放射免疫对流电泳

(一)原理将放射性元素标记的抗体(或抗原)与相应的抗原(或抗体)沉淀时,沉淀线通过自显影而证实。所谓自显影,就是通过复合物中的标记同位素在蜕变过程中放出的射线,作用于感光材料的卤化银晶体而产生潜影,再经过显影把“像”显示出来。这样,能检出肉眼看不见的沉淀线,从而提高反应的敏感性,这种方法可应用于凝胶中的所有反应。(二)材料1、放射性同位素标记的抗原或抗体2、X—射线胶片或全色胶片3、显影液与定影液4、其它同对流免疫电泳(三)操作方法1、按对流免疫电泳制备凝胶板并打孔。2、加样阴极端孔内加抗原,阳极端孔内加抗体。在加被检抗体样品时,迅速加入标记抗原(2 000~3 000cpm),并使之混合,勿使抗原吸收后再加标记抗原,以免由于标记原的滞面而形成假阳性。3、电泳电流2.6cm×7.5cm的小板用4mA。4、电泳后,平板浸在3%HCl中漂洗8h,换液2次。5、用流水漂洗过夜。6、干燥室温或鼓风机吹干。7、曝光在暗室将胶片切成与平板一......阅读全文

放射免疫技术的基本类型和原理

(一)放射免疫分析(RIA)以放射性核素标记抗原与未标记抗原竞争结合特异性抗体,测定样品中抗原量的一种分析法。(二)免疫放射分析(IRMA)用放射性核素标记的过量抗体与待测抗原直接结合,固相免疫吸附载体分离结合与游离标记抗体的非竞争放射免疫分析法。

放射免疫分析法的建立1

一、放射免疫分析的基本试剂(一)标准品标准品是放射免疫分析法定量的依据,由于以标准品的量用来表示被涮物质的量,故标准品与被测物质应当化学结构一致并具有相同免疫活性。标准品作为定量的基准。应要求高度纯化。标准品除含量应具有准确性外,还应具备稳定性,即在合理的贮存条件下保持原来的特性。按实验要求,将标准

放射免疫技术的方法学评价有什么?

  除常规的灵敏度、精密度、准确性、特异性和稳定性等指标外,还应注意以下指标:  (一)可靠性:又称健全性,是评价被测物与标准品的免疫活性是否相同。借助标准曲线与样品稀释曲线的平行性分析来判断。平行性好者可靠。  (二)剂量-反应曲线:通过已知浓度的标准品和相应的反应参数绘制成剂量-反应曲线,待测物

γ放射免疫计数器检定规程(二)

7 计量器具控制计量器具控制包括: 首次检定、后续检定和使用中检验。7.1 检定条件7.1.1 计量标准器7.1.1.1 活度标准为125I核素或129I核素Y标准源。7.1.1.2 Y标准源的活度范围为 (100-3000) Bq。7.1.1.3 Y标准源的扩展不确定度≤5% (k=3)。7.1.

放射免疫分析的基本试剂是什么

1、标准品标准品是放射免疫分析法定量的依据,由于以标准品的量来表示被测物质的量,故标准品与被测物质的化学结构应当一致并具有相同的免疫活性。标准品作为定量的基准,应要求高度纯化。标准品除含量应具有准确性外,还应具备稳定性,即在合理的贮存条件下保持原来的特性。按实验要求,将标准品用缓冲液配成含不同剂量的

放射免疫分析法的优缺点

  RIA法的优点是灵敏、特异、简便易行、用样量少等,常可测至皮摩尔。本法虽然也用放射性物质,但一般都是在测试样品时再加入标记的同位素示踪物,此示踪物的放射性强度极低,一般不会对实验者引起辐射损伤。本法的缺点是有时会出现交叉反应、假阳性反应,组织样品处理不够迅速,不能灭活降解酶和盐及pH有时会影响结

放射免疫技术的基本类型及原理

(一)放射免疫分析(RIA)以放射性核素标记抗原与未标记抗原竞争结合特异性抗体,测定样品中抗原量的一种分析法。(二)免疫放射分析(IRMA)用放射性核素标记的过量抗体与待测抗原直接结合,固相免疫吸附载体分离结合与游离标记抗体的非竞争放射免疫分析法。

放射免疫技术的基本类型和原理

  (一)放射免疫分析(RIA)以放射性核素标记抗原与未标记抗原竞争结合特异性抗体,测定样品中抗原量的一种分析法。  (二)免疫放射分析(IRMA)用放射性核素标记的过量抗体与待测抗原直接结合,固相免疫吸附载体分离结合与游离标记抗体的非竞争放射免疫分析法。

放射免疫分析顺序饱和加样程序

一、基本原理先将标准物或血样品与抗血清混匀,免疫反应6~24h,使抗原与抗体充分结合,甚至达到平衡,然后再加入标记抗原,与抗体反应12~24h,最后分离B与F,这称为顺序饱和分析法。应用顺序饱和加样,可以提高测定方法的灵敏度。Utiger在做人促甲状腺激素(TSH)放射免疫分析时,将标记物延至第2天

临床化学检查方法介绍放射免疫分析

放射免疫分析介绍:  放射免疫技术为一种将放射性同位素测量的高度灵敏性、精确性和抗原抗体反应的特异性相结合的体外测定超微量(10-9-10-15g)物质的新技术。广义来说,凡是应用放射性同位素标记的抗原或抗体,通过免疫反应测定的技术,都可称为放射免疫技术,经典的放射免疫技术是标记抗原与未标抗原竞争有

放射免疫分析法的测定方法

分别在一定数量的试管中加入不同浓度的标准抗原(或未知样品),每管加入等量的放射性标记抗原和一定量的抗体,在4℃或37℃下保温,待反应平衡后,选用适当的方法将B和F分离,测量放射性强度,由放射性强度比B/T对Ag量制出标准曲线,即可从标准曲线上查出未知样品量。测定时,首先要制备出纯的抗原和抗体。凡能刺

放射免疫沉淀法的概念

中文名称放射免疫沉淀法英文名称radioimmunoprecipitation定  义以放射性标记的抗原或抗体进行的免疫沉淀法。能大大提高检测抗原抗体复合体的灵敏度。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)

放射免疫吸附试验的-概念和应用

中文名称放射免疫吸附试验英文名称radioimmunosorbent test;RIST定  义测定血清中总IgE浓度的试验。即将待测血清与标准量放射标记的IgE相混,再与结合于不溶性载体上的抗IgE抗体反应,经适度的孵育和洗涤后,测定吸附于载体上的放射标记的IgE量。应用学科免疫学(一级学科),应

放射免疫测定法测定睾酮

放射免疫测定法:睾酮主要产生于睾丸小叶曲精管之间的间质细胞,此外肾上腺皮质也能合成。当标本中加入H睾酮和睾酮抗体即产生竞争抑制作用,在反应系统中,当H睾酮和其抗体量保持恒定,则标记抗体复合物的形成量受未标记抗原量所制约,用葡聚糖加膜活性炭进行分离,使结合标记抗原与游离标记抗原分开,测定沉淀的结合部分

放射免疫测定操作的安全措施

放射免疫测定操作的安全措施 工作人员被放射性同位素污染是生物医学实验中最大的危害之一,为了在操作过程中确保安全,有许多严格的规定和要求。虽然在通常实验中所用同位素的量相对地讲是低的,但这些预防措施必须严格遵守。现对从事这一工作的一些原则作一简述,多半是一些普通的常识,但在执行时往往容易忽略而造成

放射免疫沉淀法技术特点

中文名称放射免疫沉淀法英文名称radioimmunoprecipitation定  义以放射性标记的抗原或抗体进行的免疫沉淀法。能大大提高检测抗原抗体复合体的灵敏度。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)

γ放射免疫计数器检定规程(一)

1 范围本规程适用于单探头和多探头的Y放射免疫计数器的首次检定、后续检定和使用中检验。计数率范围为3000/min - 200000/min,常用核素为125I。 2 引用文献本规程引用下列文献:GB 10255-1996《Y放射免疫计数器》GB 4960-1996《核科学技术术语》GB/T 408

放射免疫分析顺序饱和加样程序

 1.基本原理先将标准物或血样品与抗血清混匀,免疫反应6~24h,使抗原与抗体充分结合,甚至达到平衡,然后再加入标记抗原,与抗体反应12~24h,最后分离B与F,这称为顺序饱和分析法。  应用顺序饱和加样,可以提高测定方法的灵敏度。Utiger在做人促甲状腺激素(TSH)放射免疫分析时,将标记物延至

放射免疫分析平衡饱和加样程序

1.基本原理所谓平衡饱和,是指抗原和抗体反应达到再不结合,也不解离的平衡状态,称为饱和状态,即平衡饱和。所以,有人称此为饱和分析法。这意味着抗原或被测抗原、标记抗原、抗体三者一起温育。2.加样程序一般先加标准物或被测样品,再加抗血清,最后加标记物。这样的顺序是让标准物或被测物与抗体有短暂的结合,提高

固相放射免疫测定的技术特点

中文名称固相放射免疫测定英文名称solid-phase radioimmunoassay定  义将抗原或抗体吸附在固相载体上进行反应和检测的一种放射免疫分析技术。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫学检测和诊断(三级学科)

放射免疫分析法的优缺点

  RIA法的优点是灵敏、特异、简便易行、用样量少等,常可测至皮摩尔。本法虽然也用放射性物质,但一般都是在测试样品时再加入标记的同位素示踪物,此示踪物的放射性强度极低,一般不会对实验者引起辐射损伤。本法的缺点是有时会出现交叉反应、假阳性反应,组织样品处理不够迅速,不能灭活降解酶和盐及pH有时会影响结

放射免疫测定仪器的工作原理

  1. 放射免疫分析:利用标记抗原与未标记抗原(待测物)竞争有限抗体的放射免疫分析。  在反应体系中,标记抗原(Ag*)和未标记抗原(Ag)与特异性抗体(Ab)发生竞争性结合,根据质量定律,这种作用在一定反应时间后会达到动态平衡。平衡的时候,Ag*-Ab与Ag的总量之间存在一定的函数关系。换句话说

关于放射免疫分析法的展望

  在本法的基础上,近年来又发展了其他免疫分析法,用其他有特殊性质的物质代替放射性同位素来标记抗原,同样利用标记与未标记抗原与抗体的竞争性结合,然后用适宜方法测定。其中研究较多的是荧光免疫分析,采用荧光化合物标记抗原,结合分离后通过荧光值的测定进行定量分析。

放射免疫分析法的优缺点

RIA法的优点是灵敏、特异、简便易行、用样量少等,常可测至皮摩尔。本法虽然也用放射性物质,但一般都是在测试样品时再加入标记的同位素示踪物,此示踪物的放射性强度极低,一般不会对实验者引起辐射损伤。本法的缺点是有时会出现交叉反应、假阳性反应,组织样品处理不够迅速,不能灭活降解酶和盐及pH有时会影响结果等

放射免疫分析法的建立2

(3)分离B与F:每管加入2%加膜活性炭溶液300μl,摇匀,立即离心,去上清,测沉淀(F)的CPM数。 (二)顺序饱和加样程序 1、基本原理 先将标准物或血样品与抗血清混匀,免疫反应6~24h,使抗原与抗体充分结合,甚至达到平衡,然后再加入标记抗原,与抗体反应12~24h,最后分离B

放射免疫分析平衡饱和加样程序

一、基本原理所谓平衡饱和,是指抗原和抗体反应达到再不结合,也不解离的平衡状态,称为饱和状态,即平衡饱和。所以,有人称此为饱和分析法。这意味着抗原或被测抗原、标记抗原、抗体三者一起温育。二、加样程序一般先加标准物或被测样品,再加抗血清,最后加标记物。这样的顺序是让标准物或被测物与抗体有短暂的结合,提高

利用间接放射免疫法检测样品的mTNF

实验概要本实验利用间接放射免疫法检测样品的mTNF。选用两种抗体,一抗为抗TNF抗体,可与细胞膜表面的mTNF特异性结合;二抗为抗一抗抗体,且标记放射性同位数125I,可与一抗特异性结合,通过测定其放射活性,并与标准品对照,即可间接测定细胞膜表面的TNF。实验原理肿瘤坏死因子(tumor nec

放射免疫测定的实验目的和原理

放射免疫测定是利用放射性同位素的高度灵敏性、精确性与 抗原抗体反应的特异性相结合而创建的一种 在液相内微量物质的定量测定方法。 放射免疫测定(radioimmunoassay,RIA)是利用放射性核素的测量方法与免疫反应的基本原理相结合的一种放射性核素体外检测法。该法有灵敏度高、特异性强、精确度佳及

胰岛素测定实验——放射免疫测定

放射免疫测定胰岛素可以用于:(1)以放射性同位素作为示踪物进行免疫标记检测技术;(2)用同位素标记的抗原和样品中待测的未标记抗原与固定量的特异性抗体竞争结合,或进行竞争性一致反应,以判定待测抗原含量。实验方法原理胰岛素的分子量5700,由两条氨基酸肽链组成。A链有21个 氨基酸,B链有30个氨基酸。

关于布鲁氏杆菌病的实验室检查介绍

  1.血象 白细胞半数正常或轻度减少,淋巴细胞相对或绝对增多,分类可达60%以上。血沉在各期均增速。久病者有轻或中度贫血。  2.细菌学检查 患者血液、骨髓、乳汁、子宫分泌物均可做细菌培养。急性期阳性率高,慢性期低。骨髓标本较血液标本阳性率高。  3.免疫学检查  (1)血清凝集试验(Wright