荧光组化实验中的注意事项
1．每种荧光染料，均有自己的最适PH值，此时荧光最强。当pH改变时，不仅荧光强度减弱，而且波长将有所改变，因此荧光检测时要在一定的PH值的缓冲液中进行。2．放荧光染色在20。C以下时荧光比较稳定，温度升高常出现温度猝灭。3．在荧光观察中，常因激发光的增强而使样品荧光很快衰竭，造成观察和照相困难。为此最好用能量小的长波长光进行观察，需照相时再适当增强激发光。4．一般荧光染液的浓度在万分之一以下，甚至亿万分之一，也能使标本着色。在一定的限度内，荧光强度可随荧光素的浓度增加而增强，但超过限度，荧光强度反而下降，这是由于荧光分子间的缔合而使自身荧光猝灭所致。......阅读全文
关于原子荧光的类型－敏化荧光的介绍
受光激发的原子与另一种原子碰撞时，把激发能传递给另一个原子使其激发，后者再以发射形式去激发而发射荧光即为敏化荧光。火焰原子化器中观察不到敏化荧光，在非火焰原子化器中才能观察到。 在以上各种类型的原子荧光中，共振荧光强度最大，最为常用。 量子效率与荧光猝灭 受光激发的原子，可能发射共振荧光，也
免疫组化的试剂准备
最重要的是选择好一抗、二抗或者还有三抗，注意抗体的特异性、效价和交叉反应，最好用单抗。其他常用试剂有：1、0.01M(pH7.4)的磷酸盐缓冲生理盐水（PBS），稀释抗体和洗片子用；2、清洁液、纯水，洗玻片用3、多聚赖氨酸处理载玻片，防止脱片4、固定液：4%多聚甲醛或冷丙酮等；5、15%~30%蔗糖
免疫组化的操作流程
实验概要本文介绍了免疫组织化学实验操作流程，主要有：脱蜡和水化，抗原修复及免疫组织化学染色等步骤。实验原理免疫组化，是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位
石蜡切片免疫组化实验
即用型(Envision)快速酶免疫组化二步法免疫组化可应用于：（1）确定组织细胞内抗原 (多肽和蛋白质)，对其进行定位、定性及定量的研究；（2）诊断异常细胞，指导治疗。实验方法原理根据聚合酶技术把辣根过氧化物酶抗鼠或/和抗兔IgG分子结合在多聚酶上形成多聚物分子,其与待检的抗原特异性的结合后，加入
免疫组化操作规程
（一）、仪器设备 1）18cm不锈钢高压锅或电炉或医用微波炉； 2）水浴锅 （二）、试剂 1）PBS缓冲液（pH7.2～7.4）：NaCl 137mmol/L，KCl 2.7mmol/L，Na2HPO4 4.3mmol/L， KH2PO4 1.4mmol/L。
免疫组化操作规程
免疫组化操作规程（一）、仪器设备 1）18cm不锈钢高压锅或电炉或医用微波炉； 2）水浴锅（二）、试剂 1）PBS缓冲液（pH7.2～7.4）：NaCl 137mmol/L，KCl 2.7mmol/L，Na2HPO4 4.3mmol/L， KH2PO4 1.4mmol/L。
免疫组化技术规范
欧美国家相继开展了免疫组化质量控制工作，建立了一套比较完善的质量控制方法和程序。中国病理工作者委员会（CCP）免疫组化研究中心借鉴国外的先进经验并结合我国当前的实际情况开始探索一种适合我国免疫组化质控的方法，同时，发现和推广标准化的染色程序，改善和提高免疫组化实验的可靠性，使免疫组化技术更具标
免疫组化设备优势介绍
免疫组织化学技术在病理诊断中具有十分重要的作用。为保证免疫组化制片的准确性,可重复性与整体染色的一致性,全自动免疫组化染色仪已被广泛使用。 全自动免疫组化仪的优点： 1. 全自动免疫组化仪具有对切片以及抗体的识别功能，保证抗体准确滴加无误； 2. 仪器内部恒温，基本不受外界环境温度影响；
免疫组化的操作步骤
一 免疫组化（SP法）操作步骤1． 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复，可在此步后进行2.缓冲液洗 3min/2 次。3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色，将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。4. 缓冲液洗 5min/2 次。5. 滴加
免疫组化的操作步骤
一 免疫组化（SP法）操作步骤 1． 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复，可在此步后进行 2.缓冲液洗 3min/2 次。 3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色，将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。 4. 缓冲液洗 5min/
免疫组化－－病理诊断－（一）
在临床病理诊断中，免疫组织化学(IHC)是一种很重要的技术和手段，从20个世纪70年代开始，免疫组化技术就应用于病理诊断，对于诊断肿瘤、肿瘤分类、判断预后产生了巨大的影响，同时也扩展了人们对于各种疾病及肿瘤形成过程的认识，提高了病理诊断与研究水平。但是，随着免疫组化的广泛应用，发现免疫组化技术存在一
石蜡切片免疫组化实验
即用型(Envision)快速酶免疫组化二步法 链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结SP法 卵白素-生物素-过氧化物酶复合物（ABC）法 链霉亲和素—生物素—过氧化物酶复合物（SABC）法
石蜡切片免疫组化染色
实验概要掌握石蜡切片免疫组化染色实验中载玻片的处理，常用酶消化，抗原热修复及基本实验步骤。实验步骤1. 载玻片的处理 1) APES：现用现配。将洗净的玻片放入以1:50比例丙酮稀释的APES中，停留20~30秒钟，取出稍停片刻，再入纯丙酮溶液或蒸馏水中涮去未结合的APES，置通风橱
什么是免疫组化染色
是病理学诊断方法，尤其是免疫组化在肿瘤诊断和鉴别诊断中的实用价值受到了普遍的认可。免疫组织化学的临床应用主要包括以下几方面：(1)恶性肿瘤的诊断与鉴别诊断；(2)确定转移性恶性肿瘤的原发部位；(3)对某类肿瘤进行进一步的病理分型；（4）软组织肿瘤的治疗一般需根据正确的组织学分类，因其种类多、组织形态
免疫组化的操作步骤
1. 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复，可在此步后进行2.缓冲液洗 3min/2 次。3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色，将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。4. 缓冲液洗 5min/2 次。5. 滴加 Ultra V Block ，
免疫组化实验方法
一、免疫组化（Immunohistochemistry,IHC/ Immunocytochemistry, ICC）原理免疫组化是应用免疫学基本原理--抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂 （荧光素、酶、金属离子、同位素） 显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质
石蜡切片免疫组化染色
实验概要掌握石蜡切片免疫组化染色实验中载玻片的处理，常用酶消化，抗原热修复及基本实验步骤。实验步骤1. 载玻片的处理 1) APES：现用现配。将洗净的玻片放入以1:50比例丙酮稀释的APES中，停留20~30秒钟，取出稍停片刻，再入纯丙酮溶液或蒸馏水中涮去未结合的APES，置通风橱
尿液沉渣组化定位的进展
经常在泌尿系统疾病中见到的沉渣有各种管型、粘液丝、红细胞等，确定其来源，明确病变部位对诊断和治疗都有重要意义，目前临床常用的相差显微镜法和光镜染色法，人为因素影响较大，最终难于明确诊断，近年国内外多人报道应用免疫细胞化学染色法判断尿沉渣成分，较为科学的确定其是肾性还是非肾性沉渣。 一、尿红细胞免
免疫组化－－病理诊断－（二）
2.6进一步分类不同器官与组织交界处肿瘤由于重叠的特征，在一些组织器官交界处的肿瘤，仅凭组织学基础对肿瘤进行分类很困难。如胃肠道梭形细胞肉瘤是肌肉起源的平滑肌肉瘤，是间质起源的胃肠道间质瘤(GIST)，还是神经起源的神经鞘瘤;同样发生于组织交界处的肿瘤有睾丸胚胎癌与精原细胞癌，两者较难区别，且治疗与
常用免疫组化染色方法
常用免疫组化染色方法，真空负压免疫荧光染色法染细胞培养片。1. 将细胞爬于载玻片或盖玻片的片子用生理盐水浸洗数次，彻底洗去蛋白液。2.纯丙酮固定5-10分钟。3.PBS浸洗3次，每次1分钟。4.加入选用的第一抗体孵育真空负压处理15分钟。5.PBS洗3次，每次2分钟。6.加入荧光抗体孵育真空负压处理
免疫组化的作用介绍
标本 实验所用主要为组织标本和细胞标本两大类，前者包括石蜡切片（病理切片和组织芯片）和冰冻切片，后者包括组织印片、细胞爬片和细胞涂片。 其中石蜡切片是制作组织标本最常用、最基本的方法，对于组织形态保存好，且能作连续切片，有利于各种染色对照观察；还能长期存档，供回顾性研究；石蜡切片制作过程对组
什么是免疫组化检查？
免疫组化，即免疫组织化学检测，是病理诊断中一种常用的检测手段。即对送检的标本进行切片、染色，进而根据化学反应使标记抗体的特殊显色剂显色，以此来确定组织细胞内的抗原，对其进行定位、定性及定量的研究。我们通过这些能看到的结果再做出合理的判断，提供给临床医师，为临床治疗医师提供治疗依据。
免疫组化ABC法步骤
1、4%多聚甲醛常规灌注固定，取材并置20%蔗糖溶液（4℃）中过夜。蜡块制作。切片，贴片。0.01MKPBS清洗5min×3后；2、加入配好的0.3%的过氧化氢甲醇溶液（甲醇80ml+0.01MKPBS 100ml+30%过氧化氢）30min，以消除内源性过氧化物酶的影响，0.01MPBS清洗5mi
免疫组化SP法步骤
SP（streptavidin-perosidase）法，即链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法。按标记物质的种类，如荧光染料、放射性同位素、酶（主要有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶）、铁蛋白、胶体金等，可分为免疫荧光法、放射免疫法、酶标法和免疫金银法等。按染色步骤可分为直接法（又称一步法）和间接法（二
免疫组化SP法步骤
SP(streptavidin-perosidase)法,即链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法.按标记物质的种类，如荧光染料、放射性同位素、酶(主要有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶)、铁蛋白、胶体金等，可分为免疫荧光法、放射免疫法、酶标法和免疫金银法等。按染色步骤可分为直接法(又称一步法)和间接法(二
免疫组化镜检简介
在镜检前可以通过相关资料查询抗体的表达部位：细胞间质、细胞膜、细胞浆、核膜、细胞核以及在其中的多个部位表达（如：MPO抗体表达在细胞膜、细胞浆、核膜、细胞核上）和表达组织（如：VWF抗体在血管壁上表达，呈现环形）。 在显微镜下观察时，先在4倍镜下查找组织及其范围，然后查看整个组织确定阳性产物的
免疫组化操作规程
（一）、仪器设备 1）18cm不锈钢高压锅或电炉或医用微波炉； 2）水浴锅 （二）、试剂 1）PBS缓冲液（pH7.2～7.4）：NaCl 137mmol/L，KCl 2.7mmol/L，Na2HPO4 4.3mmol/L， KH2PO4 1.4mmol/L。
免疫组化的试剂准备
实验概要重要的是选择好一抗、二抗或者还有三抗，注意抗体的特异性、效价和交叉反应，最好用单抗。实验步骤其他常用试剂有：1、0.01M(pH7.4)的磷酸盐缓冲生理盐水（PBS），稀释抗体和洗片子用；2、清洁液、纯水，洗玻片用3、多聚赖氨酸处理载玻片，防止脱片4、固定液：4%多聚甲醛或冷丙酮等；5、15
免疫组化的操作步骤
一 免疫组化（SP法）操作步骤1． 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复，可在此步后进行2.缓冲液洗 3min/2 次。3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色，将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。4. 缓冲液洗 5min/2 次。5. 滴加
如何看懂免疫组化结果
看懂免疫组化结果方法如下：对照染色——定位——半定位——图像分析仪免疫组化，是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位、定性及定量的研究，称为免疫组织化学技术