用基于荧光的方法来评价细胞的增殖

简介体外监测细胞的增殖对于基础研究和应用研究都极有价值并有潜力应用在临床领域。 3H-thymidine 或 5-bromo-deoxyuridine (BrdU, 胸苷的类似物 ) 掺入法是确定培养细胞的增值率的传统方法,这主要是因为几乎没有更方便的替代方法。因而人们投入了大量的精力来开发一种快速、可重复的用来检测细胞分裂的方法,多数研究最终集中在使用荧光化合物上。然而,现在还没有能够在细胞分裂过程中特异的掺入细胞,并能直接在单细胞水平上检测到的荧光物质。借助流式细胞仪利用荧光标记的抗 BrdU 的抗体来检测在 DNA 合成过程中掺入的 BrdU 的方法可以间接检测快速增值的细胞。 Hoechst 染料也可被用于检测 BrdU 的掺入,因为 BrdU 掺入的地方其荧光信号被淬灭。这种方法也可被用于细胞增值的研究,特别是细胞循环分析中。然而另一种基于 BrdU 的利用荧光监测细胞增殖的方法是通过光裂解法的链断裂诱导。在这个例子中......阅读全文

基于脾气虚的脾阳虚大鼠模型的复制方法及评价...(二)

2 结果2.1  大鼠代谢水平  由表 1 可见,与对照组 P1 比较,模型组 P1 大鼠的体质量、进食量和进水量均下降,该组大鼠出现消瘦和食少;与对照组 P2 比较,模型组 P2 的体质量、肛温、进食量和进水量均减少,该组大鼠出现了消瘦、畏寒和食少,而大便含水率增加,该组大鼠出现便溏;与模

BrdU检测丁细胞和B细胞增殖

基本方案材 料实验动物0.8m g / m l B r d U (Sigma) 水 溶 液(口 服用)或 4m g / m l B r d U P B S 溶 液(注射用)P B S , p H 7. 40.15mo l / L 冰冷的 NaCl冰 冷 的 9 5 % 乙醇多聚甲醛固定液D N A

基于荧光光谱检测的食品安全探讨

  摘要:随着社会经济的发展,人们对生活水平的要求也越来越高,人们的目光逐渐从住所房屋问题聚焦到食品上来。食品工业化程度的高速发展和日愈扩大,近年来所发生的一系列食品安全问题,新的工艺技术及添加剂的广泛使用,滥用各种食品添加剂引发的食品安全事件的报道层出不穷。食品安全不仅仅关系到国民的身体健康和生命

基于RoHS认证的X荧光分析技术实验研究

RoHS指令(《电气、电子设备中限制使用某些有害物质指令》)规定输往欧洲的电子产品及其组件均需对六种有毒成份:铅(Pb)、汞(Hg)、镉(Cd)、六价铬(Cr6+)、多溴联苯(PBBs)、多溴二苯醚(PBDEs)等有害物质加以限制。近几年该指令已在电子电器、质量检测、环保等相关行业广泛实施应用。在多

原代细胞增殖优势纯化方法

  自然纯化是利用某一种类细胞的增殖优势,在长期传代过程中靠自然淘汰法,不断排挤其他生长慢的细胞,靠自然增殖的潜力,最后留下生长优势旺盛的细胞,达到细胞纯化的目的。但这种方法常无法按照需要和实验要求及研究目的来选择细胞。此法花费时间长,留下的往往是成纤维细胞。仅有那些恶变的肿瘤细胞或突变的细胞可以通

常见细胞增殖检测方法总结

细胞增殖是生物体的重要生命特征,细胞以分裂的方式进行增殖。单细胞生物,以细胞分裂的方式产生新的个体。多细胞生物,以细胞分裂的方式产生新的细胞,用来补充体内衰老或死亡的细胞;同时,多细胞生物可以由一个受精卵,经过细胞的分裂和分化,最终发育成一个新的多细胞个体。必须强调指出,通过细胞分裂,可以将复制的遗

BrdU标记法检验细胞增殖

1、细胞以1.5×105 /ml细胞数接种于直径35ml培养皿中(内放置一盖玻片),培养1天,用含0.4%FCS培养液同步化3天,使绝大多数细胞处于G0 期。 2、终止细胞培养前,加入BrdU(终浓度为30μg/L),37℃,孵育40min。 3、弃培养液,玻片用PBS洗涤3次。 4、甲

细胞活性检测代谢增殖测定

MTT检测法活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶,能使额外添加的MTT还原为不溶于水的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan),并沉积在细胞中,死细胞则无此现象。接着用二甲基亚砜(DMSO)溶解沉积在细胞中的甲瓒后,可利用酶标仪490nm波长测光吸收值,依据吸光值(OD值)计算出活细胞数量。在一定细胞数范围内,吸

细胞增殖生长方面实验

细胞计数法 细胞分裂指数法 接种存活率和克隆形成率法 流式细胞仪检测细胞周期时相和DNA合成法             实验方法原理 细胞计数法:细胞计

怎样阻止肝癌细胞增殖

你好,根据提供的情况,癌症治疗中的放疗和化疗主要目的是杀死癌细胞,当癌细胞被全部杀死后,自然就不会无限增殖了。 但现在所谓的放疗和化疗,在杀死癌细胞的同时,也会杀死机体正常的细胞,从而出现一系列的临床表现,例如恶心、呕吐,贫血或者掉头发等。所以说放疗和化疗可以阻止癌细胞无限增殖,但其主要作用还是以杀

常见细胞增殖检测方法总结

细胞增殖是生物体的重要生命特征,细胞以分裂的方式进行增殖。单细胞生物,以细胞分裂的方式产生新的个体。多细胞生物,以细胞分裂的方式产生新的细胞,用来补充体内衰老或死亡的细胞;同时,多细胞生物可以由一个受精卵,经过细胞的分裂和分化,最终发育成一个新的多细胞个体。必须强调指出,通过细胞分裂

人体细胞增殖与死亡

  细胞增殖  细胞增殖是机体生长发育的基础,是通过细胞分裂的形式实现的。人类的细胞分裂主要包括有丝分裂和减数分裂。有丝分裂是人类体细胞的主要分裂方式,减数分裂是人类生殖细胞的分裂方式。[4]  细胞衰老与死亡  细胞衰老主要表现为对环境变化适应能力的降低和维持细胞内环境恒定能力的降低不仅形态学结构

细胞增殖检测:MTT法心得

MTT实验是检测细胞活力的实验方法,由于细胞活力与细胞数呈正相关,因此也常常用来检测细胞的增殖情况。一、MTT的原理活细胞有琥珀酸脱氢酶,将MTT还原成棕褐色沉淀。由于一般介绍园子里已经很多,笔者将自己的心得按照实验流程与大家交流交流。二、MTT法检测细胞增殖实验的注意事项1、培养好细胞点板养细胞没

细胞增殖生长方面实验

细胞计数法 细胞分裂指数法 接种存活率和克隆形成率法 流式细胞仪检测细胞周期时相和DNA合成法             实验方法原理 细胞计数法:细胞计

T-淋巴细胞增殖实验

实验步骤基 本 方 案 1 未 致 敏 T 淋巴细胞的活化材 料备选方案1 用抗体激活未致敏的T 细胞这种方法适用于当抗C D 3/T C R 复合物抗体不能有效结合小鼠辅助细胞上的F c 受体 ,或其可溶形式不能有效活化T 细胞时。值得注 意 的 是 ,在 某 种 抗 体(如 抗 G 7、Thy-

浆细胞的增殖和分化是如何发生的?

  抗原识别:当外来抗原(如细菌、病毒或其他病原体)进入人体后,它们会被免疫系统的抗原呈递细胞捕获并呈现给B淋巴细胞。B淋巴细胞通过其表面的B细胞受体(BCR)识别并结合到特定的抗原。  T细胞辅助:在多数情况下,B淋巴细胞的激活和分化需要T细胞的辅助。CD4+ T细胞通过识别与MHCⅡ分子结合的抗

关于细胞增殖有丝分裂的周期变化的介绍

  细胞分裂期 在细胞分裂期,最明显变化是细胞核中染色体的变化。人们为了研究方便,把分裂期分为四个时期:前期,中期,后期,末期。其实,分裂期的各个时期的变化是连续的,并没有严格的时期界限。  前期  细胞分裂的前期,最明显的变化是细胞核中出现染色体。分裂间期复制的染色体,由于螺旋缠绕在一起,逐渐缩短

关于细胞增殖的减数分裂的介绍

  是一种特殊方式有丝分裂,它与有性生殖细胞的形成有关。它是进行有性生殖的生物,在原始的生殖细胞(如动物的精原细胞或卵原细胞)发展为成熟的生殖细胞(精子或卵细胞)的过程中,要经过减数分裂。在整个减数分裂过程中,染色体只复制一次,而细胞连续分裂两次。减数分裂的结果是,新产生的生殖细胞中的染色体数目,比

治疗组织细胞增殖症的相关介绍

  单发病变者搔刮即可达到治愈目的。如病变较大可在彻底搔刮后植骨,也可给予小剂量放射治疗(3~6Gy)。儿童的脊椎骨病变,经放射治疗后,扁平椎高度可有不同程度恢复,放射治疗可能损伤骨髓,采用时应慎重考虑。黄色瘤病婴儿恶性网织细胞增生症采用放射治疗,使颅骨破坏区修复并硬化,照射眼眶部,使突出眼球退缩;

细胞增殖信号通路MTOR基因的临床解释

雷帕霉素(mTOR)的哺乳动物靶标,也称为雷帕霉素和FK506结合蛋白12-雷帕霉素相关蛋白1(FRAP1)的机制靶标,是人类中由MTOR基因编码的激酶。 mTOR是蛋白激酶的磷脂酰肌醇3-激酶相关激酶家族的成员。 mTOR与其他蛋白质结合,并作为两种不同蛋白质复合物的核心成分,mTOR复合物1和m

细胞增殖信号通路ARAF基因的临床解释

丝氨酸/苏氨酸 - 蛋白激酶A-Raf或简称A-Raf是人类中由ARAF基因编码的酶。[5] A-Raf是丝氨酸/苏氨酸特异性蛋白激酶的Raf激酶家族的成员。 与该家族的其他成员(Raf-1和B-Raf)相比,对A-Raf知之甚少。它似乎具有其他同种型的许多特性,但其生物学功能尚未得到彻底研究。所有

细胞增殖信号通路GNAS基因的临床解释

GNAS作为一个重要的信号转导蛋白,主要功能是在G蛋白偶联受体信号转导途径中,激活腺苷酸环化酶,导致cAMP水平的升高,参与调控细胞生长和细胞分裂。

细胞增殖信号通路DAXX基因的临床解释

该基因编码一种多功能蛋白质,位于细胞核和细胞质的多个位置。它与多种蛋白质相互作用,如凋亡抗原fas、着丝粒蛋白c和转录因子红细胞增多症病毒e26癌基因同源物1。在细胞核中,编码的蛋白质作为一种与sumoylated转录因子结合的有效转录抑制因子发挥作用。它的抑制作用可以通过将这种蛋白质固定在早幼粒细

细胞增殖信号通路MTOR基因的临床解释

雷帕霉素(mTOR)的哺乳动物靶标,也称为雷帕霉素和FK506结合蛋白12-雷帕霉素相关蛋白1(FRAP1)的机制靶标,是人类中由MTOR基因编码的激酶。 mTOR是蛋白激酶的磷脂酰肌醇3-激酶相关激酶家族的成员。 mTOR与其他蛋白质结合,并作为两种不同蛋白质复合物的核心成分,mTOR复合物1和m

细胞增殖信号通路GNAQ基因的临床解释

GNAQ基因所编码的蛋白属于鸟嘌呤核苷酸结合蛋白(G蛋白)的家族,GNAQ与GNA11形成的复合物为G蛋白α亚基,这两个基因调控细胞分裂,增强MEK(有丝分裂原活化蛋白激酶的激酶)蛋白活性,在80%的葡萄膜黑色素瘤病人中发现GNA11和GNAQ基因的突变,其机制为基因突变导致MEK的异常激活,目前正

细胞增殖信号通路RARA基因的临床解释

这个基因代表一个核维甲酸受体。编码蛋白视黄酸受体α以配体依赖的方式调节转录。该基因参与调控时钟基因的发育、分化、凋亡、颗粒变性和转录。这个位点和其他几个位点之间的易位与急性早幼粒细胞白血病有关。另外,已经发现了这个位点的剪接转录变体。

细胞增殖信号通路MYC基因的临床解释

该基因编码的蛋白质是一种多功能的核磷蛋白,在细胞周期进展、凋亡和细胞转化中起到作用。作为调节特定靶基因转录的转录因子发挥作用。这种基因的突变、过度表达、重排和易位与多种造血肿瘤、白血病和淋巴瘤,包括伯基特淋巴瘤有关。有证据表明,来自上游、非aug(cug)帧和下游aug起始位点的选择性翻译起始导致两

Cell子刊揭秘癌细胞增殖的背后

  失去控制及持续性的细胞分裂是癌症的一个标志。一种特异的过度活化蛋白质与这一功能障碍有关。来自洛桑联邦理工学院的科学家们发现了在健康细胞中调控这一蛋白质活性的复杂机制。研究论文发表在8月8日的《分子细胞》(Molecular Cell)杂志上。   肿瘤学家们将焦点放在了STAT3蛋白上,其

细胞增殖信号通路SRC基因的临床解释

SRC基因编码的蛋白属于SRC家族激酶(SFKs),该家族由9个成员组成,分别是SCR、LYN、FYN、LCK、HCK、FGR、BLK、YRK和YES,其中SRC是目前研究最多的成员,也是与人类疾病联系最为密切的蛋白。SRC蛋白是非受体酪氨酸激酶,可被多条信号转导途径所激活,而激活后的SRC激酶又通