液相色谱仪流动相(MOBLLEPHASE)的问题
甲醇和乙腈在高效液相色谱分析法中常常被用来配制流动相。高效液相色谱法中常用的试剂最好是高等级的专用试剂,如色谱纯试剂。在要求不太严格时,优级纯甚至分析纯的试剂也能用。高效液相色谱分析法中常用的是紫外检测器,因此,从降低基线噪音和提高分析灵敏度上来考虑,应该使用紫外吸收小且杂质含量少的色谱纯试剂。1、流动相的过滤。配制好的流动相在使用前一定要先用0.5um孔径的微孔滤膜来过滤。这是因为溶液中含有很多肉眼难以发现的微小颗粒,如果不把它们滤除掉,就会堵塞泵口、柱头上的过滤器,这样就堵塞了流动相的正常通道,使色谱柱的阻力增加,柱压升高,柱效下降。碰到这种情况时,要换用经过滤的流动相,并将堵塞的滤器拆下来浸泡在20%的硝酸水溶液中以超声波清洗机清洗20分钟,以除去滤片上的堵塞物。2、流动相的脱气。流动相在使用前必须脱气,以尽可能的除去溶解在流动相中的气体,否则,这些气体会使柱填料的性能降低,还能够对检测器的信号产生很大的干扰。脱气有多种方......阅读全文
高效液相色谱仪流动相储液瓶的冲洗介绍
首先要经常清洗流动相储液瓶,或者每做一批新样品更换一次流动相。一个脏的储液瓶将会污染注入的流动相。建议储液瓶中缓冲液使用时间不要超过一周,而有机溶剂使用时间不要超过一个月。也有人建议储液瓶中保持用溶剂充满,直到更换分析方法储液瓶需更换新溶剂(流动相组成发生变化)时,将旧溶剂倒掉更换新溶剂,这样胜
高效液相色谱仪的流动相选择时应注意什么
高效液相色谱仪的流动相选择时应注意:1、尽量使用高纯度试剂作流动相,防止微量杂质长期积累而损坏色谱柱和使检测器噪声增加。2、避免流动相与固定相发生作用而使柱效下降或损坏柱子,如使固定液溶解流失、酸性溶剂破坏氧化铝固定相等。3、样品在流动相中应有适宜的溶解度,防止产生沉淀沉积在柱中。4、流动相应满足检
流动相的特点和常见的流动相介绍
色谱过程中携带待测组分向前移动的物质称为流动相。与固定相处于平衡状态、带动样品向前移动的另一相。用作流动相的物质有:气体、液体、超临界流体等。常见的流动相主要有:乙腈-水溶液、乙腈-醋酸水溶液、甲醇-水溶液、乙腈-磷酸水溶液等。
高效液相色谱仪中把流动相跑光了怎么办
如果是通用品牌的液相,先把排液阀打开,然后大流速冲一下,将气泡排除。如果是岛津液相,先把流动相瓶放在高处,将出口单向阀拆开,然后让其自然势能流出溶液,最后再装上单向阀。
高效液相色谱仪中把流动相跑光了怎么办
如果是通用品牌的液相,先把排液阀打开,然后大流速冲一下,将气泡排除。如果是岛津液相,先把流动相瓶放在高处,将出口单向阀拆开,然后让其自然势能流出溶液,最后再装上单向阀。
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如果是通用品牌的液相,先把排液阀打开,然后大流速冲一下,将气泡排除。如果是岛津液相,先把流动相瓶放在高处,将出口单向阀拆开,然后让其自然势能流出溶液,最后再装上单向阀。
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如果是通用品牌的液相,先把排液阀打开,然后大流速冲一下,将气泡排除。如果是岛津液相,先把流动相瓶放在高处,将出口单向阀拆开,然后让其自然势能流出溶液,最后再装上单向阀。
高效液相色谱仪的优缺点及其对流动相的要求
高效液相色谱仪也叫高压液相色谱、高速液相色谱、高分离度液相色谱等,它是在经典液相色谱法的基础上,于60年代后期引入了气相色谱理论而迅速发展起来的。 高效液相色谱仪的优缺点: 优点:分离效率高,选择性好,检测灵敏度高,操作自动化,应用范围广; 与气相色谱法相比具有的优点:不受试样的挥发性和热稳定性限制
实验室高效液相色谱仪选择流动相的pH值
采用反相色谱法分离弱酸(3≤pKa≤7)或弱碱(7≤pKa≤8)样品时,通过调节流动相的pH值,以抑制样品组分的解离,增加组分在固定相上的保留,并改善峰形的技术称为反相离子抑制技术。对于弱酸,流动相的pH值越小,组分的k值越大,当pH值远远小于弱酸的pKa值时,弱酸主要以分子形式存在;对弱碱,情况相
高效液相色谱仪中把流动相跑光了怎么办
如果是通用品牌的液相,先把排液阀打开,然后大流速冲一下,将气泡排除。如果是岛津液相,先把流动相瓶放在高处,将出口单向阀拆开,然后让其自然势能流出溶液,最后再装上单向阀。
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如果是通用品牌的液相,先把排液阀打开,然后大流速冲一下,将气泡排除。如果是岛津液相,先把流动相瓶放在高处,将出口单向阀拆开,然后让其自然势能流出溶液,最后再装上单向阀。
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如果是通用品牌的液相,先把排液阀打开,然后大流速冲一下,将气泡排除。如果是岛津液相,先把流动相瓶放在高处,将出口单向阀拆开,然后让其自然势能流出溶液,最后再装上单向阀。
高效液相色谱仪中把流动相跑光了怎么办
没有问题的,别着急。现在压力上不去是因为有空气在泵头,泵体工作但无法泵液,不同品牌的液相操作不一样,不过所有品牌通用的一点是可以把排液阀打开,然后大流速冲一下,将气泡排除。如果是岛津液相,可以把流动相瓶放在高处,将出口单向阀拆开,然后让其自然势能流出溶液,再装上单向阀,一般就可以搞定了。
正确配置高效液相色谱仪流动相的四个要点
高效液相色谱仪的分离原理主要取决于流动相和固定相对样品的吸附和解吸,因此流动相的正确配置对实验数据和分离效果具有重要意义。一、流动相配置注意事项通常,溶剂按体积比(v/v)或重量比(w/w)混合。溶液的体积由于温度而变化,使得流动相按重量比混合,样品测量的重复性好,但操作复杂,通常在体积混合中。体积
液质流动相与液相流动相有什么不同
液质的流动相要求不能含有不挥发性的盐类,如果非要加入的话,质谱要及时清洗。使用液相是因为要进行物质的结构确证。
液相流动相如何脱气
流动相溶液往往因溶解有氧气或混入了空气影响液相色谱的操作性能,在泵中产生气泡使流速不稳,气泡大时会在泵头形成空穴。气泡进入检测器后会在色谱图上出现尖锐的噪音峰,降低响应甚至导致信号消失。流动相中的氧对光电检测器影响最大,使紫外检测器基线增高,低波长检测时信号被抵消。在荧光检测中,溶解氧还会使荧光淬灭
液相色谱流动相脱气
流动相的脱气HPLC所用流动相必须预先脱气,否则容易在系统内逸出气泡,影响泵的工作。气泡还会影响柱的分离效率,影响检测器的灵敏度、基线稳定性,甚至使无法检测。(噪声增大,基线不稳,突然跳动)。此外,溶解在流动相中的氧还可能与样品、流动相甚至固定相(如烷基胺)反应。溶解气体还会引起溶剂PH的变化,对分
液相流动相如何脱气
流动相溶液往往因溶解有氧气或混入了空气影响液相色谱的操作性能,在泵中产生气泡使流速不稳,气泡大时会在泵头形成空穴。气泡进入检测器后会在色谱图上出现尖锐的噪音峰,降低响应甚至导致信号消失。流动相中的氧对光电检测器影响最大,使紫外检测器基线增高,低波长检测时信号被抵消。在荧光检测中,溶解氧还会使荧光淬灭
液相流动相的使用
a、流动相对样品具有一定的溶解能力b、流动相具有一定惰性,与样品不产生化学反应(特殊情况除外)。c、流动相的黏度要尽量小d、流动相的物化性质要与使用的检测器相适应e、流动相沸点不要太低,否则容易产生气泡,导致实验无法进行。f、在流动相配制好后,一定要进行脱气。对于一根特定的色谱柱,要追求最佳柱效,最
液相色谱流动相小议
一、液相色谱流动相的性质要求一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。选好填料(固定相)后,强溶剂使溶质在填料表面的吸附减少,相应的容量因子k降低;而较弱的溶剂使溶质在填料表面吸附增加,相应的容量因子k升高。因此,k值是流动相组成的函数。塔板数N一般与流
液相流动相如何脱气
流动相溶液往往因溶解有氧气或混入了空气影响液相色谱的操作性能,在泵中产生气泡使流速不稳,气泡大时会在泵头形成空穴。气泡进入检测器后会在色谱图上出现尖锐的噪音峰,降低响应甚至导致信号消失。流动相中的氧对光电检测器影响最大,使紫外检测器基线增高,低波长检测时信号被抵消。在荧光检测中,溶解氧还会使荧光淬灭
流动相-固定相
流动相 ——色谱分离过程中携带组分向前移动的物质。固定相 ——色谱分离过程中不移动的具有吸附活性的固体或是涂渍在载体表面的液体。
流动相的概念
色谱过程中携带待测组分向前移动的物质称为流动相。与固定相处于平衡状态、带动样品向前移动的另一相。
怎样选择流动相
要根据样品的性质、PH值、样品的溶解度,由样品在有机溶剂中溶解度的大小,初步判断样品是非极性化合物还是极性化合物,进而推断用非极性溶剂戊烷、己烷、庚烷等,还是极性溶剂二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、甲醇、乙腈等来溶解样品,并通过实验判断.若样品溶于非极性溶剂,表明样品为非极性化合物,通常可以选吸附色谱法或
流动相的特点
液相色谱是样品组分在柱填料与流动相之间质量交换而达到分离的目的,因此要求流动相具备以下的特点:(1)流动相对样品具有一定的溶解能力,保证样品组分不会沉淀在柱中(或长时间保留在柱中)。(2)流动相与样品不产生化学反应(3)流动相的黏度要尽量小,以便得到好的分离效果;降低柱压降,延长泵的使用寿命(可运用
液相色谱仪流动相处理
液相色谱仪流动相的处理包括水的处理、溶剂的提纯、溶剂的过滤与脱气等。一、水的处理:水的等级分纯化水、蒸馏水和去离子水等。将一般的蒸馏水加入少许高锰酸钾,消耗水中的氧气,在PH=9~10的条件蒸馏,可用于梯度洗脱。二、溶剂的提纯:通常用蒸馏法可除去大部分有紫外吸收的杂质。三、溶剂的过滤与脱气:1、溶剂
高效液相色谱仪流动相选择应该遵循什么样的原则?
1.流动相的性质要求液相色谱理想的流动相溶剂应具有粘度低、与检测器相容性好、易于获得纯产品、毒性低等特点。选择流动相时应考虑以下方面:流速不会改变填料的任何性质 离子交换树脂的低交联度和排斥色谱填料有时会使有机相发生一定的膨胀或收缩,从而改变填料床的性能。 碱性流动相不能用于硅胶柱系统 酸性流
液相色谱仪分析开发中流动相调整的三个原则
液相色谱仪分析开发中流动相调整的三个原则是由强到弱、三倍规则和粗调转微调。一、由强到弱:一般先用90%的乙腈或甲醇-水或缓冲溶液进行试验,可很快得到分离结果,然后根据出峰情况调整有机溶剂(乙腈或甲醇)的比例。二、三倍规则:每减少10%的有机溶剂(乙腈或甲醇)的量,保留因子增加约3倍,此为三倍规则。