WesternBlot实验相关试剂的配制（一）

30%(w/v)丙烯酰胺溶液  

丙烯酰胺             29g

甲叉双丙烯酰胺       1g

加去离子水，定容至 100ml 调整溶液 pH 值不超过 7.0，置棕色瓶中贮存于室温或4℃。 

10%SDS 

SDS                    10g

蒸馏水至             100ml

50℃ 水浴下溶解，室温保存。如在长期保存中出现沉淀，水浴溶化后，仍可使用。

1.5mol/L Tris·HCl （pH8.8）

Tris (MW121.14)      45.43g

超纯水              200ml

溶解后，用浓盐酸调pH至8.8，最后用超纯水定容至250ml，室温下保存。

0.5mol/L Tris·HCl （pH6.8）

Tris (MW121.14)      15.14g

超纯水            200ml

溶解后，用浓盐酸调pH至6.8，最后用超纯水定容至250ml，室温下保存。

10% 过硫酸胺（AP）

过硫酸胺             0.1g

超纯水               1.0ml

溶解后，4℃避光保存，保存时间为1周。（可先将过硫酸胺干粉称好分量后放在EP管中，一次性多装几管，使用时加入超纯水即可） 

20%Tween20  

Tween20             20ml

蒸馏水至             100ml

混匀后4℃保存。

1.74mg/ml (10mmol/L)PMSF

PMSF                 0.174g

异丙醇                100ml

溶解后，分装于1.5ml离心管中，-20℃保存。

单去污剂裂解液（PMSF）

1mol/L Tris·HCl （pH8.0）    2.5ml

NaCl                                0.438g

TritonX-100                           0.5ml

蒸馏水至                                50ml

混匀后4℃保存。使用时，加入PMSF至终浓度为100μg/ml（0.87ml裂解液加入1.74mg/ml PMSF50μl）。

RIPA裂解配方

50 mM Tris-HCl pH 7.4

150 mM NaCl

1 mM PMSF （用前加）

1 mM EDTA

1% Triton x-100

1% 脱氧胆酸钠

0.1% SDS

G250 考马斯亮蓝溶液 （蛋白定量专用）

考马斯亮蓝G250      100mg

95%乙醇             50ml

磷酸                      100ml

蒸馏水至              1000ml

配制时，先用乙醇溶解考马斯亮蓝染料，再加入磷酸和水，混匀后，用滤纸过滤，4℃保存。