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清华施一公院士Science同期发表两篇新文章

清华大学的施一公(Yigong Shi)教授是国际著名的结构生物学家,在细胞凋亡、大分子机器、膜蛋白研究领域占据国际领先地位。曾荣获国际赛克勒生物物理学奖、香港求是基金会杰出科 学家奖、谈家桢生命科学终身成就奖、瑞典皇家科学院爱明诺夫奖等多个国内外大奖。2008年施一公放弃国外的优厚条件选择回国,在Nature、 Science等国际顶级期刊上发表了多篇论文,同时他也搭建起了以清华大学为中心的人才引入桥梁。现担任中国科学院院士、美国科学院外籍院士和美国艺术 与科学院外籍院士。 本月17日,施一公院士课题组在《自然》(Nature)杂志上发表论文称,采用单颗粒冷冻电子显微镜首次成功获得了完整人类γ-分泌酶(γ -secretase)的原子结构。8月20日,施一公院士再度在《科学》(Science)杂志上同期发表了两篇姊妹研究论文。在第一篇文章中研究人员报 道称,采用单颗粒冷冻电子显微镜获得了分辨率为3.6埃的裂殖酵母剪接体......阅读全文

凝胶过滤实验

操作采用分子筛层析获得的洗脱图谱如图 23.1 A 所 75。零 洗 脱 体 积 (zero elution volu m e ) 是指上样于层析固定相的样品体积。无法进入介质的分子的洗脱体积定义为无效体 积 V 。,它表示颗粒外部的体积。可以进人介质的分子的体积定义为总体积%, 它表示

双向电泳(two-dimensional electrophoresis,2-DE)-3

2.[操作步骤]1. 将标准品BSA(5mg/ml)先稀释成0.5 mg/ml,2. 按0, 1, 2, 4, 8, 12, 16, 20μl分别加到96孔板中,加DDW补足到20μl。3. 加适当体积样品(4μl)到96孔板的样品孔中,加DDW到20μl。4. 各孔加入200μl G-250染色液

凝胶过滤实验

实验步骤 操作 采用分子筛层析获得的洗脱图谱如图 23.1 A 所 75。零 洗 脱 体 积 (zero elution volu m e ) 是指上样于层析固定相的样品体积。无法进入介质的分子的洗脱体积定义为无效体 积 V

冷冻电镜是个啥,有多牛?

2017年诺贝尔化学奖颁给了发明冷冻电镜的三位学者。他们是: 哥伦比亚大学教授约阿基姆·弗兰克(Joachim Frank),苏格兰分子生物学家和生物物理学家理查德·亨德森(Richard Henderson)以及瑞士洛桑大学生物物理学荣誉教授雅克·迪波什(Jacques Dubochet

电子显微镜使用实验(一)

实验方法原理 一、电子显微镜的分辨力和放大率 电子显微镜是利用电子流代替光学显微镜的光束使物体放大成像而由此得名的。发射电子流的电子源部分称为电子枪,电子枪由发射电子的“V”形钨丝及阳极板组成,在高真空中,钨丝被加热到白炽程度,其尖端便发射出电子,发射出来的电子受到阳极很高的正电压的吸引,

蛋白质浓缩和溶质的去除实验

预计在新奇的一级分子和生物仿制药实体方面将会有突出的增长。一些进步的是改良的分析、开发和相互作用。现在已有许多用于去除關的方法,包括冻干、反向萃取、溶质析出,precipitation、透析(溶剂交换) 、超滤和层析技术。值得注意的是,在众多微和设备发展的支持下,小型化和高通量的蛋白质分析取得了极大

蛋白质浓缩和溶质的去除实验

蛋白质浓缩和溶质的去除实验             实验步骤 一、层

电子显微镜使用实验_透射电子显微镜的样品制备

实验方法原理一、电子显微镜的分辨力和放大率 电子显微镜是利用电子流代替光学显微镜的光束使物体放大成像而由此得名的。发射电子流的电子源部分称为电子枪,电子枪由发射电子的“V”形钨丝及阳极板组成,在高真空中,钨丝被加热到白炽程度,其尖端便发射出电子,发射出来的电子受到阳极很高的正电压的吸引,使

吉大校友《PNAS》文章解析蛋白折叠新理论

【分子伴侣】 1978 年,Laskey 在进行组蛋白和DNA 在体外生理离子强度实验时发现,必须要有一种细胞核内的酸性蛋白———核质素(nucleoplasmin) 存在时,二者才能组装成核小体,否则就发生沉淀。据此Laskey 称它为“分子伴侣”。分子伴侣是指能够结合和稳定另外一种蛋白质的

聚丙烯酰胺凝胶电泳仪分析技术(三)

适用的凝胶总浓度:2%~5%(2)核酸相对分子量与凝胶总浓度的关系:1)核酸相对分子量范围:<1×104适用的凝胶总浓度:15%~20%2)核酸相对分子量范围:1×104~1×105适用的凝胶总浓度:5%~10%3)核酸相对分子量范围:1×105~2×106适用的凝胶总浓度:2%~2.6%用于大分子

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳色谱仪的支持介质

聚丙烯酰胺凝胶电泳色谱仪(简称聚丙烯酰胺凝胶电泳仪)的支持介质有原性凝胶和变性凝胶。原性凝胶是在凝胶中不加变性剂,蛋白质在这种凝胶中的迁移率受它们的静电荷和分子大小两个因素的影响,分子量不同,而带静电荷相同,可能迁移率相同。因此,在原性凝胶中进行电泳不能测定蛋白质分子量。变性凝胶是在凝胶中加入变性剂

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳色谱仪的支持介质

        聚丙烯酰胺凝胶电泳色谱仪(简称聚丙烯酰胺凝胶电泳仪)的支持介质有原性凝胶和变性凝胶。原性凝胶是在凝胶中不加变性剂,蛋白质在这种凝胶中的迁移率受它们的静电荷和分子大小两个因素的影响,分子量不同,而带静电荷相同

荧光光谱法在蛋白质研究中的应用

1. 利用蛋白质的天然荧光检测蛋白质的构象变化 利用蛋白质中的芳香族氨基酸残基的侧链基团具有吸收紫外区域的入射光从而发射荧光的特性,来研究蛋白质在变性或复性过程中整体空间构象的变化。其基本机理是: 荧光来源于生色团基团在不同电子能级之间的跃迁,荧光频率取决于能级之间的能量差,生色

透射和扫描电子显微镜样品的制备及观察

实验概要本实验详细介绍了透射和扫描电子显微镜样品的制备及观察。主要试剂醋酸戊脂,浓硫酸,无水乙醇,无菌水,2%磷钨酸钠(pH6.5-8.0)水溶液,0.3%聚乙烯甲醛(溶于三氯甲烷)溶液,细胞色素c,醋酸铵,质粒pBR322。主要设备普通光学显微镜,铜网,瓷漏斗,烧杯,平皿,无菌滴管,无菌镊子,大头

透射和扫描电子显微镜样品的制备及观察

实验概要本实验详细介绍了透射和扫描电子显微镜样品的制备及观察。主要试剂醋酸戊脂,浓硫酸,无水乙醇,无菌水,2%磷钨酸钠(pH6.5-8.0)水溶液,0.3%聚乙烯甲醛(溶于三氯甲烷)溶液,细胞色素c,醋酸铵,质粒pBR322。主要设备普通光学显微镜,铜网,瓷漏斗,烧杯,平皿,无菌滴管,无菌镊子,大头

Cell提出一个新“组学”:蛋白质-代谢小分子互动组学

  科学家们提出了一个新的“组学”——一个处理蛋白质和小分子之间相互作用的互动组学(protein-metabolite interactomics)。此前系统生物学家专注于基因组学或蛋白质组学,现在他们日益发现了蛋白质-代谢小分子之间相互作用的重要性。  基因组学针对的是生物体基因的系统分析,而蛋

蛋白质特性与分离纯化技术的选择

摘要:蛋白质的一级、二级、三级和四级结构决定了它的物理、化学、生物化学、物理化学和生物学性质,综述了不同蛋白质之间的性质存在差异或者改变条件是使之具有差异,利用一种同时多种性质差异,在兼顾收率和纯度的情况下,选择蛋白质提纯的方法。关键词:蛋白质 分离纯化前言    蛋白

蛋白质特性与分离纯化技术的选择

摘要:蛋白质的一级、二级、三级和四级结构决定了它的物理、化学、生物化学、物理化学和生物学性质,综述了不同蛋白质之间的性质存在差异或者改变条件是使之具有差异,利用一种同时多种性质差异,在兼顾收率和纯度的情况下,选择蛋白质提纯的方法。关键词:蛋白质 分离纯化前言    蛋白

蛋白质纯度测定实验

实验步骤在评价样品纯度之前,首先需要鉴定待测杂质的类型,如核酸、碳水化合物、脂质、无关蛋白质、同工酶类、失活蛋白质,进而确定在特定溶液条件中, 能够区分假定杂质和目标蛋白质的理化特性 (化学分析或物理特征)。而纯度则是指待测杂质含量低于某个特定水平。需要注意的是,上述说明中并没有要求描述杂质的性质。

蛋白质纯度测定实验

蛋白质纯度测定实验             实验步骤 在评价样品

小鼠β-actin基因的克隆表达(4)

实验步骤:(1)诱导靶蛋白表达分别挑取对照菌和重组菌1~2个菌落,接入5ml含Amp(30μg/ml)的LB培养液,37℃振荡培养过夜。取5ml过夜培养物接入500ml含Amp(30μg/ml)的LB培养液,37℃振荡培养2h以上,至对数中期(A550=0.5~1.0)。向诱导管中加入IPTG使其浓

双向电泳实验

ISO-DALT 方法 IPG-DALT 方法             实验方法原理 双向电泳(two-dime

双向电泳实验——ISO-DALT 方法

实验方法原理双向电泳(two-dimensional electrophoresis)是等电聚焦电泳和SDS-PAGE的组合,即先进行等电聚焦电泳(按照pI分离),然后再进行SDS-PAGE(按照分子大小),经染色得到的电泳图是个二维分布的蛋白质图。实验材料蛋白质样品试剂、试剂盒尿素去污剂仪器、耗材

浅谈洗涤温度对面筋含量检测的影响

  将小麦粉用水和成面团后,在用水揉洗过程中淀粉及水溶性物质逐渐脱离面团最后只剩下富有弹性、粘连力和延伸性的网络状凝胶物质,这就是面筋。面筋含量是评定小麦粉等级的重要指标之一,面粉厂也可根据面筋含量的高低生产不同用途的面粉,比如面包粉、饺子粉和饼干粉等。因此,研究影响面筋产出率的因素具有重要意义。&

面筋测定仪分析小麦粉面筋标准含量

  面粉的品质评判有很多的标注,白度、面筋含量等。这些都不是通过肉眼就能准确判断的。在面粉生产企业供货前都会通过面筋测定仪进行检测分析,这样得出的面筋含量是比较准确的。那么,什么是面筋呢?    将小麦粉用水和成面团后,在用水揉洗过程中淀粉及水溶性物质逐渐脱离面团最后只剩下富有弹性、粘连力和延伸性的

Nature构建蛋白质分子“搜索网”

  来自华盛顿大学的科学家们,在实验室中利用计算机设计并建造出了能够识别和结合小分子的蛋白质分子“搜索网”。   用计算机设计出能够识别生物学小分子并能与之相互作用的蛋白质现在成为了现实。科学家们成功地构建出了一种蛋白质分子,其编程后可以结合三种不同的类固醇。这一成果有可能更广泛地应用于医学和其他

对蛋白质结晶原理技术的研究

      我们在人类的基因组织中,排列的顺序都是比较整齐的,这个领域中的一些科学家已经将很多的研究转移到了基因上,尤其是在分子遗传学上。我们对分子的蛋白质检测已经成为很多领域的科学家们研究的主要对象了,专家们在不断的研究中发现蛋白质测定仪正是适合农

蛋白质的分离纯化方法

(一)根据配体特异性的分离方法-亲和色谱法 亲和层析法(aflinity chromatography)是分离蛋白质的一种极为有效的方法,它经常只需经过一步处理即可使某种待提纯的蛋白质从很复杂的蛋白质混合物中分离出来,而且纯度很高。这种方法是根据某些蛋白质与另一种称为配体(Ligand)的分子能特异

蛋白质的结构及蛋白质的功能(一)

   蛋白质为生物高分子物质之一,具有三维空间结构,因而执行复杂的生物学功能。蛋白质结构与功能之间的关系非常密切。在研究中,一般将蛋白质分子的结构分为一级结构与空间结构两类。  一、蛋白质的一级结构  蛋白质的一级结构(primary structure)就是蛋白质多肽链中氨

河北华阳L-半胱氨酸厂家

  中文名称:半胱氨酸    中文别名:2-氨基-3-巯基丙酸;β-巯基-α-氨基丙酸;3-巯基丙氨酸;硫代丝氨酸;L-半胱氨酸;L-巯基丙氨酸    分子式:C3H7NO2S    分子式:cysteine HSCH2CH(NH2)COOH,    分子量:121.15    水中溶解度