PenicillanBindingProteinAssay青霉素与细胞膜蛋白结合实验

Wash cells with 10 mM Tris pH 8French pressSlow speed spinHigh speed spinResuspend in 10 mM TrisSonicate 2 x 15 sec to remove ß-lacatamasesWash in 10 mM TrisResuspend in 10 mM TrisStore at ?70ºC until needed.Assay:Incubate membranes with ~5 µCi 3H-penicillin at 25ºC for 10 minutesAdd 1000X cold penicillinSDS-PAGEIncubate in 1 M sodium salicylate for 30 minutesDry at 80ºC for 2 hours under vacuumExpose to photogr......阅读全文

Microtubule-Binding-Assays

MaterialsSiliconized ultracentrifuge microfuge tubesGTP-depleted microtubules6X SDS loading dye1X SDS loading dyeCoomassie Brilliant Blue R 250 (0.8%

Notch信号通路的通路组成介绍

Notch基因编码一种膜蛋白受体,由Notch受体、Notch配体(DSL蛋白)及细胞内效应器分子(CSL-DNA结合 蛋白)三部分组成。(1)Notch受体:分别为Notch 1.2.3.4种;其结构:胞外区(NEC)、跨膜区(TM)和胞内区(NICD/ICN)三部分;胞外区(NEC):其结构域包

COMPETITION-ELISA

实验概要        The ELISA protocols for detection of the antibody binding to an antigen-coated microtitre plate are standard laboratory techniques and

与肾癌相关的RHEB基因编码功能描述

该基因是小GTP酶超家族的成员,编码一种脂质锚定的细胞膜蛋白,具有5个重复的ras相关GTP结合区。由于这种蛋白在胰岛素/Tor/S6K信号通路中的作用,它在调节生长和细胞周期进程中是至关重要的。蛋白质具有GTP酶活性,在GDP结合形式和GTP结合形式之间穿梭,这种活性需要蛋白质的法呢酰化。已经绘制

RHEB基因突变因子与药物介绍

该基因是小GTP酶超家族的成员,编码一种脂质锚定的细胞膜蛋白,具有5个重复的ras相关GTP结合区。由于这种蛋白在胰岛素/Tor/S6K信号通路中的作用,它在调节生长和细胞周期进程中是至关重要的。蛋白质具有GTP酶活性,在GDP结合形式和GTP结合形式之间穿梭,这种活性需要蛋白质的法呢酰化。已经绘制

RHEB基因编码的功能和结构描述

该基因是小GTP酶超家族的成员,编码一种脂质锚定的细胞膜蛋白,具有5个重复的ras相关GTP结合区。由于这种蛋白在胰岛素/Tor/S6K信号通路中的作用,它在调节生长和细胞周期进程中是至关重要的。蛋白质具有GTP酶活性,在GDP结合形式和GTP结合形式之间穿梭,这种活性需要蛋白质的法呢酰化。已经绘制

膜蛋白的纯化实验

实验步骤 一、膜的制备 从细胞或组织中分离质膜是纯化膜蛋白的第一步。由于缺少能有效分离去污剂增溶的膜蛋白的生化方法,因此在质膜成分纯化上投人一些时间会对后续步骤的结果有利。 大多数膜蛋白的含量较低, 因此选择易于大量获取并能

膜蛋白的纯化实验

实验步骤一、膜的制备从细胞或组织中分离质膜是纯化膜蛋白的第一步。由于缺少能有效分离去污剂增溶的膜蛋白的生化方法,因此在质膜成分纯化上投人一些时间会对后续步骤的结果有利。大多数膜蛋白的含量较低, 因此选择易于大量获取并能高表达目的膜蛋白的组织或细胞系就很重要。最近,人们对于将细胞表面蛋白质作为鉴定不同

关于青霉素结合蛋白的功能简介

  不同细菌的PBPs组成不同,其功能也各不相同,研究表明并非所有的PBPs均是抗生素的作用靶位。按其与细菌生理功能的关系及抗生素作用后的反应大致可以将它们分为细菌生长必需蛋白和生长非必需蛋白。现在研究得比较多的是革兰氏阳性菌中的肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌等,革兰氏阴性菌中的大肠埃希氏

蛋白质定量

Quantitative Determination of Peptides by Sulfhydryl (-SH) Groups New (Contributed by David Van Horn, Dept. of Chemistry, UC Berkeley Greg Bulaj, Dept

细菌耐药性的病理机制

  1、产生灭活酶:细菌产生灭活的抗菌药物酶使抗菌药物失活是耐药性产生的最重要机制之一,使抗菌药物作用于细菌之前即被酶破坏而失去抗菌作用。这些灭活酶可由质粒和染色体基因表达。β-内酰胺酶:由染色体或质粒介导。对β-内酰胺类抗生素耐药,使β-内酰胺环裂解而使该抗生素丧失抗菌作用。β-内酰胺酶的类型随着

冷冻电镜结合-Nanodisc在膜蛋白研究的应用(二)

将膜蛋白组装到 Nanodiscs 中主要有两种方法。第一:组装溶解在去污剂中的膜蛋白在去污剂存在条件下将膜蛋白纯化,然后再添加 MSPs 和磷脂。含有膜蛋白的 Nanodiscs 能够自发地组装,在去除掉表面活性剂后可以通过凝胶过滤(排阻层析)等方式来纯化。第二:Nanodiscs 与无细胞表达体

MSD应用案例:艾滋病疫苗开发,多因子技术检测抗体特...

[ MSD 应用案例] 病毒学顶级杂志Journal of Virology :艾滋病疫苗开发,多因子技术检测抗体特异性 中和性抗体是由血液中获得性免疫细胞暴露于病毒后产生的一类可溶性蛋白。在血液中,它们能与病毒结合,阻止其进一步感染人体细胞,并可导致病毒颗粒裂解,引起“中和”反应。由于中和性抗体可

FASLG基因突变与药物因子介绍

这个基因是肿瘤坏死因子超家族的成员编码的跨膜蛋白的主要功能是通过与fas结合诱导细胞凋亡。Fas/FasLG信号通路是免疫系统调节的关键,包括T细胞的活化诱导的细胞死亡(AICD)和细胞毒性T淋巴细胞诱导的细胞死亡。它也与一些癌症的进展有关。该基因缺陷可能与系统性红斑狼疮(sle)有关。另外,已经描

FASLG基因编码功能及结构描述

这个基因是肿瘤坏死因子超家族的成员编码的跨膜蛋白的主要功能是通过与fas结合诱导细胞凋亡。Fas/FasLG信号通路是免疫系统调节的关键,包括T细胞的活化诱导的细胞死亡(AICD)和细胞毒性T淋巴细胞诱导的细胞死亡。它也与一些癌症的进展有关。该基因缺陷可能与系统性红斑狼疮(sle)有关。另外,已经描

KinExA分子与完整细胞相互作用系统的原理与应用(二)

结果表明,CAR-T细胞与抗原的亲和力Kd为45.41pM,T细胞表面CAR的表达水平为1.368e+5,Kd与EL的95%置信区间均较窄,数据非常准确可信。 应用二、KinExA在高亲和力检测上应用对于抗肿瘤药市场,目前精准医疗最为成熟的领域还是以靶向药物为代表的抗肿瘤药物。由于单克隆抗体类抗癌药

膜蛋白的纯化实验(一)

一、膜的制备从细胞或组织中分离质膜是纯化膜蛋白的第一步。由于缺少能有效分离去污剂增溶的膜蛋白的生化方法,因此在质膜成分纯化上投人一些时间会对后续步骤的结果有利。大多数膜蛋白的含量较低, 因此选择易于大量获取并能高表达目的膜蛋白的组织或细胞系就很重要。最近,人们对于将细胞表面蛋白质作为鉴定不同

膜蛋白的纯化实验(二)

三、膜蛋白的纯化一 旦 使 用 了 合 适 的 去 污 剂 将 膜 蛋 白 从 细 胞 膜 中 増 溶 出 来 ,就 可 以 分 离 目 标 蛋 白 质 了 。传 统 色 谱 层 析 技 术 ,如 凝 胶 过 滤 、亲 和 、离 子 交 换 和 层 析 聚 焦 (chromatofocusi

夹心ELISA2

General Protocol for the Sandwich ELISA method:Before the assay, both antibody preparations should be purified and one must be labeled.For most applic

流式细胞术检测细胞凋亡

实验概要Provides a rapid and convenient assay for apoptosis. 实验原理Apoptosis  is a carefully regulated process of cell death that occurs as a normal  part o

冷冻电镜结合-Nanodisc在膜蛋白研究的应用(一)

细胞生物膜所含的蛋白称为膜蛋白,其参与和行使了众多细胞功能,包括细胞与外界进行物质运输、信息传递、能量交换等。膜蛋白担任了各种神经信号分子、激素和其他底物的受体,构成了各种离子跨膜的通道,以及构成各类转运蛋白。在人体蛋白中,有大约 30% 是膜蛋白。FDA 批准的新药中,绝大多数都以膜蛋白为靶点

Bradford-Assay

The bradford dye-binding assay is a colorimetric assay for measuring total protein concentration. It involves the binding of Coomassie Brilliant blue

Bradford-Assay

Bradford AssayThe bradford dye-binding assay is a colorimetric assay for measuring total protein concentration. It involves the binding of Coomassie B

Antibody-Purification-using-Protein-A,-Protein-G,-or-Protein-L-Agarose

实验概要This protocol is designed as a quick purification method for antibodies from mammalian sera, ascites, and cell culture supernatants. It should

Antibody-Purification-using-Protein-A,-Protein-G,-or-Protein-L-Agarose

实验概要This  protocol is designed as a quick purification method for antibodies from  mammalian sera, ascites, and cell culture supernatants主要试剂 Protein

肿瘤细胞侵袭试验(Tumour-Invasion-Assay)

一 、 原理Matrigel 是从小鼠EHS肉瘤中提取的基质成分,含有LN、IV型胶原、接触蛋白和肝素硫酸多糖,铺在无聚乙烯吡硌烷酮的聚碳酸酯滤膜上,能在DMEM培养基中重建形成膜结构,这种膜结构与天然基质膜结构极为相似。滤膜孔径一般为8um,而且膜孔都被Matrigel覆盖,细胞不能自由穿过,必须

A-Method-for-Structure3

CSP-Dependent Transformation AssayTo determine if synthetic peptides activated quorum sensing for induction of genetic competence, we used the comC de

IFNAR1基因突变与药物因子介绍

这个基因编码的蛋白质是一种I型膜蛋白,形成α和β干扰素受体的两条链之一。受体的结合和激活刺激Janus蛋白激酶,进而磷酸化一些蛋白质,包括STAT1和STAT2编码的蛋白质也作为抗病毒因子发挥作用[由RefSeq提供,2008年7月]The protein encoded by this gene

IFNAR1基因编码功能及结构描述

这个基因编码的蛋白质是一种I型膜蛋白,形成α和β干扰素受体的两条链之一。受体的结合和激活刺激Janus蛋白激酶,进而磷酸化一些蛋白质,包括STAT1和STAT2编码的蛋白质也作为抗病毒因子发挥作用[由RefSeq提供,2008年7月]The protein encoded by this gene

IFNAR1基因编码功能及结构描述

这个基因编码的蛋白质是一种I型膜蛋白,形成α和β干扰素受体的两条链之一。受体的结合和激活刺激Janus蛋白激酶,进而磷酸化一些蛋白质,包括STAT1和STAT2编码的蛋白质也作为抗病毒因子发挥作用[由RefSeq提供,2008年7月]The protein encoded by this gene