细胞提取物中β半乳糖苷酶的测定实验
本方案介绍报道分子载体(请见图 17-5) 转染哺乳动物细胞后,测定表达的β-半乳糖苷酶活性。本方法既简单快速,又可以用可见光分光光度计进行测定。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。实验材料转染了感兴趣 DNA 的哺乳动物培养细胞试剂、试剂盒大肠杆菌β-半乳糖苷酶Tris-Cl磷酸钠ONPGNa2CO3β-巯基乙醇MgCl2实验步骤材料缓冲液和溶液贮存液稀释到适当浓度。100XMgCl20.1mol/L MgCl24.5mo1/L β-巯基乙醇临用前,加入适量的 14.7mol/Lβ-巯基乙醇贮存液。Na2CO3(1mol/L)10.6 g 无水固体溶于 100 ml 水中。1xONPGONPG 溶于 0.1mol/L 磷酸钠(pH7.5) 中,浓度为 4 mg/ml。磷酸钠(0.1mol/L,pH7.5)混合 41 ml 0.2mol/L Na2HPO4•2H2O(Mt=......阅读全文
酮康唑乳膏的含量测定方法
含量测定照高效液相色谱法(通则0512)测定。溶剂甲醇-三氯甲烷(1:1)。供试品溶液取本品2.5g,精密称定,置烧杯中,加溶剂20ml,置80℃水浴中振摇使酮康唑溶解,用溶剂定量转移至50ml量瓶中,放冷,用溶剂稀释至刻度,摇匀,在冰浴中冷却1小时后立即滤过,取续滤液放置至室温。对照品溶液取酮康唑
酮康唑乳膏的含量测定方法
照高效液相色谱法(通则0512)测定。溶剂甲醇-三氯甲烷(1:1)。供试品溶液取本品2.5g,精密称定,置烧杯中,加溶剂20ml,置80℃水浴中振摇使酮康唑溶解,用溶剂定量转移至50ml量瓶中,放冷,用溶剂稀释至刻度,摇匀,在冰浴中冷却1小时后立即滤过,取续滤液放置至室温。对照品溶液取酮康唑对照品适
诺氟沙星乳膏的含量测定方法
含量测定照紫外可见分光光度法(通则0401)测定。供试品溶液取本品适量(约相当于诺氟沙星5mg),精密称定,置分液漏斗中,加三氯甲烷15ml,振摇后,用氯化钠饱和的0.1%氢氧化钠溶液25ml、20ml、20ml和10m分次提取,合并提取液,置100ml量瓶中,加0.1%氢氧化钠溶液稀释至刻度,摇匀
乳癖舒胶囊的含量测定
照高效液相色谱法(中国药典2000年版一部附录ⅥD)测定。 色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂:乙腈-水(12:88)为流动相:检测波长为230nm;理论板数按芍药苷峰计算应不低于3000。 对照品溶液的制备 精密称取芍药苷对照品适量,加稀乙醇制成每1ml含80μg的溶液,
乳和乳制品酸度的测定
1 范围本标准规定了乳粉、巴氏杀菌乳、灭菌乳、生乳、发酵乳、炼乳、奶油及干酪素酸度的测定方法。 本标准第一法适用于乳粉酸度的测定;第二法适用于巴氏杀菌乳、灭菌乳、生乳、发酵乳、炼乳、 奶油及干酪素酸度的测定。2 规范性引用文件本标准中引用的文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所
尿素乳膏的含量测定方法
照紫外-可见分光光度法(通则0401)测定。供试品溶液取本品适量,精密称定(约相当于尿素50mg),置50ml烧杯中,加乙醇20ml,置水浴中加热使尿素溶解,置冰浴中冷却30分钟,滤过,滤液置100ml量瓶中,用乙醇洗涤容器及滤器,洗液并入量瓶中,放至室温,用乙醇稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液对照
酮康唑乳膏的含量测定方法
照高效液相色谱法(通则0512)测定。溶剂甲醇-三氯甲烷(1:1)。供试品溶液取本品2.5g,精密称定,置烧杯中,加溶剂20ml,置80℃水浴中振摇使酮康唑溶解,用溶剂定量转移至50ml量瓶中,放冷,用溶剂稀释至刻度,摇匀,在冰浴中冷却1小时后立即滤过,取续滤液放置至室温。对照品溶液取酮康唑对照品适
乳果糖浓溶液的含量测定
照高效液相色谱法(通则0512)测定对照品溶液取乳果糖对照品约1g,精密称定,置25m量瓶中,加乙腈-水(1:1)溶液溶解并稀释至刻度,摇匀供试品溶液、系统适用性溶液、色谱条件与系统适用性要求见有关物质项下。测定法精密量取供试品溶液与对照品溶液,分别注人液相色谱仪,记录色谱图。按外标法以峰面积计算。
乳果糖口服溶液的含量测定
照高效液相色谱法(通则0512)测定供试品溶液见有关物质项下。对照品溶液、系统适用性溶液、色谱条件、系统适用性要求与测定法见乳果糖浓溶液含量测定项下。
细胞周期测定实验_细胞计数法
细胞周期测定可应用于:(1)作为生物相容性评价指标;(2)研究细胞凋亡;(3)作为选择细胞的依据。实验方法原理体外培养细胞 生长、分裂繁殖的能力,可用分裂指数来表示。它与生长曲线有一定的联系,如随着分裂指数的不断提高,细胞也就进入了指数生长期。 分裂指数指细胞 群体中分裂细胞 所占的百分比,它是测定
大鼠乳鼠成骨细胞培养实验_酶消化法
大鼠乳鼠成骨细胞培养培养用于:(1)获得大鼠乳鼠成骨细胞;(2)骨修复的细胞学机制研究。实验方法原理取材于出生2~3 d 小鼠颅骨,以含20%胎牛血清的DMEM培养液进行培养,采用胶原酶消化法分离成骨细胞,并进行细胞接种与传代。采用胶原酶消化法分离培养成骨细胞是一种可靠、简便、快速的细胞原代分离培养
氮测定法半微量法
蒸馏装置如图。图中A为1000ml圆底烧瓶,B为安全瓶,C为连有氮气球的蒸馏器,D为漏斗,E为直形冷凝管,F为100ml锥形瓶,G、H为橡皮管夹。连接蒸馏装置,A瓶中加水适量与甲基红指示液数滴,加稀硫酸使成酸性,加玻璃珠或沸石数粒,从D漏斗加水约50ml,关闭G夹,开放冷凝水,煮沸A瓶中的水,当蒸气
概述半不连续复制的相关实验
脉冲标记实验(pulse-labelingexperiment)。以E.coli为材料,在培养时,培养基中加入同位素[3H]标记的dTTP,经30秒后,DNA刚开始复制,分离DNA,然后在碱中沉淀,变性,让新合成的单链和模板链分开,再用CsCl密度梯度离心,以沉降的快慢来确定片段的大小,再检测放
植物细胞渗透势测定实验
实验概要本实验介绍了植物组织渗透势的测定原理及方法。实验原理植物细胞的渗透势取决于液泡的溶质浓度,因此又称溶质势。渗透势与植物水分代谢、生长及抗性等有密切关系。已知在干旱、盐渍等条件下,一些植物常在细胞内主动积累溶质,以降低其渗透势,增加吸水能力,而在一定程度上维持膨压,保障细胞的生长和气孔的开放,
细胞周期测定实验(一)
标签: 细胞周期 体外培养 周期测定细胞周期测定可以:(1)作为生物相容性评价指标;(2)用于研究细胞凋亡;(3)作为选择细胞的依据。实验方法细胞计数法BrdU渗入法流式细胞仪测定法实验方法原理流式细胞仪的工作原理是将待测细胞放入样品管中,在气体的压力下进入充满鞘液的流动室。在鞘液的约束下细胞排成单
细胞计数及活力测定实验
一、原理培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好,所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞计数相同。在细胞群体中总有一些因各种原因而死亡的细胞,总细胞中活细胞所占的百分比叫做细胞活力,由组织中分离细胞一般也要检查活力,以了解分离的过程对细胞是否有损伤作用
细胞计数及活力测定实验
台盼兰染色法 实验方法原理 培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好,所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞
细胞周期测定实验(二)
一、常见问题1. Q:要做胃粘膜组织的DNA含量及倍体检查,但取材后要等几个星期才会做流式细胞术检查,请问:胃组织要怎样保存好呢?用低温保存,还是用乙醇固定?或者固定后再低温下保存? A:我做过乳腺细胞的DNA含量测定,取得组织以后,先处理成单细胞悬液,然后再加70%冰乙醇固定,要保证冰乙醇的最终
红细胞比积测定实验
实验材料血液试剂、试剂盒肝素仪器、耗材毛细用管比容管注射器实验步骤一、实验试剂与材料。1、抗凝剂:肝素或双草酸盐抗凝剂.2、Wintobe(文氏)比容管,此管内径3mm长约10mm,刻度以1mm间隔并10cm可盛血约1ml.3、5ml注射器.4、毛细用管(其毛细管部只约12cm)口径不大于2mm。二
细胞计数及活力测定实验
台盼兰染色法 实验方法原理 培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好,所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞
哺乳动物细胞抽提物中荧光素酶的测定实验
实验材料 用感兴趣的 DNA 转染的哺乳动物培养细胞试剂、试剂盒 细胞裂解缓冲液荧光素酶测定缓冲液荧光素溶液不含钙盐和镁盐的磷酸盐缓冲液仪器、耗材 荧光光度计和光度计测置管橡胶棒实验步骤 材料缓冲液和溶液贮存液稀释到适当浓度。细胞裂解缓冲液25 mmol/L 双甘氨肽(pH7.8)15 mmol/L
罂粟果提取物粉的含量测定
照高效液相色谱法(通则0512)测定。固相萃取柱的前处理、系统适用性试验与要求见罂粟果提取物含量测定项下供试品溶液取本品约10g,研细(过五号筛),取约1g,精密称定,置200ml量瓶中,加5%醋酸溶液适量,超声30分钟使吗啡溶解,取出,放冷,用5%醋酸溶液稀释至刻度,摇匀,滤过,精密量取续滤液0.
罂粟果提取物粉的含量测定
照高效液相色谱法(通则0512)测定。固相萃取柱的前处理、系统适用性试验与要求见罂粟果提取物含量测定项下供试品溶液取本品约10g,研细(过五号筛),取约1g,精密称定,置200ml量瓶中,加5%醋酸溶液适量,超声30分钟使吗啡溶解,取出,放冷,用5%醋酸溶液稀释至刻度,摇匀,滤过,精密量取续滤液0.
罂粟果提取物的含量测定方法
含量测定照高效液相色谱法(通则0512)测定。固相萃取柱的前处理、系统适用性试验与要求取固相萃取柱1支(用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂),依次用甲醇水(3:1)15ml与水5ml冲洗,再用pH值约为9的氨水溶液(取水适量,滴加氨试液至pH值为9)冲洗至流出液pH值约为9,待用。精密量取每1ml中约含
罂粟果提取物的含量测定方法
照高效液相色谱法(通则0512)测定。固相萃取柱的前处理、系统适用性试验与要求取固相萃取柱1支(用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂),依次用甲醇水(3:1)15ml与水5ml冲洗,再用pH值约为9的氨水溶液(取水适量,滴加氨试液至pH值为9)冲洗至流出液pH值约为9,待用。精密量取每1ml中约含吗啡对照
小牛脾提取物溶液的含量测定
多肽 取药品适量,加水制成每1ml中约含0.15mg多肽的溶液,作为供试品溶液,精密量取1.0ml,照福林酚测定法(附)测定。核糖 参比溶液的制备 精密称取D-核糖参比试剂适量,用5%三氯醋酸溶液溶解并制成每1ml中含20μg的溶液,摇匀。供试品溶液的制备 取药品适量,用5%三氯醋酸制成每1ml
哺乳动物细胞中制备核和细胞质提取物—细胞质组分制备
实验材料细胞质提取物试剂、试剂盒10× 细胞质提取缓冲液仪器、耗材Beckman 50型固定角转子或相当的转子实验步骤1) 仔细测量细胞质提取物的体积(见基本方案步骤 7 中的上清)。加入 0.11 倍体积的10×细胞质提取缓冲液,充分混合。2)100 000 g 离心 1 h。3)将上清(± 10
熔点的测定实验中如何才能减小实验误差
样品用量不需要很多,极少极少就足够了,样品要足够的干燥,不能受潮,而且最好事先研磨均匀,最好是粉末状。用干净的毛细管装料,并且装料的时候要紧密堆积在低端,装样不能超过3mm,保持均匀,毛细管外表面干净,没有污渍。如果测的固体易生活,毛细管两端都要密封。熔点仪校正,清洁干净。开始测样品时候加热速度很关
精浆α葡糖苷酶测定测定方法与临床意义
1.测定方法及评价比色法可测定精浆中α-葡糖苷酶的活性。葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖的生成量,反映α-葡糖苷酶的活性。国内临床上较为常用。2.临床意义α-葡糖苷酶活性下降,见于阻塞性无精子症,具有肯定性诊断价值。
免疫学实验HCG半定量
HCG半定量介绍: HCG 红血球淀集抑制半定量试验(以下简称 HCG 半定量)灵敏度高,故对早孕、先兆流产、外孕能及早做出诊断,并能对滋养细胞疾病进行诊断,疗效判定及随访。本法较放免要求设备简单、迅速、经济,基层医院都可开展放免、酶标法虽较本法更灵敏,但对滋养细胞疾病的诊断尚无肯定的标准。HCG