细菌浓度的简单确定法:麦氏比浊法

麦氏比浊管是McFarland发明的一种用于微生物比浊的不同浊度的标准浊度管。具体的配制方法是根据硫酸和氯化钡的比例来定的,有表可查,这样不同比例生成的硫酸钡沉淀的浓度不同,且都有定值。 麦氏比浊管的配比如下: 操作方法:1、轻摇标准试管。2、无菌操作将被测定的肉汤培养物加到与标准管相同直径(大小)的无菌试管中。3、以无菌操作向被测定试管加入无菌生理盐水(NaCl),直到浓度与所要求的标准管的浓度相同。使用技巧:1、直接用眼睛看(需要经验,误差较大)。2、找张白纸,打上平行直线,然后看(如图示,利用光在不同浓度液体折射不同)。注意事项:1、如果测定的肉汤培养物不澄清,由培养物的值减去未接种培养基的值来校正细菌浓度。4号管(肉汤培养物)-1号管(孵育过的未接种的肉汤管)=3号管(校正读数)。2、如果肉汤颜色很深,把未接种试管放在标准管的后面读数即可。编者注:1、......阅读全文

免疫比浊法的发展历程

  早期免疫分析通过观察沉淀物形成,凝集及溶血现象发生来分析,如 免疫扩散、 免疫电泳、血凝试验、补体结合等。  上世纪50年代末60年代初,利用AG-AB复合物形成使浊度改变,再用比浊计来比浊,但因其敏感性差未被接受。  70年代初,开始有自动检测系统,但因其用的是激光为光源,固定波长,灵敏度较低

比浊法的术语基本介绍

  比浊法又称浊度测定法。为测量透过悬浮质点介质的光强度来确定悬浮物质浓度的方法,这是一种光散射测量技术。  是利用透射光强度(I)与入射光强度(Io)的比值I/Io,或用 散射光强度(Is)与入射光强度(Io)的比值 Is/Io,测定悬浊物质含量的方法。  本法主要是用于测定能形成悬浮体的沉淀物质

免疫比浊法的原理简介

  免疫比浊法(Immunoturbidimetric Assays)是抗原抗体结合动态测定方法。其基本原理是:当抗原与抗体在特殊稀释系统中反应而且比例合适(一般规定抗体过量)时,形成的可溶性 免疫复合物在稀释系统中的促聚剂(聚乙二醇等)的作用下,自液相析出,形成微粒,使反应液出现浊度。当抗体浓度固

免疫比浊法的发展历程

早期免疫分析通过观察沉淀物形成,凝集及溶血现象发生来分析,如免疫扩散、免疫电泳、血凝试验、补体结合等。上世纪50年代末60年代初,利用AG-AB复合物形成使浊度改变,再用比浊计来比浊,但因其敏感性差未被接受。70年代初,开始有自动检测系统,但因其用的是激光为光源,固定波长,灵敏度较低,而且时间一般要

关于比浊法的应用简介

  本法主要是用于测定能形成悬浮体的沉淀物质,例如微量磷、硫、氯和钙等的测定,生物碱沉淀试剂形成的混浊也可用此法测定。  这是根据悬浮体的透射光或散射光的强度以测定物质组分含量的一种分析方法。当光线通过一混浊溶液时,因悬浮体选择地吸收了一部分光能,并且悬浮体向各个方面散射了另一部分光线,减弱了透过光

免疫比浊法的发展历程

早期免疫分析通过观察沉淀物形成,凝集及溶血现象发生来分析,如免疫扩散、免疫电泳、血凝试验、补体结合等。上世纪50年代末60年代初,利用AG-AB复合物形成使浊度改变,再用比浊计来比浊,但因其敏感性差未被接受。70年代初,开始有自动检测系统,但因其用的是激光为光源,固定波长,灵敏度较低,而且时间一般要

免疫比浊法的方法分类

1. 透射免疫比浊法:通过检测光被吸收、衍射、反射和折射后光线减弱的变化,来定量抗原抗体的复合物。2. 散射免疫比浊法:通过检测光折射和衍射而形成的散射光强度来定量抗原抗体的复合物。3. 免疫胶乳比浊法:是以胶乳作为载体对小分子免疫复合物进行微量测定,进一步提高了免疫浊度测定的灵敏度。

免疫比浊法的注意事项

抗体(Ab)与可溶性抗原(Ag)反应,形成一定结构的免疫复合物,成为悬浮于反应溶液中的微粒。在沉淀反应中形成的复合物微粒具有特殊的光学性质,可用仪器检测,提高了检测的速度、灵敏度和易操作性。免疫比浊测定注意事项:1、抗原或抗体量大大过剩,可出现可溶性复合物,造成误差。2、应维持反应管中抗体蛋白始终过

散射比浊法的的方法介绍

在该方法中检测通道的单色光源与光探测器呈90°直角,当向样品中加入凝血激活剂后,随样品中纤维蛋白凝块的形成过程,样品的散射光强度逐步增加。当样品完全凝固以后,散射光的强度不再变化,通常是把凝固的起始点作为0%,凝固终点作为100%,把50%作为凝固时间。光探测器接收这一光学的变化,将其转化为电信号,

关于比浊法的常用方法介绍

  (1)目视比浊法  目视比浊法就是指用眼睛观, 比较悬浊液浊茺以确定物质含量的方吱。其操作是先配制一系列浊度逐渐增加的标准,然后在同样的实验条件下,将被测液的浊度与标准进行比较比而获得测量结果。  (2)免疫比浊法  免疫比浊法包括透射比浊法和散射比浊法两种。  (3)光电比浊法  当光束通过悬

免疫比浊法对抗体的要求

免疫比浊测定法要求抗体的特异性强、效价高、亲和力强,并使用R型抗体。(1)抗体的特异性。(2)抗体的效价。(3)抗体的亲和力:亲和力是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力强则抗体的活性高,不仅可以加快抗原抗体反应的速度,而且形成的IC较牢固,不易发生解离,这在速率比浊法中尤为重要。(4)R型和H型抗体

免疫透射比浊法的原理

原理:可溶性抗原抗体反应后形成的免疫复合物,使介质浊度发生改变,光线通过抗原抗体反应后的溶液时,被其中的免疫复合物微粒吸收,在保持抗体过量的情况下,吸光度(A值)与免疫复合物量呈正相关。与已知浓度的抗原标准品相比较,可确定标本中抗原的含量。

免疫比浊法的分类有哪些?

  1.免疫透射比浊法 抗原抗体结合后,形成免疫复合物,在一定时间内复合物聚合出现浊度。当光线通过溶液时,可被 免疫复合物吸收。 免疫复合物量越多,光线吸收越多。光线被吸收的量在一定范围内与 免疫复合物的量成正比。利用比浊计测定光密度值,复合物的含量与光密度值成正比,同样当抗体量一定时,光密度值也与

比浊法的基本原理

比浊法的主要依据是悬浊液中的颗粒对光线的散射的性质。当一束光线通过悬浊液时,液体中颗粒的大小若小于入射光相应减弱。在一定条件下散射光的程度(或透射光减弱的程度)和悬浊液中颗粒的数量成比例关系。其变化可用下式表示:其中,I为透射光强度,为入射光强度,b为光径,为浊度。上式和比尔定律公式相似,故比色的程

光扫描比浊法的结果分析

用平行于液面的细光束,沿深度方向快速扫描整个悬浮液,检测出不同深度上的透射光强度,从而测得粉状物料的颗粒组成。

尿钠的测定实验——比浊法

尿钠(Na)是指测定24小时尿液中钠离子的浓度可以用于测定衡量个体每日钠摄入量。实验方法原理用无水乙醇沉淀尿中蛋白,获得无蛋白尿滤液,再将其与焦性锑酸钾作用生成焦性锑酸钠沉淀。最后与标准管比较求得尿钠的含量,其反应式如下:NaCl+K[Sb(OH)6]→Na[Sb(OH)6]+KCl实验材料尿液试剂

关于比浊法的应用相关介绍

  本法主要是用于测定能形成悬浮体的沉淀物质,例如微量磷、硫、氯和钙等的测定,生物碱沉淀试剂形成的混浊也可用此法测定。  这是根据悬浮体的透射光或散射光的强度以测定物质组分含量的一种分析方法。当光线通过一混浊溶液时,因悬浮体选择地吸收了一部分光能,并且悬浮体向各个方面散射了另一部分光线,减弱了透过光

免疫比浊法的定义和原理

免疫比浊法(Turbidimetric inhibition immuno assay)是抗原抗体结合动态测定方法。免疫比浊法(Turbidimetric inhibition immuno assay)是抗原抗体结合动态测定方法。其基本原理是:当抗原与抗体在特殊稀释系统中反应而且比例合适(一般规定

细胞计数实验——光电比浊计数法

实验方法原理当光线通过微生物菌悬液时,由于菌体的散射及吸收作用使光线的透过量降低。在一定的范围内,微生物细胞浓度与透光度成反比,与光密度成正比,而光密度或透光度可以由光电池精确测出(图 VIII-4)。因此,可用一系列已知菌数的菌悬液测定光密度。作出光密度--菌数标准曲线。然后,以样品液所测得的光密

细胞计数实验——光电比浊计数法

实验方法原理当光线通过微生物菌悬液时,由于菌体的散射及吸收作用使光线的透过量降低。在一定的范围内,微生物细胞浓度与透光度成反比,与光密度成正比,而光密度或透光度可以由光电池精确测出(图 VIII-4)。因此,可用一系列已知菌数的菌悬液测定光密度。作出光密度--菌数标准曲线。然后,以样品液所测得的光密

尿钠的测定实验_比浊法

尿钠(Na)是指测定24小时尿液中钠离子的浓度可以用于测定衡量个体每日钠摄入量。实验方法原理用无水乙醇沉淀尿中蛋白,获得无蛋白尿滤液,再将其与焦性锑酸钾作用生成焦性锑酸钠沉淀。最后与标准管比较求得尿钠的含量,其反应式如下:Nacl+K[Sb(OH)6]→Na[Sb(OH)6]+KCl实验材料尿液试剂

免疫比浊法试验的注意事项

  抗体(Ab)与可溶性抗原(Ag)反应,形成一定结构的免疫复合物,成为悬浮于反应溶液中的微粒。在 沉淀反应中形成的复合物微粒具有特殊的光学性质,可用仪器检测,提高了检测的速度、灵敏度和易操作性。  免疫比浊测定注意事项:  1、抗原或抗体量大大过剩,可出现可溶性复合物,造成误差。  2、应维持反应

关于试验分析比浊法的分类介绍

  (1)目视比浊法  目视比浊法就是指用眼睛观, 比较悬浊液浊茺以确定物质含量的方吱。其操作是先配制一系列浊度逐渐增加的标准,然后在同样的实验条件下,将被测液的浊度与标准进行比较比而获得测量结果。  (2)免疫比浊法  免疫比浊法包括透射比浊法和散射比浊法两种。  (3)光电比浊法  当光束通过悬

细菌增殖曲线的测定实验——比浊法

实验方法原理将少量细菌接种到一定体积的、适合的新鲜培养基中,在适宜的条件下进行培养,定时测定培养液中的菌量,以菌量的对数作纵坐标,生长时间作横坐标,绘制的曲线叫生长曲线。它反映了单细胞微生物在一定环境条件下于液体培养时所表现出的群体生长规律。依据其生长速率的不同,一般可把生长曲线分为延缓期、对数期、

免疫比浊法的基本原理

免疫比浊法(Turbidimetric inhibition immuno assay)是抗原抗体结合动态测定方法。其基本原理是:当抗原与抗体在特殊稀释系统中反应而且比例合适(一般规定抗体过量)时,形成的可溶性免疫复合物在稀释系统中的促聚剂(聚乙二醇等)的作用下,自液相析出,形成微粒,使反应液出现浊

免疫比浊法的基本原理

免疫比浊法(Turbidimetric inhibition immuno assay)是抗原抗体结合动态测定方法。其基本原理是:当抗原与抗体在特殊稀释系统中反应而且比例合适(一般规定抗体过量)时,形成的可溶性免疫复合物在稀释系统中的促聚剂(聚乙二醇等)的作用下,自液相析出,形成微粒,使反应液出现浊

什么是散射比浊?什么是透射比浊?

浑浊液经过光线照射,光线会被散射掉一部分,透过去的光线被接收管接收,这就是最早的透射比浊,为了得到准确或者说更多的信息,把散射掉的光线也接收出来进行分析,就形成了现在的散射比浊,其实,散射比浊包含了透射比浊。

免疫比浊法和乳胶凝集法检测类风湿因子(RF)的结果比...

免疫比浊法和乳胶凝集法检测类风湿因子(RF)的结果比较分析类风湿因子(RF)是诊断类风湿关节炎(RA)的一个重要的实验室指标,其检测方法很多,国外主要采用免疫比浊法(ITA)、酶联免疫吸附法 (ELISA)、放射免疫法(RIA)等,国内仍普遍采用乳胶凝集试验(LAT),该方法操作简单,不需要特殊

免疫比浊法对抗体的要求都有哪些?

免疫比浊测定法要求抗体的特异性强、效价高、亲和力强,并使用R型抗体。(1)抗体的特异性。(2)抗体的效价。(3)抗体的亲和力:亲和力是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力强则抗体的活性高,不仅可以加快抗原抗体反应的速度,而且形成的IC较牢固,不易发生解离,这在速率比浊法中尤为重要。(4)R型和H型抗体

定时散射比浊法是如何测定的呢?

  在保证抗体过量的情况下,加入待测抗原。在反应的第一阶段,溶液中产生的散射光信号波动较大,所获取的信号计算出的结果会产生一定的误差。  1.反应阶段加入全量标本,在4分钟内测量散射光信号。  2.使所有未知抗原全部与抗体结合形成抗原-抗体复合物,故需要:抗体过量;对抗原过量进行阈值限定。