WesternBlotting,实验标本处理

抗体和样品要求

1.为保证质量，抗体最好为进口单克隆抗体；

2.样本要求：尽可能新鲜；

3. 样本量：组织样本，质量大于100mg；细胞样本，细胞数大于1×10⁶；

注意事项：

1.市内细胞样品可直接常温运送，运送时在培养瓶中装满培养液并以封口膜封口，建议冻存后运输。

2.取样和存样所用的冻存管、离心管、吸头等必须高温灭菌；

3.所有存样管口需以封口膜封好。

4.如有特别要求，请讲明

1．样本制备及注意事项:

（1）. 悬浮细胞： 取大约 1×10⁷个细胞，低速离心收集，弃去培养液，加入1ml PBS悬浮细胞，转入小离心管中，低速离心沉淀细胞，弃去PBS，放入-70℃ 冰箱保存。干冰运输。

（2）.贴壁细胞：取大约1×10⁷个贴壁细胞，胰酶消化后加入PBS悬浮细胞，低速离心收集，弃去液体，加入 1 ml PBS悬浮细胞，转入小离心管中，低速离心沉淀细胞，弃去PBS，放入-70℃冰箱保存。干冰运输。

（3）.组织：采集新鲜组织（注意：生物体死亡后10分钟内取材料并保存好），组织块以PBS或生理盐水清洗干净，切为小块，放入液氮或-70℃冰箱中保存，干冰运输。