HPLC的故障及处理

(一) 保留时间变化

1.柱温变化 柱恒温。

2.等度与梯度间未能充分平衡 至少用10倍柱体积的流动相平衡柱。

3.缓冲液容量不够 用>25mmol/L的缓冲液。

4.柱污染 每天冲洗柱。

5.柱内条件变化 稳定进样条件，调节流动相。

6.柱快达到寿命 采用保护柱。

(二) 保留时间缩短

1.流速增加 检查泵，重新设定流速。

2.样品超载 降低样品量。

3.键合相流失 流动相pH值保持在3～7.5，检查柱的方向，

4.流动相组成变化 防止流动相蒸发或沉淀。

5.温度增加 柱恒温。

(三) 保留时间延长

1.流速下降 管路泄漏，更换泵密封圈，排除泵内气泡。

2.硅胶柱上活性点变化 用流动相改性剂，如加三乙胺，或采用碱至钝化柱。

3.键合相流失 同前(二)3。

4.流动相组成变化 同前(二)4。

5.温度降低 同前(二)5。

(四) 出现肩峰或分叉

1.样品体积过大 用流动相配样，总的样品体积小于第一峰的15%。

2.样品溶剂过强 采用较弱的样品溶剂。

3.柱塌陷或形成短路通道 更换色谱柱，采用较弱腐蚀性条件。

4.柱内烧结不锈钢失效 更换烧结不锈钢，加在线过滤器，过滤样品。

5.进样器损坏 更换进样器转子。