北大邓宏魁发现功能成熟细胞在体外长期维持的新方法

2019年4月26日,北京大学邓宏魁研究组、解放军总医院卢实春研究组以及复旦大学袁正宏研究组合作在《科学》(Science)杂志发表了题为《原代人肝脏细胞在体外的长期功能性维持》(Long-term functional maintenance of primary human hepatocytes in vitro)的研究论文,首次证明利用化学小分子调控细胞信号通路,实现了功能细胞在体外的长期维持,这为大量制备功能成熟细胞及其应用提供了可能。 如何诱导获得功能成熟的细胞并在体外保持其功能性是再生医学的关键瓶颈。邓宏魁研究组与卢实春研究组长期合作,致力于在体外获得大量的功能性细胞。在个体发育过程中,多种发育信号的精确调控,分化产生功能各异的细胞并长期稳定地维持其生理功能。然而,这些功能细胞一旦离开体内微环境便会迅速去分化并失去功能。此外, 由于缺乏适当的培养条件与微环境,体外源于干细胞诱导分化所获得的功能细胞,很难真正成......阅读全文

慢病毒用于体外(in-vitro)-感染培养原代细胞和建系细胞

  1. 慢病毒对各种细胞和组织的亲嗜性不同,用户使用Invabio提供的慢病毒之前可以通过查阅相关文献,了解慢病毒对您的目的细胞的亲嗜性,感染复数(MOI 值)以及在体内(in vivo)注射所需要的病毒量。如果没有相关文献支持,可以通过感染预实验得到合适的感染复数(MOI 值)(使用24孔板检测

Nature:科学家首次纯体外培养,干细胞“变”卵细胞

在体外,从胚胎干细胞分化而成的成熟卵细胞(图片来源:Hayashi实验室)  10月17日,《Nature》期刊在线发表一篇重磅文章,揭示日本科学家成功在实验室利用小鼠胚胎干细胞(ESCs)和诱导性多能干细胞(iPSCs)培育出成熟且具有生育能力的卵细胞。  这一研究为卵细胞发育研究提供了范本,且有

哺乳动物细胞体外剪接分析实验

剪接反应的典型做法是使用核提取物,即 S100 提取物补充 SR 蛋白或粗提取物的部分纯化组分,最常使用的是 HeLa 细胞的提取物。前体 mRNA 底物通常采用噬菌体聚合酶体外转录的方法来制备。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编:郑晓飞。实验方法原理剪接反应的典型做法是使用核提取物,即 S10

传代细胞株体外培养、鉴定与形态观察

1. 标本采集 在无菌条件下于健康产妇分娩后立即取新生儿脐带, 挤出脐带血管中的血液,放入装有含青链霉素的PBS液瓶中,2h之内行脐静脉内皮细胞培养。双抗:青霉素100u/ml; 链霉素100μl/mlPBS:KCl 0.2 g/L, KH2PO4 0.24 g/L, NaCl 8.0g/L, Na

小鼠干细胞可在体外形成“类胚胎”结构

两个“类囊胚” 图片来源:《自然》杂志官网 一个欧洲科学家团队3日在英国《自然》杂志发表医学论文称,他们仅利用小鼠干细胞,在培养皿中培育出了类似早期胚胎的结构。其为研究人员提供了一个关于早期发育的细胞培养模型,有助于阐明支撑这一重要生命阶段的关键过程。 哺乳动物的受精卵经过卵

传代细胞株体外培养、鉴定与形态观察!

  2020-07-02作者:百欧博伟浏览次数:148 来源:北京百欧博伟生物技术有限公司   传代细胞株体外培养、鉴定与形态观察!   1、标本采集   在无菌条件下于健康产妇分娩后立即取新生儿脐带, 挤出脐带血管中的血液,放入装有含青链霉素的PBS液瓶中,2h之内行脐静脉内皮细胞培养。

活细胞培养法体外试验应注意哪些?

  ①有的药物在体外试验时无致癌性,进入体内在某些酶的激活下可产生致癌作用,另外还存在着癌细胞耐药性问题。  ②一般说,细胞培养比较适用于单质药物测试,在用复方药或中药进行试验时,由于药物成分多,加上每批药物之间可能存在着质和量上的差异,评价时应考虑这些因素,持客观而谨慎态度。  ③非水溶性药物测试

传代细胞株体外培养、鉴定与形态观察!

  1、标本采集   在无菌条件下于健康产妇分娩后立即取新生儿脐带, 挤出脐带血管中的血液,放入装有含青链霉素的PBS液瓶中,2h之内行脐静脉内皮细胞培养。   双抗:青霉素100u/ml; 链霉素100μl/ml   PBS:KCl 0.2 g/L, KH2PO4 0.24 g/L, Na

体外培养细胞的染色体标本制备实验

实验材料细胞实验步骤1. 体外培养的细胞,在倒置镜下观察到有较多的分裂细胞(传代后24h,圆形发亮的细胞)时,加入秋水仙素溶液,终浓度为0.3μg/ml培养液; 2. 继续培养3h; 3. 胰酶消化收集细胞至离心管; 4. 离心1000转/min,离心10min,去上清; 5. Hanks液洗,离心

传代细胞株体外培养、鉴定与形态观察!

1、标本采集在无菌条件下于健康产妇分娩后立即取新生儿脐带, 挤出脐带血管中的血液,放入装有含青链霉素的PBS液瓶中,2h之内行脐静脉内皮细胞培养。双抗:青霉素100u/ml; 链霉素100μl/mlPBS:KCl 0.2 g/L, KH2PO4 0.24 g/L, NaCl 8.0g/L, Na

器官移植“不认生”-细胞体外“上学堂”

  器官移植手术成功就代表一劳永逸了吗?不,排异反应才是患者需要面对的终极敌人。记者12日从南京医科大学获悉,该校王学浩院士团队开展的“器官移植术后免疫诱导治疗”,可以“训练”器官“不认生”,让患者无需终生服用抗排异药。  免疫系统是人体的“武装力量”,其最大特点就是能辨认“敌我”并清除“敌人”,保

哺乳动物细胞体外剪接分析实验

实验方法原理 剪接反应的典型做法是使用核提取物,即 S100 提取物补充 SR 蛋白或粗提取物的部分纯化组分,最常使用的是 HeLa 细胞的提取物。前体 mRNA 底物通常采用噬菌体聚合酶体外转录的方法来制备。实验材料 前体 mRNA 底物试剂、试剂盒 ATP CP 混合物HEPES-KOH聚乙烯醇

牛血清对于体外培养的细胞有哪些作用

  牛血清对于体外培养的细胞有哪些作用   血清的主要作用是提供基本营养物质、提供激素和各种生长因子、提供结合蛋白、提供促接触和生长因子使细胞贴壁免受机械损伤、对培养中的细胞起到某些保护作用。其中的牛血清是细胞培养中用量zui大的天然培养基,含有丰富的细胞生长需要的营养成份,如各种血浆蛋白、多肽

传代细胞株体外培养、鉴定与形态观察!

在无菌条件下于健康产妇分娩后立即取新生儿脐带, 挤出脐带血管中的血液,放入装有含青链霉素的PBS液瓶中,2h之内行脐静脉内皮细胞培养。双抗:青霉素100u/ml; 链霉素100μl/mlPBS:KCl 0.2 g/L, KH2PO4 0.24 g/L, NaCl 8.0g/L, Na2HPO4•7H

巨噬细胞体外培养后功能检测的方法

巨噬细胞体外培养后功能检测的方法1.吞噬中性红的方法:取制备的24孔或96孔板Mφ单层,然后向每孔加入0.1%的中性红生理盐水液,继续培养20min,倾去上清液,用温PBS洗3遍,去除未被吞噬的中性红颗粒,每孔加入细胞溶解液(乙酸∶无水乙醇=50∶50)0.2ml,室温下放置2~3h,待细胞溶解后,

浅析细胞体外培养的三大污染原因

细胞培养技术是离体方法中主要的一种,是从动物体内取出细胞,模拟体内的生理环境,在无菌、适温、丰富的营养条件下,使离体细胞生存、生长并维持结构和功能的一门技术。细胞实验是科学探究的基础,细胞实验服务可以提供包括细胞侵袭检测、细胞划痕检测以及细胞增殖实验等的研究。细胞体外培养实验对于科学研究至关重要,然

浅析细胞体外培养的三大污染原因

  细胞培养技术是离体方法中主要的一种,是从动物体内取出细胞,模拟体内的生理环境,在无菌、适温、丰富的营养条件下,使离体细胞生存、生长并维持结构和功能的一门技术。细胞实验是科学探究的基础,细胞实验服务可以提供包括细胞侵袭检测、细胞划痕检测以及细胞增殖实验等的研究。细胞体外培养实验对于科学研究至关重要

体外培养细胞的染色体标本制备实验

实验材料 细胞实验步骤 1. 体外培养的细胞,在倒置镜下观察到有较多的分裂细胞(传代后24h,圆形发亮的细胞)时,加入秋水仙素溶液,终浓度为0.3μg/ml培养液; 2. 继续培养3h; 3. 胰酶消化收集细胞至离心管; 4. 离心1000转/min,离心10min,去上清; 5. Hanks液洗,

哺乳动物细胞体外剪接分析实验

            实验方法原理 剪接反应的典型做法是使用核提取物,即 S100 提取物补充 SR 蛋白或粗提取物的部分纯化组分,最常使用的是 HeLa 细胞的提取物。前体 mRNA 底物通常采用噬菌体聚合酶体外转录的方法来制备。

体外培养B淋巴细胞能增殖多少代

书上说的一种B淋巴细胞只能产生一种抗体,那么无限增殖的B淋巴细胞是增殖相同B淋巴细胞吗(产生相同的抗体)?还是无限增殖不同的淋巴细胞(增殖不增殖的是,

细胞体外暴露染毒技术的发展与展望

一、简介: 不断进行的工业发展和新技术改进应用(例如,纳米技术),都导致了空气污染的不断增加,导致了肺部疾病在过去几十年里大大的增加。新的产品(例如,纳米粒子的喷雾剂)已经被广泛应用在电气工业,日常消费和医疗应用等等特别是喷雾或粉末形式应用的产品,对人体健康被认为是特别有害的。由于增加了有害物质的释

NK细胞体外培养方法之纯因子培养

关于NK细胞培养,也许您还在疑惑为什么细胞培养到后期生长缓慢?为什么细胞扩增状态不理想?培养过程中补液标准判断的依据是什么?为了解决实验中遇到的种种问题,减少摸索的苦恼,我们特地为大家精心准备了NK试剂盒教学视频以及实验操作要点等,有了这篇干货,相信大家就能轻松搞定实验中的疑难杂症。视频已备好,快识

原代肺泡上皮细胞的体外分离培养

1、完全无血液残留肺脏组织:2、消化肺组织:常用细胞消化酶:胰蛋白酶、弹性蛋白酶、胶原酶。经支气管将酶灌注到完整的肺中消化,或把肺组织剪碎放入消化液中消化。前者比后者更有效。3、分离纯化细胞:原代肺泡上皮细胞的分离纯化主要方法:(1)密度梯度离心法:密度梯度离心分离细胞的原理是不同细胞的沉降系数不同

非洲爪蟾卵母细胞体外翻译系统

            实验材料 成年雌性非洲爪蟾 抑肽酶 tRNA 蛋白酶 K 仪器、耗材

培养细胞的细胞生物学(体内外细胞差异与体外培...2

2.传代期:初代培养细胞一经传代后便改称做细胞系(Cell Line)。在全生命期中此期的持续时间最长。在培养条件较好情况下,细胞增殖旺盛,并能维持二倍体核型,呈二倍体核型的细胞称二倍体细胞系(Diploid Cell Line)。为保持二倍体细胞性质,细胞应在初代培养期或传代后早期冻存

培养细胞的细胞生物学(体内外细胞差异与体外培...1

一、体内、外细胞的差异和分化1、差异:细胞离体后,失去了神经体液的调节和细胞间的相互影响,生活在缺乏动态平衡的相对稳定环境中,日久天长,易发生如下变化:分化现象减弱;形态功能趋于单一化或生存一定时间后衰退死亡;或发生转化获得不死性,变成可无限生长的连续细胞系或恶性细胞系。因此,培养中的细胞可视为一种

体外培养细胞的种类命名以及建立细胞系或细胞株要求...

二、建立细胞系(或株)的要求关于什么样的体外培养细胞群,可被确认为是已被鉴定的细胞(Certified Cells),国际上也尚无统一的规定,一般依具体情况而定。在只用作初代培养细胞,只要供体性别、年龄等均一,取材部位及组织种类等条件稳定,做鉴定的项目无需很多,有几项能说明细胞的相关性状的即可。

小鼠脾脏T细胞和人PBMCs的体外T细胞活化实验(一)

导言成熟T细胞通过TCR识别并与抗原-MHC复合物反应。TCR活化的最直接后果是信号通路的起始,这些信号通路包括诱导特异性蛋白酪氨酸激酶(PTKs)、PIP2分解、PKC活化以及细胞内钙离子浓度的升高。这些早期事件被传递到核,产生诸多效应:1、 T细胞克隆的扩增2、 细胞表面活化标志的上调3、 分化

小鼠脾脏T细胞和人PBMCs的体外T细胞活化实验(二)

材料1X 无菌 PBSAnti-human CD3:Clone OKT3 (Functional Grade, eBioscience Cat. No. 16-0037) or Clone HIT3a (Functional Grade, eBioscience Cat. No. 16-0039)R

小鼠胚成纤维细胞的培养和体外分化

实验材料 母鼠试剂、试剂盒 PBS胰蛋白酶溶液DNase 溶液仪器、耗材 无菌解剖器械不锈钢滤网烧瓶培养箱实验步骤 1. 准备下列试剂和材料:确定怀孕期的母鼠(孕期14至6天)无菌解剖器械(镊子、剪刀、手术刀片)Cellector 带收集装置的不锈钢滤网,1 mm 直径筛网内有搅拌棒的 125 ml