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选择3~5轮后，随机挑取克隆加入96孔微量滴定板中 并诱导表达可溶性scFv.然后，在包被有相关抗原的96孔微量滴定板中，用ELISA分析含有可溶性scFv的细菌上清。此过程可以识别出那些结合了抗原的scFv.但即便采用上述严谨性选择后，ELISA阳性克隆中仅有部分克隆的亲和力比野生型高。ELISA信号强度不能很好地显示哪个克隆具有较低的Ka值，而且更为普 遍的是它与scFv表达水平相关。因此，这就需要一种筛选ELISA阳性克隆的技术，能识别出具有较低Ka值的克隆。竞争性或抑制性ELISA就是这样的技术。或者可以利用以下事实：koff降低一般是导致高亲和力提高的主要动力学机制，因此通过测定解离速率就可以识别出那些亲和力得到提高的抗体。因为κoff是非浓度依赖的（不同于kon,），所以无需纯化抗体片段就能测定κoff，比如采用类似BIAcore的仪器进行SRP分析。我们已发现这是鉴别高亲和力scPv的一项很有用......阅读全文
3.受体-特异配体亲和层析用一般的亲和标签富集受体之后，可能需要第二步纯化以分离到纯净、有功能的受体蛋白。这主要是因为：①第一步纯化得到的受体还不够纯, 仍有其他污染物。例如，用 XAaxanthineamineC0ngener，拮抗剂）层析柱纯化腺苷受体可去除其中的一个主要污染物 (Wei
3月29日-4月3日，2019年美国癌症研究协会（AACR）年会在美国亚特兰大举行。根据公开信息，百济神州、和记黄埔医药、基石药业、亚盛医药、依生生物等国内创新药公司纷纷亮相AACR年会，并公布了他们最新的药物临床研究进展。 百济神州：替雷利珠单抗 4月1日，百济神州在AACR年会上公布了其
上海科技大学iHuman研究所与中国科学院生物物理研究所联合研究团队在《细胞》（Cell）杂志上发表了一篇关于人源大麻素受体（human Cannabinoid Receptor 1， CB1，以下简称CB1）新的研究成果。 CB1主要位于脑、脊髓与外周神经系统中，又称中枢型大麻素受体。一直以
你有没有从抗体供应商那里订购过抗体？ 你遇到过抗体特异性，选择性和重复性出问题吗？ 你是否曾将抗体退回给供应商，却收到另一份劣质产品吗？ 如果你对上述问题的回答是肯定的，那么你也遭受过“坏”抗体的毒害。据估计，所有购买的抗体中约有50％是“坏的”，仅在美国就浪费了约3.
纯化受体从概念上可以分成两步: 第一步用合适的去污剂将受体从膜中提取出来 (增溶）; 第二步使用如常规的亲和标签、与该受体特异结合的配体层析柱、分子排阻色谱和其他方法纯化受体。最重要的是，必须注意选择实验条件以保持膜蛋白在整个纯化过程中处于活性状态。这一点怎么强调也不过分，因为很多 GPCR—旦被去
1.PCR反应的最适条件4．1 TaqDNA聚合酶在早期进行的PCR反应中，使用的是大肠杆菌DNA聚合酶1的大片段，，即Klenow片段。也曾有人用噬菌体T4 DNA聚合酶。这两种酶的共同弱点是对热不稳定性，DNA合成反应只能在370C进行。PCR时每一循环的解链温度都在90C以上进行，故在每两个循
在PCR反应中，毫无疑问的DNA聚合酶是最关键的因素。PCR最初使用的DNA聚合酶是大肠杆菌DNA聚合酶 I的Klenow片段。但该酶存在很多缺陷，使之不能广为应用，比如：热稳定性差，每次DNA热变性后大部分酶都被灭活，需要重新加入，每个循环都要重新加入；Klenow酶反应温度较低，引物和模板容易形
实验概要一种比较详细的PCR技术实验原理1. TaqDNA聚合酶在早期进行的PCR反应中，使用的是大肠杆菌DNA聚合酶1的大片段，即Klenow片段。也曾有人用噬菌体T4 DNA聚合酶。这两种酶的共同弱点是对热不稳定性，DNA合成反应只能在37°C进行。PCR时每一循环的解链温度都
SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳技术首先在1967年由Shapiro建立，1969年由weber和Osborn进一步完善。主要用于（1）蛋白质的分离（2）蛋白质的纯化。实验方法原理蛋白质在十二烷基硫酸钠（SDS）和巯基乙醇的作用下，分子中的二硫键还原，氢键等打开，形成按1.4 g SDS/1 g蛋白质比例的
几乎所有蛋白质电泳分析都在聚丙烯酰胺凝胶上进行，而所有条件总要确保蛋白质解离成单个多肽亚基并进可能减少其相互间的聚集，最常用的就是SDS-PAGE电泳技术，关于大家在此过程中经常遇到的问题进行一些讨论： Q：SDS-PAGE电泳的基本原理? A：SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，是在聚丙烯酰胺凝胶
Q：SDS-PAGE电泳的基本原理? A：SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进SDS(十二烷基硫酸钠)，SDS会与变性的多肽，并使蛋白带负电荷，由于多肽结合SDS的量几乎总是与多肽的分子量成正比而与其序列无关，因此SDS多肽复合物在丙稀酰胺凝胶电泳中的迁移率只与多肽的大小有
SDS-PSGE 实验方法原理 蛋白质在十二烷基硫酸钠（SDS）和巯基乙醇的作用下，分子中的二硫
1. 配胶缓冲液系统对电泳的影响？ 在SDS－PAGE不连续电泳中，制胶缓冲液使用的是Tris－HCL缓冲系统，浓缩胶是pH6.7，分离胶pH8.9；而电泳缓冲液使用的Tris－甘氨酸缓冲系统。在浓缩胶中，其pH环境呈弱酸性，因此甘氨酸解离很少，其在电场的作用下，泳动效率低；而CL离子却很
在SDS－PAGE不连续电泳中，制胶缓冲液使用的是Tris－HCL缓冲系统，浓缩胶是pH6.7，分离胶pH8.9；而电泳缓冲液使用的Tris－甘氨酸缓冲系统。在浓缩胶中，其pH环境呈弱酸性，因此甘氨酸解离很少，其在电场的作用下，泳动效率低；而CL离子却很高，两者之间形成导电性较低的区带，蛋白分子就介
根据浆料的表观粘度与剪切速率的关系，常把浆料分成三种，分别是剪切稀化型、剪切稠化型和牛顿型流体。锂离子电池生产中最常见的浆料属于剪切稀化型，即Casson型，表观粘度随剪切速率的增大而减小。浆料剪切稀化是由于浆体中存在着团聚的粒子。当浆料中的粒子较细时，易产生局部团聚。粒子团聚程度与浆料的粘度相关。
温度滴定理论 温度滴定是基于滴定剂（浓度已知）和被滴定物（浓度未知）之间化学反应的温度变化速率而确定滴定过程中被滴定物的终点。因为其理论根据是溶液的温度变化，所以无需知道溶液的绝对温度。用一个简单的含有热敏电阻的探头监测溶液温度，根据曲线上的拐点或弯曲确定终点。 1.
摘要：基于表面等离子体共振的生物传感器是一种非标记的，实时生物分子相互作用检测工具。由于技术的限制，早先的SPR技术采用顺序分析的方式。现在，最新一代的SPR仪采用平行分析的方式，单次进样就可以测定1－6对相互作用的动力学。与传统技术相比，平行分析具有数据质量好、基线联动和通量高的优点。表面等离子体
近日，中科院煤化所与国内多家科研机构合作，采用铂-碳化钼双功能催化剂实现对水和甲醇的高效活化，在低温下获得了极高的产氢效率。此催化体系有望作为下一代高效储放氢新体系得到应用。 氢能是一种公认的高热值清洁能源，高位发热值是汽油发热值的3倍，也被称为“能源货币”。氢燃料电池是当前最具潜力的新一代氢
当前乃至30-50年内经济和社会的发展仍以碳基为主的能源消费结构为基础，而该能源结构导致的环境污染和生态文明建设之间的矛盾愈发凸显，实现含碳资源高效清洁转化利用是当前解决这些矛盾的重要途径之一。而未来，人类将面向以低碳与无碳能源经济为基础的可持续能源结构，特别是以氢能为主的能源体系新结构。其中氢
近日，中国科学院大连化学物理研究所光电材料动力学创新特区研究组研究员吴凯丰团队采用三脉冲飞秒瞬态吸收光谱，以量子限域的纳米棒-金属异质结作为模型体系，揭示了纳米尺度多电荷转移中的库仑势垒和效率瓶颈。 多电荷转移过程在自然光合作用和人工光催化体系普遍存在。由于材料的光吸收截面和激发光源的光子通量
8月1日，国际学术期刊《物理化学快报》（The Journal of Physical Chemistry Letters）在线发表了中国科学技术大学生命科学学院及微尺度物质科学国家实验室龙冬课题组与中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所许琛琦研究组的最新合作研究成果Probin
实验目的：1 进一步理解毛细管电泳的基本原理；2 熟悉毛细管电泳仪器的构成；3 了解影响毛细管电泳分离的主要操作参数。实验原理：1．电泳淌度毛细管电泳（CE）是以电渗流 (EOF)为驱动力，以毛细管为分离通道，依据样品中组分之间淌度和分配行为上的差异而实现分离的一种液相微分离技术。离子在自由溶液中的
完整RNA 的提取和纯化，是进行RNA 方面的研究工作，如Nothern杂交、mRNA 分离、RT-PCR、定量PCR、cDNA合成及体外翻译等的前提。所有ＲＮＡ的提取过程中都有五个关键点，即１）：样品细胞或组织的有效破碎；２），有效地使核蛋白复合体变性；３），对内源ＲＮＡ酶的有效抑制；４）
总RNA提取可以：（1）获得高纯度、高质量的总RNA；（2）可以满足生物学下游实验Northern Blot、核酸酶保护实验、RT-PCR、qRT-PCR 和阵列分析所需。实验方法原理一些公司推出的总RNA 提取试剂盒，可以用来制备高质量的可用于建库的RNA 。该总RNA 纯化系统采用两种著名的RN
实验方法原理 一些公司推出的总RNA 提取试剂盒，可以用来制备高质量的可用于建库的RNA 。该总RNA 纯化系统采用两种著名的RNA 酶抑制剂，异硫氰酸弧(GTC)和β-巯基乙醇
完整RNA的提取和纯化,是进行RNA方面的研究工作,如Nothern杂交、mRNA分离、RT-PCR、定量PCR、cDNA合成及体外翻译等的前提。所有ＲＮＡ的提取过程中都有五个关键点，即１）：样品细胞或组织的有效破碎；２），有效地使核蛋白复合体变性；３），对内源ＲＮＡ酶的有效抑制；４）有
原子吸收光谱仪是一种常用的分析仪器，可测定多种元素，火焰原子吸收光谱法可测到10-9g/mL数量级，石墨炉原子吸收法可测到10-13g/mL数量级。今天我们就来具体介绍一下原子吸收光谱仪运行中四大干扰效应，希望可以帮助用户更好的应用产品。一、干扰效应原子吸收光谱分析中，干扰效应按其性质和产生的原因，
原子吸收光谱可测定多种元素，火焰原子吸收光谱法可测到10-9g/mL数量级，石墨炉原子吸收法可测到10-13g/mL数量级。其氢化物发生器可对8种挥发性元素汞、砷、铅、硒、锡、碲、锑、锗等进行微痕量测定。 一、干扰效应 原子吸收光谱分析中，干扰效应按其性质和产生的原因，可以分为四类：
原子吸收光谱仪是一种常用的分析仪器，可测定多种元素，火焰原子吸收光谱法可测到10-9g/mL数量级，石墨炉原子吸收法可测到10-13g/mL数量级。今天我们就来具体介绍一下原子吸收光谱仪运行中四大干扰效应，希望可以帮助用户更好的应用产品。一、干扰效应原子吸收光谱分析中，干扰效应按其性质和产生的原因，
原子吸收光谱仪是一种常用的分析仪器，可测定多种元素，火焰原子吸收光谱法可测到10-9g/mL数量级，石墨炉原子吸收法可测到10-13g/mL数量级。今天我们就来具体介绍一下原子吸收光谱仪运行中四大干扰效应，希望可以帮助用户更好的应用产品。一、干扰效应原子吸收光谱分析中，干扰效应按其性质和产生的原因，