色谱过程的本质是待分离物质分子在固定相和流动相之间分配平衡的过程,不同的物质在两相之间的分配会不同,这使其随流动相运动速度各不相同,随着流动相的运动,混合物中的不同组分在固定相上相互分离。
根据物质的分离机制,又可以分为吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱、凝胶色谱、亲和色谱等类别。
吸附色谱利用固定相吸附中西对物质分子吸附能力的差异实现对混合物的分离,吸附色谱的色谱过程是流动相分子与物质分子竞争固定相吸附中心的过程。
1.基本原理
(1)物理吸附又称表面吸附,是因构成溶液的分子(含溶质及溶剂)与吸附剂表面分子的分子间里的相互作用所引起的。
a)基本规律:“相似者易于吸附”,固液吸附时,吸附剂、溶质、溶剂三者统称为吸附过程的三要素。
b)基本特点:无选择性、可逆吸附、快速。
c)基本原理:吸附与解吸附的往复循环。
d)三要素:吸附剂、溶质(被分离物)、溶剂。
物理吸附过程:吸附——解吸附——再吸附——再解析——直至分离
(2)化学吸附
a)基本特点:有选择性、不可逆吸附。
b)基本原理:产生化学反应。酸性物质与Al₂O₃发生化学反应;碱性物质与硅胶发生化学反应;Al2O3容易发生结构的异构化,应尽量避免。
(3)半化学吸附
1)基本特点:介于物理吸附和化学吸附之间。
2)基本原理:以氢键的形式产生吸附。
如聚酰胺对黄酮类、醌类等化合物之间的氢键吸附,力量较弱,介于前两者之间,也有一定的应用。
2.吸附剂
吸附剂的一般要求:较大的表面积与一定的吸附能力。不与展开剂其化学变化,不与待分离的物质产生反应或催化、分解或缔合,颗粒均匀。
(1)极性吸附剂
硅胶,氧化铝均为极性吸附剂,特点为:
a)对极性物质具有较强的亲和能力,极性强的溶质将被优先吸附。
b)溶剂极性较弱,则吸附剂对溶质将表现出较强的吸附能力。溶剂极性增强,则吸附剂对溶质的吸附能力随之减弱。
c)溶质即使被硅胶、氧化铝吸附,但一旦加入极性较强的溶剂时,又可被后者置换洗脱下来。
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