做好色谱柱的日常维护工作,减少色谱柱故障几率!
每天用足够的时间来维护色谱柱,您将节省更多的时间用于处理色谱柱故障时间,同时您的色谱柱的寿命也会变得更长!色谱柱的使用寿命,除了与所分析的样品和流动相及使用频率有关外最主要的是根据柱效和柱压两个指标来衡量,如果一支色谱柱的柱效太低或柱压太高,通常被认为该色谱柱的使用寿命已经结束。因此,延长色谱柱使用寿命的关键是,消除引起效柱使用下降和柱压升高的因素。通过以下几点帮助您完成色谱柱的日常维护工作。 流动相得PH值 由于硅胶基质的填料中存在SI-C 和SI-O键,流动相超过其PH范围将会导致硅胶基质溶解和健合相碳键断裂,是柱效下降,寿命变短。由于流动相的PH控制不当而对色谱柱造成损害,通常很难是色谱柱恢复,因此必须认真对待,严格控制流动相的PH值。 去除样品和流动相中的固体颗粒 样品和流动相中含有的固体颗粒物质会堵塞色谱柱筛板,筛板被堵不仅会引起柱压上升,而且也会引起柱效下降......阅读全文
高效液相色谱流动相的注意事项
一、普通C8及C18反相色谱柱当色谱柱使用较长时间之后,就可能发生柱压升高、分离度不好、柱效降低、峰形不好等情况,这时就需要根据故障原因对色谱柱进行清堵与再生,以延长色谱柱的使用寿命。具体原因及处理方法如下:1)筛板堵塞与柱头塌陷主要现象有柱压严重升高或不稳定、色谱峰拖尾、色谱峰变宽、色谱峰分叉、秃
可以用DMSO做为液相流动相吗
可以,但是很多柱子不兼容的,会破坏固定相,需要先看说明书。
液相流动相未平衡好会怎么样
未平衡好有两种可能。一个是基线不稳。色谱峰是在基线的基础上进行积分,如果基线不稳,那么直接会影响到色谱峰的峰面积。含量计算是根据峰面积进行的计算。所以基线不稳,定量有可能不准。一个是出峰位置漂移。色谱柱虽然不长,但是其中的孔径很多,填料的粒径也很小。有可能没有完全被流动相填满。再加上流动相当中如果有
液相色谱流动相的优化组合方法
液相色谱应用广泛的是反相色谱,其流动相的优化组合直接关系到分离效果。八十年代二元流动相组成优化依赖于容量因子(k’)的对数值与极性溶剂的摩尔分数关系,根据两者线性关系,可以估算溶质的保留值。曾有人确定过14种二元溶剂系统的容量因子与流动相的关系。Scott,Snyder和Soczeuinski的色谱
流动相极性对液相色谱分离的影响
这个是根据药典上面的注释来的,具体影响只能说是,对填料的吸附能力有所控制,有很多样品在正向的时候分离效果好,有的则是相反的,这个是不一定的,具体的影响很小,只是针对于有没有利于分离的效果
液相色谱柱流动相的流速的选择
因柱效是柱中流动相线性流速的函数,使用不同的流速可得到不同的柱效。对于一根特定的色谱柱,要追求最佳柱效,最好使用最佳流速。对内径为4.6mm的色谱柱,流速一般选择1mL/min,对于内径为4.0mm柱,流速0.8mL/min为佳。当选用最佳流速时,分析时间可能延长。可采用改变流动相的洗涤强度的方
液相色谱流动相过滤的注意事项
用滤膜过滤时,特别要注意分清有机相(脂溶性)滤膜和水相(水溶性)滤膜。有机相滤膜一般用于过滤有机溶剂,过滤水溶液时流速低或滤不动。水相滤膜只能用于过滤水溶液,严禁用于有机溶剂,否则滤膜会被溶解!溶有滤膜的溶剂不得用于HPLC。注意:对于混合流动相,只要含有机相,有机相滤膜过滤。B. 如何使用溶剂过滤
高效液相色谱流动相ph有何影响
如果是中性物质,水相pH值的酸碱性对它没什么影响。不过酸性物质和碱性物质的影响就比较大。比如,碱性物质在pH值6.8的缓冲液里保留时间就会比较靠后,如果pH值变成4.5,那么保留时间肯定会前移。另外水相pH值对于峰型也会有影响。所以水相pH值通常是根据被测物质的PKa值来确定的。
液相流动相怎样将乙腈换成甲醇
直接将色谱纯乙腈脱气换上就行 甲醇和乙腈混溶 没关系的直接换过来就行了,冲柱子的时候多用几个梯度,延长一点冲住时间就好了可以直接接上柱子 用100%的乙腈冲一段时间后再慢慢变化到50%的乙腈
高效液相色谱流动相的性质要求
流动相的性质要求一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。
液相流动相怎样将乙腈换成甲醇
直接将色谱纯乙腈脱气换上就行 甲醇和乙腈混溶 没关系的直接换过来就行了,冲柱子的时候多用几个梯度,延长一点冲住时间就好了可以直接接上柱子 用100%的乙腈冲一段时间后再慢慢变化到50%的乙腈
反相液相色谱中流动相pH的确定
反相高效液相色谱缓冲体系PH的选定 反相高效液相色谱中缓冲体系PH值的选择在反相高效液相色谱分析中,选择正确的缓冲液PH值,对可离解的化合物分析的重现性十分重要,不恰当的PH值可能导致不对称峰,宽峰,分裂峰或肩峰,而尖锐的,对称的峰是定量分析中获得低的检测限以,两次分析之间较低的相对标准偏差(
关于流动相的使用须知介绍
1、在进行样品检测前,至少使用20倍柱体积流动相使色谱柱充分平衡。流动相一定要使用色谱级别的溶剂。如使用水相的缓冲液应当天配制以保持新鲜避免细菌产生。 2、流动相使用前需用微孔滤膜过滤,消除流动相中颗粒对色谱系统和色谱柱的损坏。缓冲液与其他流动相混合后应重新过滤避免溶解度变化造成产生新的沉淀。
流动相在线脱气机特点说明
流动相在线脱气机可以连续不断地从流动相中除去溶解的气体,消除流动相的不稳定因素和降低基线漂移及噪音,从而消除了对电化学、荧光和紫外检测氧的干扰。流动相在线脱气机有二路、三路和四路三种型号。 流动相在线脱气机采用Teflon AF脱气膜管,在保证同样脱气效果的基础上,脱气效率超过传统PTF
什么是流动相和固定相
固定相就是用来分离物质的,流动相就是载体,将物质带到固定相里并通过固定相的流体。拿液相来举例,如上图。流动相是配置出来的液体溶剂,泵是心脏,负责抽取流动相,推动系统的。然后流动相带着进样器注入的样品,流过色谱柱。所以说流动相是载体。色谱柱里的填料是固定相,就是固体的多孔颗粒。样品开始的时候是混合在一
流动相跑干了怎么办
首先要解决气泡问题。气泡最难排除是检测器里的气泡,还有柱子里也有气泡了。排除柱子里的气泡最把柱子立起来,从下向上冲洗,(也就是常说的反冲)排除检测器里的气泡麻烦,因为有时气泡在里面可能长时间冲洗也出不来的,这时你可以通过变换流动相和流速的办法,比如把柱拿掉,再用水相,水相和乙腈混合,或水与甲醇混合,
吸附层析流动相的相关介绍
在吸附色谱中,固定相是极性吸附剂,因此流动相多以非极性溶剂为主。可作为流动相的溶剂很多,这些溶剂大致可分为3类:一类是非极性的,如正己烷等烃类;一类是中等极性的,主要是卤代烷、酯类;一类是极性的,醇和乙腈;等等。水虽然是极性很强的溶剂,但水分子会永久地吸附在吸附剂的表面,导致活性降低而失去分离作
怎么区分固定相和流动相?
在色谱法中,静止不动的一相(固体或液体)称为固定相(stationary phase) ;运动的一相(一般是气体或液体)称为流动相(mobile phase)。
什么是流动相和固定相
固定相就是用来分离物质的,流动相就是载体,将物质带到固定相里并通过固定相的流体。拿液相来举例,如上图。流动相是配置出来的液体溶剂,泵是心脏,负责抽取流动相,推动系统的。然后流动相带着进样器注入的样品,流过色谱柱。所以说流动相是载体。色谱柱里的填料是固定相,就是固体的多孔颗粒。样品开始的时候是混合在一
流动相跑干了怎么办
首先要解决气泡问题。气泡最难排除是检测器里的气泡,还有柱子里也有气泡了。排除柱子里的气泡最把柱子立起来,从下向上冲洗,(也就是常说的反冲)排除检测器里的气泡麻烦,因为有时气泡在里面可能长时间冲洗也出不来的,这时你可以通过变换流动相和流速的办法,比如把柱拿掉,再用水相,水相和乙腈混合,或水与甲醇混合,
凝胶色谱仪流动相概述
凝胶色谱仪流动相的作用原则上不象在其它液相色谱仪中那样重要,这是由于它的分离并不依赖于样品组分与填料和流动相之间的相互作用,因此对于流动相的选择考虑较为简单,主要要求粘度低、沸点高、能溶解多种大分子样品和能润湿填料等。为了减小溶剂粘度(以降低柱压)和增加样品的溶解度,色谱柱温度通常高于室温。流动相必
流动相跑完了,怎么办
用纯甲醇冲,可以恢复的。把柱子拆了,用高流速冲,然后上柱子,用正常流速多冲会
手性分析之流动相方法优化
1、 流动相 手性分析很关键的一项是流动相的选择,手性分析一般都采用正相,使用zui多的流动相是正己烷、正庚烷、乙醇和异丙醇这四种,其中起洗脱作用的流动相是乙醇和异丙醇,正己烷和正庚烷用来调节流动相的洗脱强度。正己烷和正庚烷对于样品分离没有什么太大的影响,不会改变选择性和分离度,通常都可以混用,
流动相跑干了怎么办
首先要解决气泡问题。气泡最难排除是检测器里的气泡,还有柱子里也有气泡了。排除柱子里的气泡最把柱子立起来,从下向上冲洗,(也就是常说的反冲)排除检测器里的气泡麻烦,因为有时气泡在里面可能长时间冲洗也出不来的,这时你可以通过变换流动相和流速的办法,比如把柱拿掉,再用水相,水相和乙腈混合,或水与甲醇混合,
反向色谱流动相的pH值
在以反相液相分离极性和离子型化合物时常采用缓冲溶液作为流动相。缓冲溶液应具有足够高的离子强度,这样可以避免出现不对称峰和峰分裂。 缓冲液应具有以下特征: 1 在pH=2~8之间要有足够大的缓冲容量; 2与检测器匹配; 3可以与为了改善分离添加的有机溶剂混溶; 4 能
什么是流动相和固定相
固定相就是用来分离物质的,流动相就是载体,将物质带到固定相里并通过固定相的流体。拿液相来举例,如上图。流动相是配置出来的液体溶剂,泵是心脏,负责抽取流动相,推动系统的。然后流动相带着进样器注入的样品,流过色谱柱。所以说流动相是载体。色谱柱里的填料是固定相,就是固体的多孔颗粒。样品开始的时候是混合在一
HPLC色谱流动相的脱气方法
HPLC系统的管路流体如有气泡生成,会造成色谱图上出现尖锐的噪声峰有的甚至影响HPLC的灵敏度.如今在使用HPLC时为防止气泡生成,主要是对色谱流动相做脱气处理,其主要的方法如下:1.吹氦脱气法使用在液体中比空气溶解度低的氦气,在0.1Mpa压力下,以约60ml/min流速通入流动相10-15min
流动相跑干了怎么办
1.换上足量新的流动相或超纯水;2.拧开排气阀,开大流速进行排气,如果泵不能吸液,可以拧开出口单向阀的出口螺丝,直至有液体流出再拧紧(建议用注射器把溶剂过滤头到比例阀入口那段管路的气泡抽光,免得柱塞杆长时间干跑而损坏柱塞杆);3.把柱子换成双通,不接流通池,拧紧排气阀,开大流速把系统管路里的气泡冲走
手性分析之流动相方法优化
手性分析很关键的一项是流动相的选择,手性分析一般都采用正相,使用zui多的流动相是正己烷、正庚烷、乙醇和异丙醇这四种,其中起洗脱作用的流动相是乙醇和异丙醇,正己烷和正庚烷用来调节流动相的洗脱强度。正己烷和正庚烷对于样品分离没有什么太大的影响,不会改变选择性和分离度,通常都可以混用,不过正庚烷比正
什么是固定相和流动相?
在色谱法中,静止不动的一相(固体或液体)称为固定相(stationary phase) ;运动的一相(一般是气体或液体)称为流动相(mobile phase)。