采购抗体，开发ELISA方法学，如遇到抗体亲和力低，由于ELISA的两次洗脱将可能将抗体洗掉，大大影响实验结果。Meso Scale Discovery® 可以不用洗，2.5小时完成实验的一步法。

如实验研究周期较长，ELISA试剂盒尽量选择一个批次的，以防止不同批次间的差异。然而由于普通ELISA有效期在3-12个月，而实验周期往往在1-2年以上，一些长期临床实验项目甚至在5-10年，因而经常面临不同批次的挑战。而Meso Scale Discovery®Vplex试剂盒经过54个月稳定性测试。使用Vplex，完全可以用一个批次支持2-3年的实验。更多细节可以比较下表格：

美国Meso Scale Discovery(MSD)：成立于1995年，在2009年全球首次检测到人携带甲型H1N1病毒，在2013年被评为“全球前五的免疫分析品牌”。其研发的基于微孔板的电化学发光检测技术（简称：微孔板ECL ）是全面升级/替代ELISA， Western Blot，多蛋白因子检测的第三代免疫分析技术。已经广泛被医药研发中心、药物安全性评价中心、GLP实验室、合同外包企业（CRO）、诊断、生物技术企业应用于药物筛选，动物模型，药物代谢，血药浓度，免疫原性，中和实验，Biomarker筛选，抗体亲和力，疫苗评估，宿主细胞残留，诊断研究。

美国Meso Scale Discovery(MSD)部分应用方向：

1、细胞因子研究：实现多因子研究，常规灵敏度达0.05pg/ml。符合GLP要求的多因子检测。

2、信号通路研究：可实现同时检测Phospho/Total磷酸化蛋白的研究，仅需4.5小时。

3、神经退行性疾病研究：使用了脑脊液CSF等复杂基质样本检测，无基质效应。

4、药物安全性评估：符合FDA标准的高敏多指标检测。

5、免疫原性评估：可兼容高达50ug/ml高浓度血药干扰，达到<100ng/ml的ADA检测灵敏度，符合FDA要求。

6、抗体亚型分型：快速鉴定样本中不同亚型，可达0.1ng/ml的灵敏度水平

7、抗体表位分析：一次鉴定多达10种不同表位。

8、多价疫苗效价评估：缩短至1.5小时的评估流程。

9、抗体亲和力测试：基于SET方法学的亲和力测定，可分析高达10-15的亲和力样本。

10、中和抗体测定：基于细胞水平，更符合实际生物体要求。

11、细胞水平结合测试：Cell Base Binding测试，多达6log线性范围，能够鉴定细胞表面受体与对应补体结合水平及亲和力

12、生物工艺残留测定：一次检测，可鉴别多种宿主细胞以及纯化工艺中的多种蛋白残留测定，亚纳克基本灵敏度，确保鉴定有效性。