核酶实验——锤头型核酶实验
核酶(ribozyme ) 是一类具有酶特性的 RNA 分子,通过催化靶位点 RNA 链中磷酸二酯键的断裂,特异性地剪切底物 RNA 分子,从而阻断基因的表达。核酶广泛存在于从低等到高等的多种生物中,参细胞内 RNA 及其前体的加工和成熟过程。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编:郑晓飞。实验方法原理锤头型核酶是最简单的一类核酶,而且其靶序列也比较简单。锤头型核酶发现于几种植物病毒的卫星 RNA、一种类病毒 RNA 和蝾螈核卫星 DNA 的转录产物中。它催化一些类病毒 RNA 和一些与类病毒 RNA 相似的只复制产物的不可逆自我剪切„实验材料ATPT4多核苷酸激酶RNasinDTT试剂、试剂盒CMCT缓冲液甲酰胺上样缓冲液终止缓冲液Tris-HCl仪器、耗材低温高速离心机聚丙烯酰胺电泳装置放射自显影用具水浴实验步骤一、材料与设备所有试剂及容器需绐去 RNase 处理。1. 主要设备:低温高速离心机、聚丙烯酰胺电泳装置、放射自显......阅读全文
脱氧核酶的分类介绍
根据催化功能的不同,可以将脱氧核酶分为5大类:切割RNA的脱氧核酶、切割DNA的脱氧核酶、具有激酶活力的脱氧核酶、具有连接酶功能的脱氧核酶、催化卟啉环金属螯合反应的脱氧核酶。其中以对RNA切割活性的脱氧核酶更引人注意,不仅能催化RNA特定部位的切割反应,而且能从mRNA水平对基因进行灭活,从而调
核酶的临床意义
①核酶的发现和研究使我们对RNA的生理功能有了进一步的认识,即它既是遗传信息的载体,又是生物催化剂,兼有DNA和蛋白质两类生物大分子的功能。 ②核酶的发现动摇了所有生物催化剂都是蛋白质的传统观念。 ③核酶的发现对于了解生命进化过程具有重要意义,RNA或许是最早出现的生物大分子。
核酶的发现与研究
核酶最早由Cech和 Altman(1989年诺贝尔化学奖获得者)发现。1967年,Woese、 Crick与 Orgel等基于RNA二级结构的复杂程度提出其可能有催化活性;1982年,Cech在研究四膜虫rRNA前体剪接时发现其内含子有自我剪接活性;1983年,Altman在研究细菌tRNA前体时
大核酶的基本信息
中文名称大核酶英文名称maxizyme定 义特指由小核酶聚合形成的一种人工二聚体核酶,可以形成同二聚体和异二聚体,使聚合物同时切割两个不同底物或同一底物的两个不同位点成为可能。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),酶(二级学科)
工程核酶的基本信息
中文名称工程核酶英文名称engineered ribozyme定 义利用生物化学和基因工程技术设计的核酶。以提高其在细胞内的活性及对底物的专一性。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),酶(二级学科)
分子遗传学词汇核酶
中文名称:核酶外文名称:ribozyme定义:核酶(ribozyme)指的是具有催化功能的小分子RNA,属于生物催化剂,可降解特异的mRNA序列。
核酶的生物学意义
凡是能水解核酸的酶都称为核酸酶。凡能从多核苷酸链的末端开始水解核酸的酶称为核酸外切酶,凡能从多核苷酸链中间开始水解核酸的酶称为核酸内切酶。能识别特定的核苷酸顺序,并从特定位点水解核酸的内切酶称为限制性核酸内切酶。
脱氧核酶的基本信息
脱氧核酶(deoxyribozyme)是利用体外分子进化技术合成的一种具有催化功能的单链DNA片段,具有高效的催化活性和结构识别能力。自 1994年首次发现脱氧核酶以来,迄今已发现了几十种脱氧核酶。根据其功能可分为7大类:具有RNA切割活性,具有DNA连接酶活性,具有卟啉金属化酶和过氧化酶活性,具有
分子遗传学词汇核酶
中文名称:核酶外文名称:ribozyme定 义:具有催化功能的小分子RNA,核酶(ribozyme)指的是具有催化功能的小分子RNA [1] ,属于生物催化剂,可降解特异的mRNA序列。类 型:生物催化剂
核酶和普通酶的区别
核酶本身是一段RNA,普通酶是Pr有些核酶可以催化自己发生反应,普通酶不行(这里"催化自己发生反应"的意思是自体催化:以自身RNA为底物,进行自我剪切和剪接,经典的例子有T4 phage的RNA前体)核酶主要是细胞内作用,普通酶可分泌到胞外在核酶中,催化大分子水解成小分子的酶叫剪切酶,而普通酶有这个
核糖核酸的种类核酶
科学家在研究RNA的转录后加工时发现某些RNA有催化活性,可以催化RNA的剪接,这些由活细胞合成、起催化作用的RNA称为核酶。许多核酶的底物也是RNA,甚至就是其自身,其催化反应也具有专一性。 已经阐明的天然核酶有锤头状核酶、发夹状核酶、I型内含子、Ⅱ型内含子、丁型肝炎病毒核酶、核糖核酸酶P、肽基转
核酶和普通酶的区别
核酶的化学本质是核糖核酸(RNA),而蛋白酶的化学本质是多肽(Polypeptide)。与一般的翻译RNA相比,核酶具有较稳定的空间结构,不易受到RNA酶的攻击。更重要的是,核酶在切断mRNA后,又可从杂交链上解脱下来,重新结合和切割其它的mRNA分子。核酶可通过催化靶位点RNA链中磷酸二酯键的断裂
核酶的具体作用有哪些?
1. 核苷酸转移作用。 2. 水解反应,即磷酸二酯酶作用。 3. 磷酸转移反应,类似磷酸转移酶作用。 4. 脱磷酸作用,即酸性磷酸酶作用。 5. RNA内切反应,即RNA限制性内切酶作用。核酸内切酶可以催化水解多核苷酸内部的磷酸二酯键。有些核酸内切酶仅水解5′磷酸二酯键,把磷酸基团留在3
核酶研究的意义和应用
①核酶的发现和研究使我们对RNA的生理功能有了进一步的认识,即它既是遗传信息的载体,又是生物催化剂,兼有DNA和蛋白质两类生物大分子的功能。 [2] ②核酶的发现动摇了所有生物催化剂都是蛋白质的传统观念。 ③核酶的发现对于了解生命进化过程具有重要意义,RNA或许是最早出现的生物大分子。 4.核酶应用
概述核酶的重要作用
随着对核酶的深入研究,已经认识到核酶在遗传病,肿瘤和病毒性疾病上的潜力。 比如,对于艾滋病毒HIV的转录信息来源于RNA而非DNA,核酶能够在特定位点切断RNA,使得它失去活性。如果一个能专一识别HIV的RNA的核酶存在于被病毒感染的细胞内,那么它就能建立抵抗入侵的第一防线。甚至,HIV确实进
核酶的生物学意义
具有自身催化作用的RNA称为核酶(ribozyme),核酶通常具有特殊的分子结构,如锤头结构。九、核酸的一般理化性质:核酸具有酸性;粘度大;能吸收紫外光,最大吸收峰为260nm。十、DNA的变性:在理化因素作用下,DNA双螺旋的两条互补链松散而分开成为单链,从而导致DNA的理化性质及生物学性质发生改
关于脱氧核酶的基本介绍
脱氧核酶(deoxyribozyme)是利用体外分子进化技术合成的一种具有催化功能的单链DNA片段,具有高效的催化活性和结构识别能力。自 1994年首次发现脱氧核酶以来,迄今已发现了几十种脱氧核酶。根据其功能可分为7大类:具有RNA切割活性,具有DNA连接酶活性,具有卟啉金属化酶和过氧化酶活性,
小核酶的基本信息
中文名称小核酶英文名称minizyme定 义特指1992年麦考尔(McCall)合成的一种人工核酶,即锤头状核酶的茎Ⅱ(stem-Ⅱ)被短核苷酸链替代后得到的。这一变短的核酶仍保持原有的切割活性,并可形成更具活性的二聚体结构。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),酶(二级学科)
核酶发现的意义及其应用
1、核酶发现的意义“RNA世界”假说支持“RNA世界”假说的证据RNA也可以充当遗传物质,很多病毒以RNA为遗传物质RNA可以充当酶,而且可以催化多种不同的反应现代的细胞里,有各种不同的RNA,它们具有多项不同的功能RNA也能参与转录校对细胞合成核苷酸是先合成RNA的组成单位核糖核苷酸,然后再合成D
天然核酶可分几大类?
天然核酶可分为四类:(1)异体催化剪切型,如RNaseP;(2)自体催化的剪切型,如植物类病毒、拟病毒和卫星RNA;(3)第一组内含子自我剪接型,如四膜虫大核26SrRNA;(4)第二组内含子自我剪接型。利用反义技术研制的药物称反义药物。反义药物作用于产生蛋白的基因,因此可广泛应用于多种疾病的治疗,
金属核酶的基本信息
中文名称金属核酶英文名称metalloribozyme定 义具有酶活性的核糖核酸,在催化过程中需要金属离子辅助的酶。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),酶(二级学科)
顺式作用核酶的基本信息
中文名称顺式作用核酶英文名称cis-acting ribozyme定 义催化RNA链自我剪接的核酶。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),酶(二级学科)
脱氧核酶的作用和主要类型
脱氧核酶(deoxyribozyme)是利用体外分子进化技术合成的一种具有催化功能的单链DNA片段,具有高效的催化活性和结构识别能力。自 1994年首次发现脱氧核酶以来,迄今已发现了几十种脱氧核酶。根据其功能可分为7大类:具有RNA切割活性,具有DNA连接酶活性,具有卟啉金属化酶和过氧化酶活性,具有
关于核糖体核酶的介绍
核糖体由大小两个亚基组成,其rRNA占到组分的50%,剩余的50%是一些小型蛋白。蛋白质的主要作用是维持rRNA的正确折叠,但值得注意的是,所有的催化作用都是rRNA介导的。 核糖体有两个通道:mRNA-tRNA通道(贯穿三个tRNA结合位点:A、P、E)和肽链出口通道。大部分新合成的肽链都是
斧头状核酶的基本信息
中文名称斧头状核酶英文名称axehead ribozyme定 义一类具有催化功能、结构类似斧头状的RNA分子的酶。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),酶(二级学科)
核酶在细胞中的分布情况
真核生物90%的RNA分布在细胞质中,少量存在于线粒体、叶绿体和核仁中。 原核生物的RNA分布在细胞质中。
反式作用核酶的基本信息
中文名称反式作用核酶英文名称trans-acting ribozyme定 义通过重组技术将人为设计的核酶的底物识别-结合序列与核酶的催化中心相连,从而改变核酶只作用于自身RNA链的特性,能作用于其他RNA链的核酶。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),酶(二级学科)
核酶和核酸酶的区别
核酶是有催化活性的RNA, 即化学本质是RNA,却具有酶的催化功能。核酶的功能很包括切割RNA、切割DNA,、连接RNA、磷酸酶活性等。与蛋白质酶相比,核酶的催化效率较低,是一种较为原始的催化酶。核酶可降解特异的mRNA序列。核酶又称核酸类酶、酶RNA、核酶类酶RNA。 它的发现打破了酶是蛋白质的传
反式作用核酶的基本信息
中文名称反式作用核酶英文名称trans-acting ribozyme定 义通过重组技术将人为设计的核酶的底物识别-结合序列与核酶的催化中心相连,从而改变核酶只作用于自身RNA链的特性,能作用于其他RNA链的核酶。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),酶(二级学科)
根据催化功能将脱氧核酶分类
根据催化功能的不同,可以将脱氧核酶分为5大类:切割RNA的脱氧核酶、切割DNA的脱氧核酶、具有激酶活力的脱氧核酶、具有连接酶功能的脱氧核酶、催化卟啉环金属螯合反应的脱氧核酶。其中以对RNA切割活性的脱氧核酶更引人注意,不仅能催化RNA特定部位的切割反应,而且能从mRNA水平对基因进行灭活,从而调控蛋