高效液相色谱仪流动相脱气方法

在食品分析中,无论是残留分析还是成分分析,高效液相色谱仪(HPLC)也已成为不可或缺的分析仪器。流动相脱气是HPLC系统能得到可靠数据的一个很有效的措施。下面分析一下,高效液相色谱脱气的必要性,并总结归纳了脱气常用的方法。一、脱气的必要性流动相脱气是HPLC系统能得到可靠数据的一个很有效的措施。HPLC泵在输送液体时要产生很大的力量,由于气体的压缩比与液体相比大的多,因而当气泡存在时,我们发现瞬间的流速降低和系统压力下降,如果这个气泡足够大,液相泵将不能输送任何溶剂,而且如果压力低于预先设定的压力低限,泵将停止工作。当一个气泡通过输液泵时,由于系统压力大,气泡通常会溶解在流动相溶液中,随流动相通过柱子,但是到达检测器流通池时,系统压力又恢复到了大气压,因而气泡可能在检测器流通池中又显现出来,在色谱图上会出现不规律的毛刺。因此,为了保证高效液相色谱结果的准确性,脱气是一个相当重要的环节。二、脱气方法1.吹氦脱气法利用氦气在液体中溶......阅读全文

高效液相色谱的使用方法

高效液相色谱仪操作步骤如下:1).过滤流动相,根据需要选择不同的滤膜.2).对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。3).打开hplc工作站(包括计算机软件和色谱仪),连接好流动相管道,连接检测系统。4).进入hplc控制界面主菜单,点击manual,进入手动菜单。5).有一段时间没用,或者换了

液相色谱柱保养方法及其使用

  液相色谱仪由检测器、高压液体泵及液相色谱柱等三部分组成,其中液相色谱柱的正确安装和使用,是液相色谱工作的关键;同时也是液相色谱工作者获得正确且可靠的实验数据的必经之路。   一、液相色谱柱的安装:   1、液相色谱柱的结构:   a、空柱由柱接头、柱管及滤片组装而成。   柱接

液相色谱柱选择方法及保存

一、液相色谱柱选择方法液相色谱柱选择的简单思路1.确定分离目的确定你的应用是否要求高分离度、短分析时间、高灵敏度、长柱寿命,低的操纵本钱等等。2.评估分析物的化学性质评估分析物的化学性质..诸如化学结构、溶解性、稳定性等等。3.选择合适的色谱柱了解色谱填料的物理和化学性质。液相色谱柱的保存1.反相色

液相色谱柱保养方法及其使用

液相色谱仪由检测器、高压液体泵及液相色谱柱等三部分组成,其中液相色谱柱的正确安装和使用,是液相色谱工作的关键;同时也是液相色谱工作者获得正确且可靠的实验数据的必经之路。 一、液相色谱柱的安装: 1、液相色谱柱的结构: a、空柱由柱接头、柱管及滤片组装而成。 柱接头采用低死体积结构,柱接头是两端螺纹组

液相色谱柱的使用方法

色谱柱在使用前,进行柱的性能测试,并将结果保存起来,作为今后评价柱性能变化的参考。但要注意:柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同;另外,在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是zui佳条件),只有这样,测得的结果才有可比性。  1、样品的前处

液相色谱柱的故障处理方法

 流动相内有气泡,关闭泵,打开泄压阀,打开purg键,清洗脱气,气泡不断从过滤器冒出,进入流动相,无论打开purge键几次,都无法清除不断产生的气泡。原因过滤器长期沉浸于乙酸铵等缓冲液内,过滤器内部由于霉菌的生长繁殖,形成菌团,阻塞了过滤器,缓冲液难以流畅地通过过滤器,空气在泵的压力作用下经过滤器进

液相色谱柱正确使用方法

一、样品方面1.除去微粒及杂质2.了解样品在流动相中的溶解度如溶样品的溶剂不是流动相,一定要用流动相试溶解度,防止其在流动相中析出3.了解样品与色谱柱的基质/填料是否有相互作用二、流动相方面1.除去微粒纯度的要求:超纯水,梯度实验时水中有机杂质含量要低;缓冲液的PH值,在填料的允许范围内;缓冲液(盐

液相色谱柱的故障处理方法

  气泡溢出   流动相内有气泡,关闭泵,打开泄压阀,打开purg键,清洗脱气,气泡不断从过滤器冒出,进入流动相,无论打开purge键几次,都无法清除不断产生的气泡。原因过滤器长期沉浸于乙酸铵等缓冲液内,过滤器内部由于霉菌的生长繁殖,形成菌团,阻塞了过滤器,缓冲液难以流畅地通过过滤器,空气在泵的压力

液相色谱柱的保存方法介绍

  1.反向色谱柱实验后的保养:  使用缓冲液或含盐的流动相,实验完后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟,洗掉色谱柱中的盐,再用甲醇冲洗30分钟。注意:不能用纯水冲洗柱子,应该在水中加入10%的甲醇,防止将填料冲塌陷。  2.长期保存色谱柱:  如,色谱柱要长时间保存,必须存于合适的溶剂下,对于反相柱

高效液相色谱之高效反相液相色谱(一)

反相色谱(reversed phasc chromatography, RPC)是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式,任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分,这部分越大,一般保留值越高,在高效液相色谱中这是应用面最广的一种分离模式,在生物大分子的反相液相色

高效液相色谱之高效反相液相色谱(二)

附:色谱柱操作说明,(以迪马公司Diamonsil(TM)柱为例)1. 色谱柱常规参数订货号:Catalog.No.             产品ZL号 Serial No.出厂日期  Date填料  Column Paking     如,Diamonsil(TM)钻石C18 5цm柱规格 Col

液相色谱的分类和高效液相色谱用途

  制备型加压液相色谱,按照色谱柱和样品量的大小,分为:(1)低压液相色谱;(2)中压液相色谱;(3)高压液相色谱;(4)快速色谱。低压、中压与高压液相色谱的压力范围之间会存在一定交叠,没有统一、明确的标准。   1、快速色谱   柱压通常为2bar(或30psi)左右,对于那些容易分离的简单混

高效液相色谱之高效排阻液相色谱

高效液相色谱(High Rerformance Liquid Chromatography, HPLC)又叫高压、高速、近代液相色谱,通常叫做高效液相色谱。它是60年代中期才建立的一种高效快速分离化合物的方法,到了70年代后期才广泛用于蛋白质的分离纯化方面,现已成为分离纯化蛋白质非常有效的方

C18液相色谱柱色谱柱液相色谱柱

分析型到制备型一套完整的填料体系,目前可提供的填料键合相有C18、C4、C8、SI、NH2、CN、Phenyl、Diol以及手性填料TBB和 DMB。孔径有60A、100A和300A三种,满足不同条件的分析。填料粒径可以提供3.5um、5um、7um、10um、13um和16um六种。可谓品

液相色谱仪的流动相为什么要脱气

一、液相色谱仪的流动相脱气的必要性流动相脱气是HPLC 系统能得到可靠数据的一个很有效的措施。HPLC 泵在输送液体时要产生很大的力量,由于气体的压缩比与液体相比大的多,因而当气泡存在时,我们发现瞬间的流速降低和系统压力下降。如果这个气泡足够大,液相泵将不能输送任何溶剂,而且如果压力低于预先设定的压

液相色谱仪流动相为什么要预先脱气?

液相色谱仪流动相中的溶解气体进入检测器时,会引起光吸收或电信号的变化,基线突然跳动,干扰检测;溶解气体进入色谱柱时,可能与流动相或固定相发生化学反应;溶解气体还会引起某些样品的氧化降解,给分离和分析结果带来误差。因此,流动相使用前必须进行脱气处理。流动相脱气方法有:吹氦脱气法、加热回留法、超声波脱气

液相色谱仪的流动相为什么要脱气

一、液相色谱仪的流动相脱气的必要性流动相脱气是HPLC 系统能得到可靠数据的一个很有效的措施。HPLC 泵在输送液体时要产生很大的力量,由于气体的压缩比与液体相比大的多,因而当气泡存在时,我们发现瞬间的流速降低和系统压力下降。如果这个气泡足够大,液相泵将不能输送任何溶剂,而且如果压力低于预先设定的压

高效液相色谱仪流动相脱气必要性

高效液相色谱仪流动相脱气必要性     流动相脱气是HPLC系统能得到可靠数据的一个很有效的措施。HPLC泵在输送液体时要产生很大的力量,由于气体的压缩比与液体相比大的多,因而当气泡存在时,我们发现瞬间的流速降低和系统压力下降,如果这个气泡足够大,液相泵将不能输送任何溶剂,而且如果压力低于预先设定

常用的鉴别方法高效液相色谱和气相色谱鉴别法

一般规定按供试品含量测定项下的高效液相色谱条件进行试验,要求供试品和对照品色谱峰的保留时间(tR)一致。含量测定方法为内标法时,要求供试品溶液和对照品溶液色谱图中药物峰的保留时间与内标物的保留试剂比值应相同。高效液相色谱和气相色谱鉴别法操作比较复杂,耗时长,一般在检查或含量测定项下已采用色谱法的情况

液相色谱原理

液相色谱仪是一款以用户为核心的智能化的色谱仪,具有常规HPLC的基本性能,并扩展了更多智能化的功能,能很好的满足用户的各类不同的应用要求,使用户能更加轻松的使用,并获得准确的分析数据。一、原理:高效液相色谱法的原理是在原始的经典色谱法基础上面引用气象色谐的理论,色谱柱则是用特殊的方式用小颗粒装填而成

液相色谱简介

 什么是色谱? 色谱法是一种物理化学分析方法。它利用混合物中组分在两相间分配系数的差别,当溶质在两相间作相对移动时,各组分在两相间进行多次分配,从而使各组分得到分离。 2. 色谱的发展 色谱这一概念是由俄国植物学家Tswett(茨维特)1903提出的,他在一根细长的玻璃管中装入碳酸钙粉末,然后将植物

液相色谱原理

液相色谱原理是一种物理分离技术。1、液相色谱是一类分离与分析技术,其特点是以液体作为流动相,固定相可以有多种形式,如纸、薄板和填充床等。在色谱技术发展的过程中.为了区分各种方法,根据固定相的形式产生了各自的命名,如纸色谱、薄层色谱和柱液相色谱。2、经典液相色谱的流动相是依靠重力缓慢地流过色谱柱,因此

液相色谱种类

  高效液相色谱系统在原有等度、二元高压梯度基础上增加了半制备、制备系统、四元低压梯度系统,从单一的紫外检测器发展配备了紫外-可见光检测器,示差检测器,荧光检测器、蒸发光散射检测器等。一、液相色谱柱温箱功 能 特 点:l         温度控制采用先进微处理机芯片,精度高而稳定。l        

液相色谱原理

高效液相色谱(HPLC)的原理:以高压下的液体为流动相,并采用颗粒极细的高效固定相的柱色谱分离技术。高效液相色谱对样品的适用性广,不受分析对象挥发性和热稳定性的限制,因而弥补了气相色谱法的不足。在目前已知的有机化合物中,可用气相色谱分析的约占20%,而80%则需用高效液相色谱来分析。高效液相色谱和气

高压液相色谱

Martin 和 Synge在1941年就提出高效相色谱的设想,然而直到六十年代后期,由于各种技术的发展,高效液相色谱才付诸实现。这种色谱技术曾被称为高速液相色谱(HighSpeed Liquid Chromatography),高压液相色谱(High Parss-ure Lipuid Chroma

液相色谱流动相小议

一、液相色谱流动相的性质要求一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。选好填料(固定相)后,强溶剂使溶质在填料表面的吸附减少,相应的容量因子k降低;而较弱的溶剂使溶质在填料表面吸附增加,相应的容量因子k升高。因此,k值是流动相组成的函数。塔板数N一般与流

液相色谱仪常用的几种脱气方法

液相色谱仪常用的脱气方法有如下几种: 吹氦脱气法使用在液体中比空气溶解度低的氦气,在0.1MPa压力下,以约60ml/min流速通入流动相10-15min以驱除溶解的气体。此法适用于所有的溶剂,脱气效果较好,但在国内因氦气价格较贵,本法使用较少。    加热回流法此法的脱气效果较好。    抽真空脱

液相色谱柱与高效液相色谱柱的区别

普通液相柱与高效液相柱的原理都是一致的,只不过后者是高效的可以缩短检测的时间,节省流动相,大大节省时间。普通的液相色谱柱的径口一般是是5um,高效液相色谱柱的径口一般在3.5um有的在3um甚至在1.7um,相比之下高效液相柱比普通液相柱径口更小,管长更短、柱压大,而普通液相柱承受不住高压,所以没有

液相色谱薄层色谱联用

薄层色谱在有机分析,特别是药物分析,和样品的分离纯化中得到广泛的应用。气相色谱和薄层色谱的联用比较简单,早在20世纪60-70年代就有商品仪器介绍,主要是气相色谱分离分析后,利用薄层色谱帮助定性。而用薄层色谱预分离后再用气相色谱进行分离分析也是很方便可行的,故对气相色谱和薄层色谱的联用在此就不多作介

液相色谱质谱仪液相部分的维护

液相部分的维护  要求使用220V单相交流电。如发生断电,不管任何原因造成的,首先关闭仪器面板左下角的开关,等待供电恢复10分钟以上再开启电源,否则有可能烧毁电路板。  仪器运行时需提供纯度>99%的氮气作为喷雾与干燥气,输出压力为0.6~0.7MPa。  实验开始前先检查液氮罐液体存量是否充足。