免疫组化的经验总结(3)-操作要点和技巧
1. 固定:最好用4%的多聚甲醛固定液。对于冰冻切片,甲醛固定有时比冰冻丙酮好;但对于不同的组织和抗原,可选用不同的固定液。 有时候商品化的抗体会有比较适合而推荐的固定液,请于购置前注意说明书。 Bouin S固定液:饱和苦味酸750ml,甲醛250ml,冰醋酸50ml,其对组织的穿透力较强,固定较好,结构完整,但因偏酸,对抗原有一定损害,且组织收缩明显,不适于组织标本的长期保存。 PLP液:即高碘酸钠-赖氨酸-多聚甲醛,适于固定石蜡切片。适于富含糖类组织,对超微结构及许多抗原的抗原性保存较好。 2.组织脱水,透明:时间不能太长,否则在切片时容易碎片,切不完整。 3.切片时展片:有些组织在切片后难以在水中展开,这时可适当地在水中加入几滴乙醇。 4.烤片:60℃ 30分钟或37℃ 过夜,温度太高或时间太长,抗原容易丢失。 ......阅读全文
免疫组化的操作步骤
1. 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行2.缓冲液洗 3min/2 次。3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色,将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。4. 缓冲液洗 5min/2 次。5. 滴加 Ultra V Block ,
免疫组化的操作流程
实验概要本文介绍了免疫组织化学实验操作流程,主要有:脱蜡和水化,抗原修复及免疫组织化学染色等步骤。实验原理免疫组化,是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位
免疫组化的操作流程
实验概要本文介绍了免疫组织化学实验操作流程,主要有:脱蜡和水化,抗原修复及免疫组织化学染色等步骤。实验原理免疫组化,是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位
免疫组化的操作步骤
一 免疫组化(SP法)操作步骤 1. 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行 2.缓冲液洗 3min/2 次。 3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色,将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。 4. 缓冲液洗 5min/
耐药细胞的特性和操作要点有哪些
耐药细胞的特性: 1)细胞来源于人正常口腔黏膜组织。 2)细胞鉴定:Vimentin免疫荧光染色为阳性。 3)经鉴定细胞纯度高于90%。 4)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。 5)细胞生长方式:不规则细胞,长梭形,贴壁培养。 耐药细胞的操作要点: 1)将
PCR实验技巧3
11. Template DNA preparation 提取DNA时的试剂会抑制PCR反应的顺利进行.因此需要对TEMPLATE DNA进行纯化.特别是SDS(
植物组织RNA提取的要点与技巧
从植物组织中提取RNA 是进行植物分子生物学方面研究的必要前提。要进行Northern杂交分析,纯化mRNA 以用于体外翻译或建立cDNA文库,RT-PCR及差示分析等分子生物学研究,都需要高质量的RNA 。因此,从植物组织中提取纯度高、完整性好的RNA 是顺利进行上述研究的关键所在。从文献报道上看
ELISA的操作要点
优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,严格遵照规定操
RAPD操作要点
一、 材料 不同来源的DNA(50ng/ul)。 二、设备 PCR仪,PCR管或硅化的0.5ml eppendorf管,电泳装置。 三、试剂 1、随机引物(10mer) (5umol/L):购买成品。 2、Taq酶:购买成品。 3、10xPCR 缓冲液:配方见第八章。 4
RFLP操作要点
RFLP操作要点 一、 材料 基因组DNA(大于50kb,分别来自不同的材料)。 二、设备 电泳仪及电泳槽, 照相用塑料盆5只,玻璃或塑料板(比胶块略大) 4块,吸水纸若干,尼龙膜(依胶大小而定),滤纸 ,eppendorf管(0.5ml)若干。 三、试剂: 1、限制性内
ELISA操作要点
1 标本的采取和保存可用作ELISA测定的标本十分广泛,体液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、粪便)等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进行测定(如血清、尿液),有些则需经预处理(如粪便和某些分泌物)。大部分ELISA检测均以血清为标本。血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂
ELISA操作要点
ELISA操作要点:1; 显色 显色是ELISA中的最后一步温育反应,此时酶催化无色的底物生成有色的产物。反应的温度和时间仍是影响显色的因素。在一定时间内,阴性孔可保持无色,而阳性孔则随时间的延长而呈色加强。适当提高温度有助于加速显色进行。在定量测定中,加入底物后的反应温度和时间应按规定力求准确。
ELISA操作要点
优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条件。 1 标本的采取和保存 可用作ELISA测定的标本十分广泛,体液、分泌物和排泄物)等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进行测定(如血清、尿液),有些则需经预处理(如粪便和某些分泌物)。
移液器的操作技巧讲解
移液器作为实验室常规的工具,在日常使用过程中,一些正确操作和技巧需要引起使用者的重视: 1、设定容量:在设定所需要的容量时应调整到大于设定容量值的1/4圈,然后再调至设定值,这样可排除机械间隙,使设定量值准确,也就是说先将容量调节钮旋转超过目的容量值的1/4圈,再向下调至设定值。 2、吸液
移液器的操作技巧分享
移液器作为实验室常规的工具,在日常使用过程中,一些正确操作和技巧需要引起使用者的重视:1、设定容量 :在设定所需要的容量时应调整到大于设定容量值的 1/4 圈,然后再调至设定值,这样可排除机械间隙,使设定量值准确,也就是说先将容量调节钮旋转超过目的容量值的 1/4 圈,再向下调至设定值。2、吸液的正
球磨机的操作小技巧
球磨机是一种非常常见的磨矿用设备,它利用物料和钢球或者钢柱的摩擦和转筒自己的转动形式来促使物料达到理想的粒级标准,以方便后续选矿过程中的分级和浮选等操作。 球磨机的操作技巧 1、开机前,对于设备各个部分进行检查,检查螺栓是否松动,润滑是否正常,传动装置是否可靠,仪表是否灵敏。 2、盘
便携式COD测定仪操作步骤和操作技巧
经常有用户在操作COD测量过程中,出现: (1)误差偏大 (2)重复性不好 (3)测量结果出现负值等现象。 针对这些问题初步要查看仪器检测是否正常。参见说明书中检查步骤,对于测定仪核心部件检查;其次要查看曲线是否还在如果现实E10,即可将说明标住的曲线输入即可。如果使
免疫组化技术要点与常见问题
在免疫组化过程中,为了更好的说明问题和查找原因,最好设置阳性对照片(已知的高表达相应抗原的组织)和阴性对照组织片(不加一抗但是加二抗系统/不加任何 抗体两组),所有操作过程应完全一致。 染色弱或者没有染色(按照先后顺序,先排除一些简单的原因):
气相色谱仪的构造和操作要点
气相色谱仪的基本构造有两部分,即分析单元和显示单元。前者主要包括气源及控制计量装 置﹑进样装置﹑恒温器和色谱柱。后者主要包括检定器和自动记录仪。色谱柱(包括固定相)和检定器是气相色谱仪的核心部件。 操作要点 1. 参照所属仪器的说明书摆放好仪器,将有关插头对号入座,接地线要牢固接地。 2.
水准仪的操作要点和校正方法
操作要点 在未知两点间,摆开三脚架,从仪器箱取出水准仪安放在三脚架上,利用三个机座螺丝调平,使圆气泡居中,跟着调平管水准器。水平制动手轮是调平的,在水平镜内通过三角棱镜反射,水平重合,就是水平。将望远镜对准未知点(1)上的塔尺,再次调平管水平器重合,读出塔尺的读数(后视),把望远镜旋转到未知点
离子色谱仪的原理和操作要点
离子色谱是液相色谱的一种,是分析离子的一种液相色谱方法。离子色谱法作为传统的分离分析方法,具有分析速度快、检测灵敏度高、选择性好,能同时分离多种离子并能将一些非离子物质转变成离子性物质进行测定等优点。 离子色谱仪的基本原理:分离的原理是基于离子交换树脂上可离解的离子与流动相中具有相同电荷的溶质离子之
免疫组化的操作规程
实验概要本实验介绍了免疫组化的操作规程。主要试剂1. PBS缓冲液(pH7.2~7.4):NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 4.3mmol/L, KH2PO4 1.4mmol/L。 2. 0.01mol/L柠檬酸盐缓冲液(CB,pH6.0,1000ml):柠檬
免疫组化的操作规程
实验概要本实验介绍了免疫组化的操作规程。主要试剂1. PBS缓冲液(pH7.2~7.4):NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 4.3mmol/L, KH2PO4 1.4mmol/L。 2. 0.01mol/L柠檬酸盐缓冲液(CB,pH6.0,1000ml):柠檬
简介摇床操作技巧
在操作摇床时,需要仔细观察摇床床面的分区和控制适宜的床面纵、横坡度。除此之外,还需要考虑分选过程中的给矿粒度、给矿量、给矿浓度、冲洗水、冲程和冲次等因素。下面我们针对上述几个主要因素,来对摇床的操作技巧进行简单的说明。 1、摇床床面分区 床面分为精矿区、中矿区、尾矿区和矿泥区。正常情况下,矿
上肢血透通路构建的要点及技巧
血透通路选择 对整个血透通路的构建,通常遵循“内瘘第一”的原则,通路的构建部位是先上肢后下肢,先远端后近端,先非惯用侧后惯用侧的原则。教科书上,通常选取的 是距离心脏最远的手掌鼻烟窝区域,但这个区域的桡动脉非常深,头动脉比较浅,手术操作并不十分方便。同时从患者角度出发及美观考量,也并非首选,所以本
浅谈酸蒸馏器操作要点和步骤
酸蒸馏器操作要点: 高纯酸的产酸速率与蒸酸温度有关。位温度的产酸速率约为40ml/hr。蒸酸温度只影响产酸速率,不影响产酸纯度。加热元件加热酸的温度远低于酸的沸点,因此不会产生酸蒸气夹带杂质污染高纯酸的现象。较低的zui高温限制值及内置的保险丝,确保蒸馏过程的安全。在无人值守时使用酸蒸馏器长期蒸酸
浅谈酸蒸馏器操作要点和步骤
高纯酸的产酸速率与蒸酸温度有关。位温度的产酸速率约为40ml/hr。蒸酸温度只影响产酸速率,不影响产酸纯度。加热元件加热酸的温度远低于酸的沸点,因此不会产生酸蒸气夹带杂质污染高纯酸的现象。较低的zui高温限制值及内置的保险丝,确保蒸馏过程的安全。在无人值守时使用酸蒸馏器长期蒸酸时,可使用低档位温度
ELISA的操作要点(二)
六、显色和比色(一) 显色显色是ELISA中的最后一步温育反应,此时酶催化无色的底物生成有色的产物。反应的温度和时间仍是影响显色的因素。在一定时间内,阴性孔可保持无色,而阳性孔则随时间的延长而呈色加强。适当提高温度有助于加速显色进行。在定量测定中,加入底物后的反应温度和时间应按规定力求准确。定性测定
ELISA技术的操作要点
优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,严格遵照规定操
ELISA的操作要点1
优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,严格遵照规定操