多肽的固相合成、切割及纯化_固相肽合成技术

实验材料huBPP试剂、试剂盒氩气二甲基甲酰胺(DMF)哌啶二异丙基乙胺甲醇TFA(三氟乙酸)茚三酮甘氨酸聚乙二醇乙腈仪器、耗材Pioneer肽合成仪树脂Waters 650半制备色谱仪色谱柱Beckman gold system试管固相肽合成技术是现代蛋白质化学的一项关键技术,也是对现代分子生物学和基因工程研究具有重大影响和重要意义的技术。它的基本过程为:1、偶联保护氨基,即将第一个保护氨基以共价键偶联外固相载体上(在合成过程中始终不能脱落)。2、脱保护,在侧键基团保持稳定条件下脱去氨基上的保护,暴露出自由氨基,例如脱去Fmoc。3、偶联,将下一个已活化的氨基酸与结合于固相的前一个氨基酸缩合形成肽键。4、肽键延长,反复进行脱保护与偶联两步使肽键延长到设计长度。5、切割,将合成的肽由固相载体上切割下来并脱去侧链保护。6、纯化,切割后的肽进行纯化、鉴定。5.合成从主菜单按Strt1、Strt2,开始合成,直到结束。 (五......阅读全文

错配固相化学切割法实验(一)

试剂、试剂盒 退火缓冲液B&W(结合洗脱)缓冲液dNTP溶液甲酰胺染液羟胺KMnO4 TEAC嘧啶Taq DNA聚合酶Taq DNA聚合酶缓冲液待测和对照基因组DNA仪器、耗材 磁力架微孔滴定板或微管振荡器链霉抗生物素蛋白包被的磁珠热循环仪实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂(1)退火缓冲液,

固相合成法制备抗原肽环肽

1.1  仪器与试剂多肽合成仪(CS536,美国CSBio公司),半制备型高效液相色谱仪(Waters Delta Prep4000,美国Waters公司),分析型高效液相色谱仪(Agilent 1100,美国Agilent公司),冷冻干燥机(Christ Alpha,德国Christ公司)

固相萃取反相固相萃取

反相固相萃取反相固相萃取所用的吸附剂和目标化合物通常是非极性的或极性较弱的,主要是靠非极性-非极性相互作用,是范德华力或色散力。

固相微萃取技术如何提取固相纳米颗粒

  顶空的意思就是顶部的空间,是指在热力学平衡的蒸汽相与被分析样同时存在于一个密闭系统中,取上部气体。固相微萃取(solid-phase microextraction,SPME)技术(是20世纪90年代兴起的一项新颖的样品前处理与富集技术,它最先由加拿大Waterloo大学的Pawliszyn教授

GLP1类多肽药物固相合成载体

摘要:海普提供的固相合成载体可用于多肽药物、核酸药物合成,拥有丰富产品品系,产品整体质量稳定,应用经验丰富。#GLP-1类多肽药物固相合成载体 胰高血糖素样肽(GLP-1)是人在进食过程中由肠黏膜内分泌细胞L细胞分泌的肠源性激素。GLP-1通过刺激胰岛素的合成(胰岛β细胞)和抑制胰高血糖素的分泌(胰

微循环固相微萃取技术检测甲基苯丙胺合成过程特征物质

微循环固相微萃取技术检测甲基苯丙胺合成过程中的特征物质云南毗邻世界毒源地 “ 金三角” , 边境线长达4060公里, 特殊的地理位置使其成为境外毒品流入中国的重要通道。随着全球毒品问题的持续泛滥, 新型合成毒品缴获量已远远超过海洛因等传统毒品。由于我国是化工原料生产大国, 云南又成为合成毒品原料非法

固相萃取与固相微萃取的原理及操作

固相萃取与固相微萃取的原理及操作  固相萃取(SolidPhaseExtractionSPE)就是利用固体吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附,与样品的基体和干扰化合物分离,然后再用洗脱液洗脱或加热解吸附,达到分离和富集目标化合物的目的。  与液-液萃取相比固相萃取有很多优点:固相萃取不需要大量互不相

固相萃取固相萃取柱

固相萃取柱(英文, 简称SPE column,或Solid Phase extraction Cartridges,简称SPE cartridges)是从层析柱发展而来的一种用于萃取、分离、浓缩的样品前处理装置。主要应用于各种食品、农畜产品、环境样品以及生物样品中目标化合物的样品前处理。固相萃取技术

固相萃取与固相微萃取

固相萃取(Solid Phase Extraction  SPE)就是利用固体吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附,与样品的基体和干扰化合物分离,然后再用洗脱液洗脱或加热解吸附,达到分离和富集目标化合物的目的。  与液-液萃取相比固相萃取有很多优点:固相萃取不需要大量互不相溶的溶剂,处理过程中不会产生

一种新型固相萃取技术——固相微萃取

摘  要  固相微萃取技术是90年代初新发展起来的集采样、萃取、浓集、进样于一体的分析技术,具有操作简单易行,不必使用大量有机溶剂,且易实现自动化等优点。本文对该技术的实验方法、原理及其在药物分析、环境保护等领城中的应用进行了综述。关键词  固相微萃取  无溶剂萃取  样品前处理固相

固相微萃取技术

固相微萃取(Solid Phase Microextraction, SPME)是九十年代兴起并迅速发展的新型的、环境友好的样品前处理技术,无需有机溶剂,操作也很简便。该技术使用的是一支携带方便的萃取器,适于室内使用和野外的现场取样分析,也易于进行自动操作。这对样品数量多、操作周期短的常规分析极为重

固相萃取技术概述

它利用分析物在不同介质中被吸附的能力差将标的物提纯,有效的将标的物于干扰组分分离,大大增强对分析物特别是痕量分析物的检出能力,提高了被测样品的回收率。SPE技术自上世纪70年代后期问世以来,发展迅速,广泛应用于环境、制药、临床医学、食品等领域。

固相萃取技术——概述

  所谓萃取法,就是从样品中提取组分,传统的方法是液-液萃取法 ( LLE),即用液体作为提取剂。固相萃取(Solid Phase Extraction, SPE) 是19世纪70年代后期发展起来的样品前处理技术。它发展迅速,广泛应用于环境、制药、临床医学、食品等领域 。  固相萃取(SPE)是利用

固相萃取固相萃取活化的目的

活化的目的是创造一个与样品溶剂相容的环境并去除柱内所有杂质。通常需要两种溶剂来完成上述任务,个溶剂(初溶剂)用于净化固定相,另一个溶剂(终溶剂)用于建立一个合适的固定相环境使样品分析物得到适当的保留。每一活化溶剂用量约为1-2ml/100mg固定相。终溶剂不应强于样品溶剂,若使用太强的溶剂,将降低回

固相萃取固相萃取仪的分类

固相萃取装置的分类1.正相固相萃取正相固相萃取所用的吸附剂都是极性的.取决于目标化合物的极性官能团与吸附剂表面的极性官能团之间相互作用,其中包括了氢键,π—π键相互作用,偶极-偶极相互作用和偶极-诱导偶极相互作用以及其他的极性-极性作用。2.反相固相萃取反相固相萃取所用的吸附剂和目标化合物通常是非极

固相萃取仪全自动固相萃取仪的技术特点

全自动固相萃取仪的技术特点1、全自动操作模式自动完成固相萃取全过程:柱活化-上样-柱淋洗-柱干燥-柱洗脱,自动完成柱切换等功能,实现批量样品的处理。2、双通道萃取双样品位上样,实现双通道的同时活化、同时上样、同时洗脱、同时干燥;根据样品数量可以升级为四通道、六通道和八通道。3、连续处理样品能力单机可

固相膜的技术要求

1.孔径:用于穿流法的膜一般选择0.4μm左右,用于横流法的膜可选择5~10μm。2.流速:孔径大,流速快。3.蛋白质结合力:吸附力很强,以μg/cm2表示。4.均一性:优质的膜应具有良好的均一性,这样才能保证试剂批内的均一性。

固相膜的技术要求

  1.孔径:用于穿流法的膜一般选择0.4μm左右,用于横流法的膜可选择5~10μm。  2.流速:孔径大,流速快。  3.蛋白质结合力:吸附力很强,以μg/cm2表示。  4.均一性:优质的膜应具有良好的均一性,这样才能保证试剂批内的均一性。

固相萃取技术的分类

1.正相固相萃取所用的吸附剂都是极性的.取决于目标化合物的极性官能团与吸附剂表面的极性官能团之间相互作用,其中包括了氢键,π—π键相互作用,偶极-偶极相互作用和偶极-诱导偶极相互作用以及其他的极性-极性作用。2.反相固相萃取所用的吸附剂和目标化合物通常是非极性的或极性较弱的,主要是靠非极性-非极性相

固相萃取技术的方法

固相萃取技术的方法1.选择SPE 小柱或滤膜 首先应根据待测物的理化性质和样品基质, 选择对待测物有较强保留能力的固定相。若待测物带负电荷, 可用阴离子交换填料, 反之则用阳离子交换填料。若为中性待测物, 可用反相填料萃取。SPE 小柱或滤膜的大小与规格应视样品中待测物的浓度大小而定。对于浓度较低的

固相萃取技术的原理

固相萃取是一个包括液相和固相的物理萃取过程。在固相萃取中,固相对分离物的吸附力比溶解分离物的溶剂更大。当样品溶液通过吸附剂床时,分离物浓缩在其表面,其他样品成分通过吸附剂床;通过只吸附分离物而不吸附其他样品成分的吸附剂,可以得到高纯度和浓缩的分离物。

固相萃取技术的原理

固相萃取装置在过去的二十多年中,固相萃取作为化学分离和纯化的一个强有力工具出现了。从痕量样品的前处理到工业规模的化学分离,吸附剂萃取在制药、精细化工、生物医学、食品分析、有机合成、环境和其他领域起着越来越重要的作用。固相萃取是一个包括液相和固相的物理萃取过程。在固相萃取中,固相对分离物的吸附力比溶解

固相萃取仪的技术

  在固相萃取中最通常的方法是将固体吸附剂装在一个针筒状柱子里,使样品溶液通过吸附剂床,样品中的化合物或通过吸附剂或保留在吸附剂上(依靠吸附剂对溶剂的相对吸附)。“保留”是一种存在于吸附剂和分离物分子间吸引的现象,造成当样品溶液通过吸附剂床时,分离物在吸附剂上不移动。保留是三个因素的作用:分离物、溶

固相萃取技术的原理

固相萃取装置在过去的二十多年中,固相萃取作为化学分离和纯化的一个强有力工具出现了。从痕量样品的前处理到工业规模的化学分离,吸附剂萃取在制药、精细化工、生物医学、食品分析、有机合成、环境和其他领域起着越来越重要的作用。固相萃取是一个包括液相和固相的物理萃取过程。在固相萃取中,固相对分离物的吸附力比溶解

固相萃取技术的原理

固相萃取装置在过去的二十多年中,固相萃取作为化学分离和纯化的一个强有力工具出现了。从痕量样品的前处理到工业规模的化学分离,吸附剂萃取在制药、精细化工、生物医学、食品分析、有机合成、环境和其他领域起着越来越重要的作用。固相萃取是一个包括液相和固相的物理萃取过程。在固相萃取中,固相对分离物的吸附力比溶解

多肽合成技术中的片段合成法运用之利拉鲁肽的合成

利拉鲁肽的结构如图 1 所示(赖氨酸 (Lys )侧链亲脂性基团(N-棕榈酰-γ-谷氨酸)的存在可以延长药物的半衰期)。在利拉鲁肽固相全合成的实际操作中发现,N 端的第4个或者是第5个氨基酸常存在偶联不完全的情况。需过量投料,其效率不高,不利于纯化。全保护片段缩合策略是对固相合成的一种补充,但对于片

固相萃取与固相微萃取比较

一 固相萃取固相萃取 (Solid Phase Extraction,SPE)是一种基于液-固分离萃取的试样预处理技术,由柱液相色谱技术发展而来。SPE技术自70年代后期问世以来,由于其高效、可靠及耗用溶剂量少等优点,在环境等许多领域得到了快速发展。在国外已逐渐取代传统的液-液萃取而成为样品预处理的

固相萃取离子交换固相萃取

离子交换固相萃取离子交换固相萃取是靠目标化合物与吸附剂之间的相互作用是静电吸引力。

固相萃取与固相微萃取比较

  固相萃取  (Solid Phase Extraction,SPE)是一种基于液-固分离萃取的试样预处理技术,由柱液相  固相萃取  (Solid Phase Extraction,SPE)是一种基于液-固分离萃取的试样预处理技术,由柱液相色谱技术发展而来。SPE技术自70年代后期问世以来,由于

固相萃取正压固相萃取装置介绍

常见的固相萃取设备可分为自动固相萃取仪和手动固相萃取装置。手动固相萃取装置又可分为负压型和正压型两大类。传统的固相萃取装置是以真空负压为动力源使载入固相萃取柱的液体通过固相萃取柱。负压型固相萃取装置简单,但由于这种装置难以控制液体通过固相萃取柱的流速,而且平行操作时柱与柱之间的流速差异较大。与之相反