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上海微系统所等在蚕丝蛋白颅骨固定系统研究中取得进展

颅骨固定产品用于神经外科颅骨修复术中颅骨的固定和修复,起到颅脑保护作用。研究生物兼容性好、力学性能优良、人体可降解吸收的颅骨固定材料和医疗产品一直是新型材料领域的研究热点。近日,中国科学院上海微系统与信息技术研究所陶虎研究员团队和复旦大学附属华山医院教授毛颖团队合作,在蚕丝蛋白颅骨固定系统领域取得进展。1月26日,相关研究成果以A Silk Cranial Fixation System for Neurosurgery为题,在线发表在Advanced Healthcare Materials上。 该研究提出一种新型的基于天然蚕丝蛋白的颅骨固定系统(包括蚕丝蛋白骨钉和连接片),在长达12个月的临床前犬类动物实验中显示了良好的生物兼容性,以及优良的颅骨固定和再连接作用。通过优化蚕丝蛋白提取和再成型工艺,制备大尺寸、材料均匀的蚕丝蛋白块材。在此基础上,研究“蛋白分子结构-力学/降解特性调控”的内在机理,通过控制蚕丝蛋白分子量和......阅读全文

蛋白质分离和分析——凝胶蛋白质染色

实验步骤 基 本 方 案 1 考马斯亮蓝染色检测范围为〇.3〜lMg 每蛋白质条带。材 料(带 V 项 目 见 附 录 1)聚丙烯酰胺凝胶(单 元 12. 3)考马斯亮蓝、银染用固定液考马斯亮蓝染液甲醇/乙酸脱色液7 % (V /V ) 水乙酸Whatman 3M M 滤 纸(可选)干 胶

流式细胞仪实验方法

一、 实验准备1.   标本制备:2.   zui小化非特异性结合: 二、凋亡1.凋亡的检测方法:网站和其它2.PI染色法3.Annexin V 法4.TUNNEL法 三、细胞因子1.激活的细胞因子2.CBA 四、血小板

IHC全攻略3:固定剂的选择

  IHC/ICC实验中使用的所有样本必须经过固定,以维持组织形态,并保留目的分子的抗原性。固定改变了组织的化学组成,因此往往需要在维持组织结构和保留表位之间进行折衷。细胞或组织的不完全固定(固定不足)可能造成组织内目的蛋白的快速水解,并降低了特异的免疫反应性。然而,过度的固定(固定过度)可能导致表

多肽物质分离与分析方法研究进展

  摘 要 综述了近几年来多肽类物质的提取分离与分析方法,主要包括高效液相色法、电泳、质谱及核磁共振等方法在肽类物质研究中的最新应用进展。  多肽类化合物广泛存在于自然界中,其中对具有一定生物活性的多肽的研究,一直是药物开发的一个主要方向。生物体内已知的活性多肽主要是从内分泌腺组织器官、分泌细胞和体

蛋白质、多肽提取分离

1 分离方法   采取何种分离纯化方法要由所提取的组织材料、所要提取物质的性质决定。对蛋白质、多肽提取分离常用的方法包括:盐析法、超滤法、凝胶过滤法、等电点沉淀法、离子交换层析、亲和层析、吸附层析、逆流分溶、酶解法等。这些方法常常组合到一起对特定的物质进行分离纯化,同时上述这些方法也是蛋白

免疫荧光实验方法

 免疫荧光技术是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。它是根据抗原抗体反应的原理,先将已知的抗原或抗体标记上荧光基团,再用这种荧光抗体(或抗原)作为探针检查细胞或组织内的相应抗原(或抗体)。利用荧光显微镜可以看见荧光所在的细胞或组织,从而确定抗原或抗体的性质和定位,以及

流式细胞仪和流式细胞术指南篇-1

Jay Haron Ph. D.jay dot haron at gmail dot comBD Biosciences, San Diego, United States引用实验材料和方法  从1968年 zui早的商品化 流式细胞术(FC) 和荧光激活细胞分类术(FACS)诞生以来,

蛋白质分离纯化的新技术及技术要点

浅述蛋白质分离纯化的新技术摘 要: 本文主要介绍了浊点萃取法、置换色谱法、亲和层析法、亲和色谱法、凝胶电泳、双水相萃取等蛋白质的最新分离纯化技术,综和近年来国内外的一些研究结果,结合实际应用的例子,分析了各种分离纯化方法的优点,同时指出其不足之处。文章最后展望了蛋白质分离纯化技术的发展趋势。&nbs

免疫组化实验原理和步骤

  实验原理:   抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性,免疫组织化学正是利用了这一原理。先将组织或细胞中的某种化学物质提取出来,以此作为抗原或半抗原,通过免疫动物后获得特异性的抗体,再以此抗体去探测组织或细胞中的同类的抗原物质。由于抗原与抗体的复合物是无色的,因此还必须借助于组织化学的方法将抗原

使用胶做western blot的方法

在经典的Western Blot的世界里,蛋白电泳—转膜—封闭—抗体—显色这个五步骤环环相扣,构成WB完整过程,就象砌积木一样,少了前面一步的基础后面的就砌不上去。但是亲爱的朋友,告诉我,你们在一次又一次重复这个貌似简单又颇为费时的实验时,有没有设想过能省略掉其中的某个费时的非必需步骤,更直接更快得

蛋白芯片技术解析(二)

蛋白芯片应用:蛋白芯片检测蛋白芯片检测技术按照模式和应用的不同可以分为:正相和反相检测技术。目前广泛使用的是正相蛋白芯片分析技术,它利用不同样品与固定在芯片上的大量已知捕捉分子的相互作用,来同时进行多参数的检测分析。这项技术包括了用于识别和定量目标蛋白的抗体芯片技术和用于分析蛋白和固定结合分子相互作

第十四届全国离子色谱学术大会报告(一)

  2012年9月17日~18日,第十四届全国离子色谱学术报告会在历史悠久的古城西安隆重召开,大会期间共有来自全国40多位离子色谱专家做大会报告,内容涉及离子色谱理论研究、检测方法建立、样品处理方法研究、联用技术、仪器功能开发等。分析测试百科网作为本届大会的应邀媒体,将对大会报告

方案2 细胞裂解液中相互作用蛋白的亲和纯化

实验材料培养的细胞系探针蛋白、重组表达或化学合成的肽探针试剂、试剂盒考马斯亮蓝乙醇胺-HCl磷酸盐缓冲液叠氮化钠裂解缓冲液2 X SDS-PAGE 凝胶上样缓冲液SDS-PAGE 梯度凝胶Na3PO4仪器、耗材水浴锅或电加热块层析柱透析膜凝胶电泳仪微型离心机微量离心管管式混合器解剖刀紫外分光光度计实

Isotype胞内染色有哪些学问?来看看这篇文章怎么说

  对科研党来说,流式细胞术一点都不陌生,它以自己特有的方式从细胞蛋白水平定量检测目标蛋白的表达,并且能get到目标蛋白在各个细胞亚群中的表达,同时在细胞功能上也有很重要的作用,包括细胞凋亡,细胞周期,细胞增殖等等。  流式细胞术以细胞为研究对象,在流式细胞仪的作用下定量检测样品细胞的物理化学特征,

免疫电镜原理和影响因素

(一) 原理免疫电镜技术是免疫化学技术与电镜技术结合的产物,是在超微结构水平研究和观察抗原、抗体结合定位的一种方法学。它主要分为两大类:一类是免疫凝集电镜技术,即采用抗原抗体凝集反应后,再经负染色直接在电镜下观察;另一类则是免疫电镜定位技术。该项技术是利用带有特殊标记的抗体与相应抗原相结合,在电子显

免疫电镜(Immune electron microscopy)原理

(一)  原理 免疫电镜技术是免疫化学技术与电镜技术结合的产物,是在超微结构水平研究和观察抗原、抗体结合定位的一种方法学。它主要分为两大类:一类是免疫凝集电镜技术,即采用抗原抗体凝集反应后,再经负染色直接在电镜下观察;另一类则是免疫电镜定位技术。该项技术是利用带有特殊标

表面等离子共振技术在蛋白-蛋白相互作用的应用(二)

控制软件SensiQ的控制软件在原始反应曲线生成时,同时并实时获取和展示两个通道内的数据。参照通道内的数据被减除,以补偿热漂移、非特异性结合、总折射指数移相等效应,从而得到清晰高质的实验数据。控制软件在反应曲线上简单加入报告点,用来确定样品注入后产生的结合反应。报告点的添加可在实验中的任何时候由人工

流式细胞仪实验方法-2

六、流式检测细胞染色基本过程(以全血为例)1、   收获细胞:肝素钠抗凝的静脉血,按1:1与培养基混匀,加刺激剂,同时加蛋白转运抑制剂(参照说明书), 混匀后,37℃,5%二氧化碳培养4-6小时2、   阻断Fc受体:用于消除非特异性的结合

为什么必须重视血清蛋白电泳和免疫固定电泳?

许多骨髓瘤患者不是很清楚血清蛋白电泳(简称SPEP)和免疫固定电泳的重要作用,他们(当然,主要是指IgG型患者)往往只重视免疫球蛋白定量指标,以为只要根据这个指标的变动,就可以掌握病情,调整用药方案,用药或停药。其实,这个认识是不全面的。当然,在一些地区,尚无法进行上述检测。不过,了解和掌握相关知识

免疫荧光实验方法-2

(二)固定和通透   除研究细胞表面抗原或不稳定抗原可不固定外,一般均应固定。固定的目的有三:   ①防止细胞从玻片上脱落;   ②除去防碍抗原-抗体结合的类脂;   ③使标本易于保存。   标本的固定原则是:

盘点:31项与免疫学有关的分子生物学实验技术

  现代分子生物学和免疫学的进展加深了我们对许多疾病的了解,并且导致了免疫新策略的产生,免疫学检测方法可分为体液免疫和细胞免疫测定。本文盘点了与免疫学有关的分子生物学实验技术汇总。  一、GST pull-down实验  GST是指谷胱甘肽巯基转移酶,GST pull-down实验是一个行之有效的验

手性色谱柱知识(二)

环糊精型:环糊精是通过Bacillus Macerans 淀粉酶或环糊精糖基转移酶水解淀粉得到的环型低聚糖。通过控制环糊精转移酶的水解反应条件可得到不同尺寸的环糊精。市售的环糊精主要是α、β、γ三种类型,分别含6、7、8个吡喃葡萄糖单元。环糊精分子成锥筒型,构成一个洞穴,洞穴的孔径由构成环糊精的

一文读懂Native ESI-MS如何监测SEC分离过程中蛋白质变性

  尺寸排阻色谱(SEC)与非变性电喷雾电离质谱(Native ESI-MS)联用技术是研究天然蛋白质的有效工具。但已报道的研究大多集中于技术应用,并未验证蛋白质在所用分离条件下是否处于原始状态,也未评估SEC洗脱条件对蛋白质-固定相的相互作用和蛋白质变性的影响。近期发表在Analytical Ch

双向凝胶荧光染色与成像实验

试剂、试剂盒:提取液                                        

双向凝胶荧光染色与成像实验

试剂、试剂盒提取液洗涤液溶解液第一向电泳缓冲液还原溶液烷基化溶液琼脂糖溶液丙烯酰胺凝胶溶液仪器、耗材双向凝胶电泳光扫描仪或密度计实验步骤3.1 可溶性总蛋白的提取方法(三氯乙酸/丙酮法)( 1 ) 从拟南芥细胞悬浮培养液中收集细胞。( 2 ) 液氮中研磨细胞。( 3 ) 向研磨好的细胞粉末中加入提取

双向凝胶荧光染色与成像实验

试剂、试剂盒 提取液洗涤液溶解液第一向电泳缓冲液还原溶液烷基化溶液琼脂糖溶液丙烯酰胺凝胶溶液仪器、耗材 双向凝胶电泳光扫描仪或密度计实验步骤 3.1 可溶性总蛋白的提取方法(三氯乙酸/丙酮法)( 1 ) 从拟南芥细胞悬浮培养液中收集细胞。( 2 ) 液氮中研磨细胞。( 3 ) 向

蛋白质凝胶染色法实验2

2. 总蛋白质荧光法染色荧光染色法结合了检测灵敏度 (可与银染法媲美) 与染色流程简便性 (与考马斯亮蓝染 色 或 Z n 2+ 反染法相同),且其线性定量范围较比色法大 10〜100 倍 。检测依赖于仪器,需要一个单色激发光源、能将波长较长的发射光从波长较短 (也更亮)的激发光

石蜡包埋组织的DNA提取及其应用

近10年来,现代分子生物学技术越来越广泛地被用于人类疾病研究的诸领域,为了解病理状态下基因组DNA的变化积累了新资料。目前认为,人类基因组并非人们想像的那样稳定,诸如基因重排、扩增、缺失,突变和DNA甲基化类型改变等时有发生,这些改变对于基因表达和调控,以及疾病过程的发展与转归等方面均具有重要意义。

石蜡包埋组织的DNA提取方法

近10年来,现代分子生物学技术越来越广泛地被用于人类疾病研究的诸领域,为了解病理状态下基因组DNA的变化积累了新资料。目前认为,人类基因组并非人们想像的那样稳定,诸如基因重排、扩增、缺失,突瘘和DNA甲基化类型改变等时有发生,这些改变对于基因表过和调控,以及疾病过程的发展与转归等方面均具有重要意义。

石蜡包埋组织DNA提取方法

近10年来,现代分子生物学技术越来越广泛地被用于人类疾病研究的诸领域,为了解病理状态下基因组DNA的变化积累了新资料。目前认为,人类基因组并非人们想像的那样稳定,诸如基因重排、扩增、缺失,突瘘和DNA甲基化类型改变等时有发生,这些改变对于基因表过和调控,以及疾病过程的发展与转归等方面均具有重要意义