GEN：miRNA检测行业热度不减

　　MicroRNAs （miRNAs）是一种存在于真核生物的内源性非编码小RNA，具有抑制靶向mRNA转录、翻译或者剪切靶向mRNA并促使其降解的功能。它会组装进入沉默复合体（RISC），识别并与靶向mRNA互补配对，从而降解或者阻止mRNA翻译。

　　miRNAs负责调控多种生理过程，包括细胞周期（发育、迁移和凋亡）、干细胞分化、免疫调节、代谢控制、神经发育、病毒复制等等。这意味着，它与多种疾病有关联。miRNAs存在于许多常用组织样本中，包括血浆、血清、唾液以及尿液，且高度稳定，可以作为生物标记物用于多种疾病的诊断，例如癌症、神经性衰退疾病、心血管疾病和自身免疫性疾病。

　　此外，相比于其他生物分子，miRNAs更具有组织特异性，且能够穿过血脑屏障，从而可以成为检测大脑健康的生物标记物，用于检测多种神经类疾病，包括多发性硬化症、阿尔兹海默症和帕金森症。

　　基于上述优势，科研机构以及医药企业开始转向开发基于miRNAs的检测技术和服务项目，它们能够为疾病诊断、防治提供更快捷的过程和手段。而且，这些优势将会推动生命科学领域对miRNAs检测的需求。Kalorama Information公司最新调研报告指出，2015年全球miRNAs检测及服务市场价值约达到4.07亿美元。而且，根据GEN网站报道，基于miRNAs的检测技术和服务至少在未来5年内都将是一个热门领域。

　　miRNAs检测技术

　　目前，miRNAs检测技术主要包括qRT-PCR、微阵列（microarray）、高通量测序技术（NGS）

　　首先，定量即时聚合酶链锁反应（qRT-PCR）能够借助荧光染剂测量每次PCR循环后扩增的核酸总量。但是它在灵敏度、重复性等方面存在局限性。

　　而微阵列则是实现基因表达信息快速检测的重要技术，具有易于操作、成本较低、准确率提高等优点，适用于大规模miRNAs检测。但是它依然在灵敏度上有所欠缺，不能挖掘未知的miRNAs。但是，仍然有不少企业正在开发miRNAs微阵列检测技术，包括Affymetrix、Agilent、Thermo Fisher 和Illumina等等。

　　随着测序技术、仪器、成本的更新优化，高通量测序技术也逐渐成为量化分析miRNAs的热门手段。包括Illumina的 MiSeq、Thermo的Ion Personal Genome Analyzer以及Ion S5 在内的测序平台让miRNAs大样本分析变得更易实现。

　　NGS的优势在于测序通量大、灵敏度高、重复性好，且能够检测未知基因，提供定量定性分析等等。但是，它在miRNAs分析应用上依然存在缺陷，例如样本制备标准高、定量准确性不高、成本相对较高、复杂性增强以及仪器、试剂、数据分析软件涉及不同的供应商增加了工作流程的繁琐性。特别是，针对miRNAs分析的样本制备需要遵循特定的步骤，以减少引物二聚体的形成。

　　miRNAs功能研究

　　“miRNA Mimics”、“miRNA inhibitor”是研究miRNAs功能的典型“工具包”。

　　其中，“miRNA Mimics”是一种通过化学修饰寡核苷酸的方法合成而来的能够模拟生物内源miRNAs的小RNA分子。它会进一步增强内源性miRNA的沉默功能，从而降低蛋白质表达，进行功能获得性（gain-of-function）研究。

　　而“miRNA inhibitor”同样也是化学合成而来，它可以特异地靶向和敲除单个miRNA分子，从而削弱内源miRNA的基因沉默效应，提高蛋白表达量，进行功能缺失性（loss-of-function）研究。

　　Mimics 和inhibitors实验可以同时进行验证miRNA的生物学功能。目前，包括Thermo、Dharmacon、Exiqon、Integrated DNA Technologies、Qiagen、MilliporeSigma在内的多家公司都在开发、生产miRNA功能验证试剂盒。

　　miRNA检测技术和服务市场分析

　　随着基础研究的深入、应用技术的创新、临床转化的推广，miRNA分析及服务依然是一个充满活力和前景的行业。众多生物科技公司在该领域布局，承担着不同产品的开发和生产，包括miRNA特定qRT-PCR 试剂、微阵列、生物标记试剂、NGS文库构建盒、功能验证试剂盒等。

　　该领域的领头军队包括Thermo Fisher、Exiqon、Dharmacon、Qiagen、Illumina。市场竞争力主要依赖于产品的质量和性能，所以产品或者技术是否能够满足科研、临床应用至关重要。