脱落细胞单细胞悬液的制备——食管拉网细胞
实验方法原理在临床工作中,可以收集到大量自然脱落细胞,这些细胞标本经过简单处理,便可成为较好的单细胞悬液供流式细胞术分析。主要包括脱落细胞、胸腹水细胞、尿液、内镜刷检细胞等。实验材料细胞试剂、试剂盒PBS仪器、耗材尼龙滤网实验步骤1. 将食管拉网器上的细胞洗脱到 20 ml PBS 液中,以 1500 r/min 离心后,再用 PBS 液洗 2 次,离心 500~800 r/min,1~2 min,弃上清。2. 再加入 PBS 液 5 ml,以 300 目尼龙滤网过滤,离心沉淀去上清。3. 加少许 PBS 液混匀沉淀细胞,加固定液或低温保存,备用。展开......阅读全文
食管拉网检查的临床意义
这是食管癌高发区进行普查的主要手段,对有咽下困难的病人应列为常规检查,用以确定诊断,据统计阳性率可达90%以上。
盐水配血法—红细胞悬液和血清的制备方法
盐水配血法—红细胞悬液和血清的制备方法:静脉采血3ml,取下针头,将其中的0.4ml注入已加入106mmol/L枸橼酸钠抗凝剂0.1ml的试管中(血液与抗凝剂的比例为4:1),混匀,待用。剩余血液加入另一支试管中,使其自然凝固。分离血清备用。洗涤红细胞:取抗凝血一份,加8-10倍量的生理盐水,颠
痰液脱落细胞检查的细胞学检查方法
(1)痰液细胞学检查:方法简便易行,患者无痛苦,适用于肺癌高危人群的普查。(2)支气管液细胞学检查:为在纤维支气管镜下直接吸取支气管液作涂片;或对可疑部位刷取、冲洗及细针吸取标本。(3)经皮肺部细针吸取检查:为在X线或CT引导下作穿刺获得标本。主要应用于经痰液、支气管液细胞学检查仍为阴性的患者、无痰
关于痰液脱落细胞检查的简介
痰液脱落细胞检查是肺癌早期诊断的重要方法之一。方法简便易行,患者无痛苦,适用于肺癌高危人群的普查。 肺癌发病率及死亡率在世界各国均大幅度增长,是恶性肿瘤的第2、3位。肺癌发病隐匿,早期常无临床症状,易被忽略。大多数病例确诊时已是晚期,故其治疗效果一直不满意。5年生存率为10%左右。但早期肺癌患
痰液脱落细胞检查的标本采集
1.采集痰液的基本要求采集痰液的质量和方法直接影响痰检查阳性率。采集痰液的基本要求是:①痰液必须新鲜;②痰液必须是肺部咳出。2.细胞学检查方法(1)痰液细胞学检查:方法简便易行,患者无痛苦,适用于肺癌高危人群的普查。(2)支气管液细胞学检查:为在纤维支气管镜下直接吸取支气管液作涂片;或对可疑部位刷取
单细胞转录组制备仪的功能
fluidigm C1 单细胞自动制备仪用于 mRNA 测序 更完整的流程 -首尾相连的流程对单细胞进行全转录组分析 最高的通量 -每次运行可前所未有的平行处理 96 个单细胞 更容易的操作 -直接从单细胞开始,简化的样本制备,只需 3 小时手工操作时间,没有 片段化和纯化步骤 更节省的成
制备细胞裂解液
实验流程:1. 收集胰蛋白酶消化的细胞并离心,用PBS清洗。2. 用100μl 裂解缓冲液冰浴溶解沉淀10min(每500000个细胞20μl裂解缓冲液)。3. 10000rpm,4°C离心10min,取上清转移至新管。4. 用考马斯亮蓝法检测蛋白质浓度。5. 用裂解缓冲液将溶液浓度调到5mg/ml
细胞裂解液的制备
一、试剂准备1、新鲜配制冷的 RIPA 裂解缓冲液: 150 mM NaCL 1% NP-40 (去垢剂) 0.1% SDS (去垢剂) 2ug/ml Aprotinin (蛋白酶抑制剂) (使用前加入) 2ug/ml Leupeptin (
红细胞悬液的常用浓度配制
压积红细胞1滴加8滴生理盐水所配成的悬液约为10%,按此比例配制其他所需浓度的红细胞悬液。2%的红细胞悬液一般用于滴定抗体效价。5%的红细胞悬液一般用于血型鉴定、配血试验、及抗球蛋白试验等大多数血型血清学试验。10%的红细胞悬液一般用于测定抗体的亲和力试验。
红细胞悬液的常用浓度配制
压积红细胞1滴加8滴生理盐水所配成的悬液约为10%,按此比例配制其他所需浓度的红细胞悬液。2%的红细胞悬液一般用于滴定抗体效价。5%的红细胞悬液一般用于血型鉴定、配血试验、及抗球蛋白试验等大多数血型血清学试验。10%的红细胞悬液一般用于测定抗体的亲和力试验。
脱落细胞检查
脱落细胞学检查的优点和不足 1.优点 脱落细胞学检查的优点有:简单易行,诊断迅速,癌细胞检出率较高,特别适用于大规模防癌普查和高危人群的随访观察。 2.不足 有一定的误诊率,这是由于细胞病理学检查的局限性,只能看到少数细胞,不能全面观察病变组织结构;具体部位难确定;不易对癌细胞作出明确的分型
痰液脱落细胞检查的标本采集有什么?
1. 采集痰液的基本要求 采集痰液的质量和方法直接影响痰检查阳性率。采集痰液的基本要求是:①痰液必须新鲜;②痰液必须是肺部咳出。 2. 细胞学检查方法 (1)痰液细胞学检查:方法简便易行,患者无痛苦,适用于肺癌高危人群的普查。 (2)支气管液细胞学检查:为在纤维支气管镜下直接吸取支气管液
简述痰液脱落细胞检查的标本采集方法
1、痰液脱落细胞检查的标本采集方法— 采集痰液的基本要求:采集痰液的质量和方法直接影响痰检查阳性率。 采集痰液的基本要求是:①痰液必须新鲜。②痰液必须是肺部咳出。 2、痰液脱落细胞检查的标本采集方法— 细胞学检查方法 (1)支气管液细胞学检查:为在纤维支气管镜下直接吸取支气管液作涂片;或对
细胞/组织裂解液的制备
溶液准备 2×样品缓冲液:130mM Tris-HCl ( pH8.0 ) , 20% ( v/v ) 甘油 , 4.6% ( w/v ) SDS , 0.02% 溴酚蓝 , 2%DTT PBS ( pH7.4 ) :10mM Na2HPO4,1.8mM KH2PO4 ,50
研究提出植物单细胞制备新方法
高通量单细胞转录组测序技术(scRNA-seq)用于植物与农学研究时,单细胞制备存在技术挑战。近日,中国科学院分子植物科学卓越创新中心等通过底层技术创新,开发了新的植物单细胞制备方法FX-Cell。该方法提升了单细胞制备效率,实现了难以酶解植物组织、农田及冻存样品的scRNA-seq,为加速植物细胞
单细胞转录组制备仪的技术指标
将 C1 应用于单细胞 mRNA 测序,可以从多个细胞个 体平行处理多达 96 个 cDNA 文库,在任何 Illumina 测序仪上对 mRNA表达进行相对定量。此系统的主要特征包括: 高通量 -可对 96 个单细胞进行大规模平行、连贯的制备, 引入条形码序列标记(Barcode),可将测序
脱落细胞检查技术
脱落细胞检验医生除要熟练掌握细胞形态学特点外,还必须掌握各项操作和染色技术及观察方法,所以脱落细胞学检查技术是重要的学习内容之一。它包括标本采集、制片、固定和染色、镜下观察方法及诊断要领等。第一节 标本采集和涂片制作方法 一、标本采集 正确地采集标本是细胞学诊断的基础和关键之一,故要准确地选择部
脱落细胞检验取材
1.自然管腔器官内表面粘膜:正常情况下,人体器官粘膜上皮细胞经常有脱落更新,有病变的粘膜上皮细胞更易脱落,如阴道上皮,支气管粘膜上皮、肾盂膀胱移行上皮、和乳腺导管上皮等都是自然脱落的上皮细胞。鼻咽部、口腔、食管和胃粘膜的标本除自然脱落细胞外,医学教|育网搜集整理部分是人工乔取或刷洗所得。 2.
脱落细胞检查技术
一、标本采集 正确地采集标本是细胞学诊断的基础和关键之一,故要准确地选择部位,尽可能在病变区直接采集细胞。采集的标本必须保持新鲜,尽快制得,以免细胞自溶或腐败。尽可能避免血液、粘液等混入标本内,采集方法应简便,操作轻柔,避免病人痛苦和引起严重并发症及促进肿瘤扩散,下面介绐几种常用的标本采集方法
脱落细胞检查(一)
脱落细胞学检查的优点和不足 1.优点 脱落细胞学检查的优点有:简单易行,诊断迅速,癌细胞检出率较高,特别适用于大规模防癌普查和高危人群的随访观察。 2.不足 有一定的误诊率,这是由于细胞病理学检查的局限性,只能看到少数细胞,不能全面观察病变组织结构;具体部位难确定;不易对癌细胞作出明确的分型
脱落细胞检查(二)
(四)常见癌细胞类型形态特征 1.鳞癌 鳞状上皮细胞癌变称为鳞状上皮细胞癌简称鳞癌。根据细胞分化程度,可分为高分化鳞癌和低分化鳞癌。 (1)高分化鳞癌:癌细胞分化程度较高,以表层细胞为主。癌细胞的多形性和癌珠是高分化鳞癌的标志。 (2)低分化鳞癌:癌细胞分化程度较低,以中、底层细胞为主。
脱落细胞标本采集
正确地采集标本是细胞学诊断的基础和关键之一,故要准确地选择部位,尽可能在病变区直接采集细胞。采集的标本必须保持新鲜,尽快制得,以免细胞自溶或腐败。尽可能避免血液、粘液等混入标本内,采集方法应简便,操作轻柔,避免病人痛苦和引起严重并发症及促进肿瘤扩散,下面介绐几种常用的标本采集方法。 (一)直视采集
脱落细胞分级标准
尿脱落细胞学分级标准(巴氏分级国际标准) Ⅰ级:未发现异型细胞。 Ⅱ级:细胞有异型性,但无恶性证据。 Ⅲ级:具有可疑的恶性细胞,但不能确定。 Ⅳ级:具有较明显的恶性细胞。 Ⅴ级:具有肯定的恶性细胞。注:在实际应用中为了减少疏漏,在Ⅱ级与Ⅲ级间增加一档Ⅱ~Ⅲ级,标准是涂片内有非典型细胞或异常
脱落细胞的分级标准
尿脱落细胞学分级标准(巴氏分级国际标准) Ⅰ级:未发现异型细胞。 Ⅱ级:细胞有异型性,但无恶性证据。 Ⅲ级:具有可疑的恶性细胞,但不能确定。 Ⅳ级:具有较明显的恶性细胞。 Ⅴ级:具有肯定的恶性细胞。 注:在实际应用中为了减少疏漏,在Ⅱ级与Ⅲ级间增加一档Ⅱ~Ⅲ级,标准是涂片内有非典
脱落细胞的分级标准
脱落细胞学分级标准(巴氏分级国际标准) Ⅰ级:未发现异型细胞。 Ⅱ级:细胞有异型性,但无恶性证据。 Ⅲ级:具有可疑的恶性细胞,但不能确定。 Ⅳ级:具有较明显的恶性细胞。 Ⅴ级:具有肯定的恶性细胞。 注:在实际应用中为了减少疏漏,在Ⅱ级与Ⅲ级间增加一档Ⅱ~Ⅲ级,标准是涂片内有非典型细
脱落细胞的分级标准
尿脱落细胞学分级标准(巴氏分级国际标准) Ⅰ级:未发现异型细胞。 Ⅱ级:细胞有异型性,但无恶性证据。 Ⅲ级:具有可疑的恶性细胞,但不能确定。 Ⅳ级:具有较明显的恶性细胞。 Ⅴ级:具有肯定的恶性细胞。注:在实际应用中为了减少疏漏,在Ⅱ级与Ⅲ级间增加一档Ⅱ~Ⅲ级,标准是涂片内有非典型细胞或异常
单细胞分离用于单细胞基因扩增
单细胞分离连接不同管径大小的毛细玻璃针,可分离捕获各种非贴壁状态的单细胞和微粒等,如细菌、酵母、藻类细胞、植物花粉、原生动物单细胞、悬浮细胞、血液细胞、免疫细胞、卵细胞、各种悬液中单细胞及特殊标记的单细胞等。 单细胞分离用于各种类型的细胞分离培养、纯化、检测;获得单克隆细胞;用于单细胞基因扩增,
单细胞分离对单细胞测序领域的作用
单细胞分离可以采用特制的毛细管在载玻片的琼脂涂层上选取单孢子并切割下来,然后移到合适的培养基进行培养,分离法对操作技术有比较高的要求,多限于高度专业化的科学研究中采用。 它不仅仅可以用于分离单细胞,还可以用于nl级别试剂的分配和磁珠的分选,对于单细胞测序领域有着很大的帮助。快速高效接种单个活细胞至
血细胞悬液密度与融合率的关系
密度不能过高,否则细胞聚集,融合率受影响;密度也不能过低,否则细胞之间不易接触,融合率低;密度适中正好,才可以正确地计算出融合率。
痰液脱落细胞检查的肺部良性病变
1.炎症病变的脱落上皮细胞 (1)假复层纤毛柱状上皮细胞:包括:固缩退变、多核纤毛柱状细胞、核增大的柱状上皮细胞、纤毛柱状上皮细胞增生、储备细胞增生、鳞状化生细胞、纤毛柱状上皮细胞衰变。 (2)鳞状上皮细胞:退化变性、巴氏细胞。 2.炎症细胞成分 (1)肺泡吞噬细胞:来自血中单核细胞,细