分子杂交技术(四)
六、核酸分子杂交实验因素的优化 (一)探针的选择 根据不同的杂交实验要求,应选择不同的核酸探针。在大多数情况下,可以选择克隆的DNA或cDNA双链探针。但是在有些情况下,必须选用其它类型的探针如寡核苷酸探针和RNA探针。例如,在检测靶序列上的单个碱基改变时应选用寡核苷酸探针,在检测单链靶序列时应选用与其互补的DNA单链探针(通过克隆人M13噬菌体DNA获得)或RNA探针,寡核苷酸探针也可。长的双链DNA探针特异性较强,适宜检测复杂的靶核苷酸序列和病原体,但不适宜于组织原位杂交,因为它不易透过细胞膜进入胞内或核内。在这种情况下,寡核苷酸探针和短的PCR标记探针(80~150bp)具有较大的优越性。 在选用探针时经常会受到可利用探针种类的限制。如在建立DNA文库时,手头没有筛选特定基因的克隆探针,这时就可用寡核苷酸探针来代替。但必须首先纯化该基因的编码蛋白,并测定6个以上的末端氨基酸序列,通过反推的核苷酸序列合成一套寡核苷酸探......阅读全文
核酸分子杂交技术的基本原理
由于核酸分子杂交的高度特异性及检测方法的灵敏性,它已成为分子生物学中最常用的基本技术,被广泛应用于基因克隆的筛选,酶切图谱的制作,基因序列的定量和定性分析及基因突变的检测等。 具有一定同源性的两条核酸单链在一定的条件下(适宜的温室度及离子强度等)可按碱基互补还原成双链。杂交的双方是待测核酸序列
分子杂交仪原理
分子杂交仪其基本原理就是应用核酸分子的变性和复性的性质,使来源不同的DNA(或RNA)片段,按碱基互补关系形成杂交双链分子(heteroduplex)。杂交双链可以在DNA与DNA链之间,也可在RNA与DNA链之间形成。核酸分子杂交是基因诊断的最基本的方法之一。它的基本原理是:互补的DNA单链能够在
概述/分子杂交仪
分子杂交仪又称“分子杂交炉”或“分子杂交箱”根据不同实验的需要可以选择不同的规格型号的杂交仪。是现代实验室采用杂交技术的理想设备,可替代塑料杂交袋和水浴摇床,并避免杂交袋破损带来污染危险。杂交炉采用微机控温精确,炉内空气循环装置设计独特,升温速度快等特点。 广泛地使用于克隆基因的筛选、酶切
DNA分子杂交原理
DNA分子杂交的原理是,具有互补碱基序列的DNA分子,可以通过碱基对之间形成氢键等,形成稳定的双链区.如果两DNA有一段相同碱基的话,就能形成氢键,且形成稳定的双链区
分子杂交仪简介
分子杂交仪(又名:分子杂交箱、分子杂交炉)广泛地使用于克隆基因的筛选、酶切图谱的制作、基因组中特定基因序列的定性、定量检测和疾病的诊断等方面。因而它不仅在分子生物学领域中具有广泛地应用,而且在临床诊断上的应用也日趋增多。 分子杂交仪又称“分子杂交炉”或“分子杂交箱”根据不同实验的需要可以选择不
分子杂交的分类
分子杂交基因探针根据标记方法不同可粗分为放射性探针和非放射性探针两大类,根据探针的核酸性质不同又可分为DNA探针,RNA探针,cDNA探针,cRNA探针及寡核苷酸探针等几类,DNA探针还有单链和双链之分。下面分别介绍这几种探针。DNA探针DNA探针是最常用的核酸探针,指长度在几百碱基对以上的双链DN
分子杂交方式介绍
1、固相杂交将参加反应的一条核酸链先固定在固体支持物上,一条反应核酸游离在溶液中。固体支持物有硝酸纤维素滤膜、尼龙膜、乳胶颗粒、磁珠和微孔板等。由于固相杂交后,未杂交的游离片段可容易地漂洗除去,膜上留下的杂交物容易检测和能防止靶DNA自我复性等优点,所以最为常用。常用的固相杂交类型有:菌落原位杂交、
原理/分子杂交仪
分子杂交仪其基本原理就是应用核酸分子的变性和复性的性质,使来源不同的 DNA(或RNA)片段,按碱基互补关系形成杂交双链分子(heteroduplex)。杂交双链可以在DNA与DNA链之间,也可在RNA与DNA链之间形成。 核酸分子杂交是基因诊断的最基本的方法之一。它的基本原理是:互补的DNA单链能
分子杂交仪概述
分子杂交仪又称“分子杂交炉”或“分子杂交箱”根据不同实验的需要可以选择不同的规格型号的杂交仪。是现代实验室采用杂交技术的理想设备,可替代塑料杂交袋和水浴摇床,并避免杂交袋破损带来污染危险。杂交炉采用微机控温精确,炉内空气循环装置设计独特,升温速度快等特点。广泛地使用于克隆基因的筛选、酶切图谱的制作、
分子杂交方式介绍
1、固相杂交将参加反应的一条核酸链先固定在固体支持物上,一条反应核酸游离在溶液中。固体支持物有硝酸纤维素滤膜、尼龙膜、乳胶颗粒、磁珠和微孔板等。由于固相杂交后,未杂交的游离片段可容易地漂洗除去,膜上留下的杂交物容易检测和能防止靶DNA自我复性等优点,所以最为常用。常用的固相杂交类型有:菌落原位杂交、
分子杂交仪概述
分子杂交仪又称“分子杂交炉”或“分子杂交箱”根据不同实验的需要可以选择不同的规格型号的杂交仪。是现代实验室采用杂交技术的理想设备,可替代塑料杂交袋和水浴摇床,并避免杂交袋破损带来污染危险。杂交炉采用微机控温精确,炉内空气循环装置设计独特,升温速度快等特点。 广泛地使用于克隆基因的筛选、酶切图谱
分子杂交RNA探针的技术特点及应用介绍
在DNA序列未知而必须首先进行克隆以便绘制酶谱和测序时,也常应用克隆。克隆探针一般较寡核苷酸探针特异性强,复杂度也高,从统计学角度而言,较长的序列随机碰撞互补序列的机会较短序列少,克隆探针的另一优点是,可获得较强的杂交信号,因为克隆探针较寡核苷酸探针掺入的可检测标记基因更多。但是,较长的探针对于靶序
简述核酸分子杂交技术的基本原理
具有一定同源性的两条核酸单链在一定的条件下(适宜的温室度及离子强度等)可按碱基互补还原成双链。杂交的双方是待测核酸序列及探针(probe),待测核酸序列可以是克隆的基因征段,也可以是未克隆化的基因组DNA和细胞总RNA。核酸探针是指用放射性核素、生物素或其他活性物质标记的,能与特定的核酸序列发生
分子杂交RNA探针的技术特点及应用介绍
RNA探针是一类很有前途的核酸探针,由于RNA是单链分子,所以它与靶序列的杂交反应效率极高。早期采用的RNA探针是细胞mRNA探针和病毒RNA探针,这些RNA是在细胞基因转录或病毒复制过程中得到标记的,标记效率往往不高,且受到多种因素的制约。这类RNA探针主要用于研究目的,而不是用于检测。例如,在筛
分子杂交CDNA探针的技术特点及应用介绍
cDNA(complementary DNA)是指互补于mRNA的DNA分子。cDNA是由RNA经一种称为逆转录酶(reversetranscriptase)的DNA聚合酶催化产生的,这种逆录酶是Temin等在70年代初研究致癌RNA病毒时发现的。该酶以RNA为模板,根据碱基配对原则,按照RNA的核
关于分子杂交技术的基本原理介绍
分子杂交的基本原理是根据双链DNA经高温解链成两条互补的单链,降温后又可恢复原来的双链。两条不同的单链分子可根据碱基配对的原则,只要它们的碱基序列同源或部分同源,即可全部或部分复性,此称核酸杂交。用来探测DNA的已知互补片段称为DNA探针,通常是应用已预先经放射性标记或非放射性标记的DNA单链来
分子杂交仪产品特点
分子杂交仪是现代实验室采用杂交技术的理想设备,可替代塑料杂交袋和水浴摇床,并避免杂交袋破损带来污染危险。杂交炉采用微机控温精确,炉内空气循环装置设计独特,升温速度快等特点。广泛地使用于克隆基因的筛选、酶切图谱的制作、基因组中特定基因序列的定性、定量检测和疾病的诊断等方面。因而它不仅在分子生物学领域中
分子杂交仪产品特点
分子杂交仪是现代实验室采用杂交技术的理想设备,可替代塑料杂交袋和水浴摇床,并避免杂交袋破损带来污染危险。杂交炉采用微机控温,炉内空气循环装置设计独特,升温速度快等特点。广泛地使用于克隆基因的筛选、酶切图谱的制作、基因组中特定基因序列的定性、定量检测和疾病的诊断等方面。因而它不仅在分子生物学领域中具有
分子杂交仪的特点
1. 分子杂交仪是现代实验室采用杂交技术的理想设备,可替代塑料杂交袋和水浴摇床,并避免杂交袋破损带来污染危险。 2. 杂交炉具有微机控温精确,炉内空气循环装置设计独特,升温速度快等特点。 3. 采用微电脑智能控制,液晶显示三种功能(温度显示、瓶架旋转速度、托盘摆动速度)。 4. 具有存储记
分子杂交的实验原理
分子杂交是通过配对碱基对之间的非共价键(主要是氢键)结合,从而形成稳定的双链区。杂交分子的形成并不要求两条单链的碱基顺序完全互补,所以不同来源的核酸单链只要彼此之间有一定程度的互补顺序(即某种程度的同源性)就可以形成杂交双链。分子杂交可在DNA与DNA、RNA与RNA或RNA与DNA的二条单链之间进
分子杂交仪相关叙述
原位分子杂交,斑点分子杂交,所用的分子杂交箱是振荡式的摇床分子杂交箱;Southern、Northern、Western杂交,所用的杂交仪是旋子式杂交仪,仪器采用独特的滚动式反应架装置,配套特制密封杂交管在水平轴上旋转,使杂交管内壁上的杂交反应膜各处能均匀地杂交液反复地接触,充分反应。 功能能
分子杂交仪的定义
分子杂交仪(又名:分子杂交箱、分子杂交炉)广泛地使用于克隆基因的筛选、酶切图谱的制作、基因组中特定基因序列的定性、定量检测和疾病的诊断等方面。因而它不仅在分子生物学领域中具有广泛地应用,而且在临床诊断上的应用也日趋增多。
分子杂交仪的分类
1. 分子杂交仪的种类较多,根据实验的需求,可以分为6大类: 1) 用于大容量的分子杂交仪。 2) 用于 Southern或者 Northern技术点杂交的杂交仪。 3) 用于小容量的核酸杂交仪。 4) 微孔板原位杂交仪。 5) 载玻片原位杂交和平板杂交仪。 6) Western杂交
分子杂交仪的原理
分子杂交仪其基本原理就是应用核酸分子的变性和复性的性质,使来源不同的DNA(或RNA)片段,按碱基互补关系形成杂交双链分子(heteroduplex)。杂交双链可以在DNA与DNA链之间,也可在RNA与DNA链之间形成。 核酸分子杂交是基因诊断的最基本的方法之一。它的基本原理是:互补的DNA单
分子杂交仪的类型
分子杂交仪 Hybridization Oven 根据实验的需求,可以将分子杂交仪分为5大类。 1、是用于大容量的分子杂交仪; 2、用于Southern或者Northern技术点杂交的杂交仪; 3、用于小容量的核酸杂交仪; 4、微孔板原位杂交仪; 5、载玻片原位杂交和平板杂交仪;
分子杂交仪的概述
分子杂交仪又称“分子杂交炉”或“分子杂交箱”根据不同实验的需要可以选择不同的规格型号的杂交仪。是现代实验室采用杂交技术的理想设备,可替代塑料杂交袋和水浴摇床,并避免杂交袋破损带来污染危险。杂交炉采用微机控温精确,炉内空气循环装置设计独特,升温速度快等特点。 广泛地使用于克隆基因的筛选、酶切图谱
分子杂交的原理分析
BILON品牌的FYY系列分子杂交仪号:200520070121X。该仪器采用微电脑智能控制,液晶显示三种功能:温度显示、瓶架旋转速度、托盘摆动速度。具有存储记忆功能,可以直观显示系统的运行状况。温度控制采用数字PID技术,输出采用PWM方式,控温精度高,稳定性好,并设有超温保护装置。该仪器可以同时
分子杂交仪的概述
分子杂交仪又称“分子杂交炉”或“分子杂交箱”根据不同实验的需要可以选择不同的规格型号的杂交仪。是现代实验室采用杂交技术的理想设备,可替代塑料杂交袋和水浴摇床,并避免杂交袋破损带来污染危险。杂交炉采用微机控温精确,炉内空气循环装置设计独特,升温速度快等特点。 广泛地使用于克隆基因的筛选、酶切图谱
分子杂交仪的类型
分子杂交仪 Hybridization Oven 根据实验的需求,可以将分子杂交仪分为5大类。 1、是用于大容量的分子杂交仪; 2、用于Southern或者Northern技术点杂交的杂交仪; 3、用于小容量的核酸杂交仪; 4、微孔板原位杂交仪; 5、载玻片原位杂交和平板杂交仪;
分子杂交仪的原理
分子杂交仪(又名:分子杂交箱、分子杂交炉)广泛地使用于克隆基因的筛选、酶切图谱的制作、基因组中特定基因序列的定性、定量检测和疾病的诊断等方面。因而它不仅在分子生物学领域中具有广泛地应用,而且在临床诊断上的应用也日趋增多。原理分子杂交仪其基本原理就是应用核酸分子的变性和复性的性质,使来源不同的DNA(