ATCC细胞冷冻及解冻方法
一、细胞冷冻保存1、材料:生长良好之培养细胞、新鲜培养基、DMSO(Sigma D-2650)、无菌塑料冷冻保存管(Nalgene 5000-0020)、0.4%(w/v)trypan blue(GibcoBRL15250-061)、血球计数盘与盖玻片、等速降温机(KRYO10SeriesII)。2、冷冻保存方法:(1)传统方法:冷存管置于4℃10分钟→ -20℃30分钟→ -80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。-20℃不可超过1小时,以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中,惟存活率稍微降低一些。 (2)程序降温:利用已设定程序的等速降温机以-1~-3℃/分钟之速度由室温降至(-80℃以下)-120℃,再放在液氮槽vaporphase长期储存。适用于悬浮型细胞与hybridoma之保存。 3、步骤: (1)冷冻前一日前更换半量或......阅读全文
病毒的超低温保存方法
大多数微生物可用超低温保存,超低温保存法是适用范围最广的微生物保存法。需要复杂营养的微生物种,如用其他的贮存方法不能保持其活力(如植物的病原性真菌),通常可用超低温的方法保存(ATCC 1983;Halliday,Baker 1985)。此法是将冻存在小管或安瓿里的细胞以较慢的冷冻速率(1℃
细胞培养过程常见问题
1.为什么培养的细胞要及时传代? 答:体外培养的细胞大多具有生长接触抑制的特性,也就是说当一个细胞被其他细胞包围的时候,它就会停止生长,及时传代后,细胞的生长得以继续。2.培养液pH下降很快可能原因有哪些?其解决办法是什么? 答:通常细胞生长得非常快时,pH值通常下降得很快。此时可以及时
细胞冷冻保存的方法
1、材料:生长良好之培养细胞、新鲜培养基、DMSO(Sigma D-2650)、无菌塑料冷冻保存管(Nalgene 5000-0020)、0.4%(w/v)trypan blue(GibcoBRL15250-061)、血球计数盘与盖玻片、等速降温机(KRYO10SeriesII)。2、冷冻保存方法:
冷冻保存细胞的方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4 °C 30~60 分钟→ (-20 °C30 分钟*) → -80 °C 16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。 冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 °C 至–80 °C 以下, 再放入液氮槽vap
细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因
研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,原因比较复杂,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳;血清使用错误或血清的品质不佳;解冻过程错误;冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心;悬浮细胞误认为死细胞;培养温度使用错误;细胞置于–80 ℃太久等。建议严格参照ATCC或ECACC的标准操作规程进行
人体冷冻保存技术正在实现中-安全解冻仍是问题
当一个人被宣布死亡时,人体冷冻保存公司会派遣一个快速反应团队来对死者的尸体进行处理。一旦人体进入冷冻设备,就会被降温到冰点,而且血液会被取出并用保存器官的溶液进行替代。身体的血管会注入一种冷冻保护液来防止器官和组织内形成冰晶,而且尸体会被降温到零下130摄氏度并装入一个容器中,然后保存在一个零下
细胞培养中血清的解冻及热灭活
细胞培养用血清解冻与热灭活常见问题 一、保存血清的方法 建议血清应保存在-5 ℃至-20 ℃。然而,若存放于4℃时,请勿超过一个月。若您一次无法用完一瓶,建议您无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。 二、如何解冻血清才不会使产品质量受损? 建议您将血清从冷冻箱取出后,先置于2~
冷冻保存细胞的方法介绍?
冷冻保存方法一:冷冻管置于4°C30-0分钟→(-20°C30分钟*)→-80°C16~18小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。冷冻保存方法二:冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vaporphase长期储存。*-20°C不可超过1小时
恒温解冻仪维护及保养
1、在仪器运转时你掀开隔水膜袋观察水污染情况,根据水的质量情况确定您是否需要换水,如使用纯净水会延迟您换水的时间。 2、水箱内的水进行消毒时从加水口处放入为0.5/100的氯片即可。 3、水箱清洗时,在设备右侧有放水口,您将水箱内的水全部放掉,然后关死放水阀门,从加水口再加入清水并加入2片消
恒温解冻仪的安装方法
产品说明 川一全自动干式恒温解冻仪是将血浆袋放在融浆水囊与水囊之间,按启动键后,热水自动注入水袋内,进行循环融浆。使血浆在融化过程中始终不接触水,保持真正意义上的干式融浆。 适用范围 杭州川一全自动干式恒温解冻仪一般适用于血液中心、临床输血科、医院、血液制品生产单位,医 学实验室,减少了工序
细胞复苏“黑科技”之无水细胞解冻系统
什么是无水细胞解冻?别着急,往下看就知道了。细胞解冻复苏讲究一个“快”字,将液氮罐(-196℃)或超低温冰箱(-80℃)保存的细胞快速升温至37℃,使细胞迅速通过-5℃-0℃,避免细胞内部重新结成冰晶,造成细胞损伤或死亡。没错,就是要乘细胞不备,赶快出手!细胞冻存容器一般使用冻存管和冻存袋两种,冻存
全自动细胞解冻仪的特点
高效速融 迅速通过细胞最易受损的-5~0℃,避免小冰晶形成大冰晶对细胞造成伤害 完全自动 内置多重监控,微电脑自动控制,专业高效 真正干式 冻存袋不与水接触,避免泄露污染,影响环境及操作人员安全 直立装载 高空间利用率,各加温仓底部均设置漏液检测探头 包裹加温 封闭的加温环境及搅拌器设计
恒温解冻仪解冻温度分析
振动传感器在机械接收原理方面,只有相对式、惯性式两种,但在机电变换方面,由于变换方法和性质不同,其种类繁多,应用范围也极其广泛。在现代振动测量中所用的传感器,已不是传统概念上独立的机械测量装置,它振动传感器图册仅是整个测量系统中的一个环节,且与后续的电子线路紧密相关。由于传感器内部机电变换原理的不同
恒温解冻仪解冻温度分析
恒温解冻仪解冻温度分析如下振动传感器在机械接收原理方面,只有相对式、惯性式两种,但在机电变换方面,由于变换方法和性质不同,其种类繁多,应用范围也极其广泛。在现代振动测量中所用的传感器,已不是传统概念上独立的机械测量装置,它振动传感器图册仅是整个测量系统中的一个环节,且与后续的电子线路紧密相关。由于传
细胞冻存方法、步骤及注意事项!
细胞越来越受广大科研者的喜爱,但细胞不像人们想象中那么强大,在培养复苏等过程中稍有不慎就不可能导致它的死亡。而且它必须是是在无污染的条件下培养,复苏才能保证实验效果。在此百欧博伟生物技术为您详细总结细胞的正确冷冻保存方法、保存详细步骤,相关注意事项如下: 一、保存方法(主要有两个):
恒温循环解冻箱标准设定解冻温度和解冻时间
恒温循环解冻箱标准操作规程 一、操作规程 1.接地保护:在机器后背有一黄绿色接地线,用户使用机器前必须将该线接好,以保证机器良好接地,为确保安全,用户必须请持证电工进行安装。接插好电源线,打开机器电源即进入工作状态。 2.进水 当面板“缺水”灯亮时,机器需要进水。进水分“自动”和“手
为什么STR鉴定对于ATCC细胞系来说很重要
ATCC 成立于 1925 年,是大的生物资源中心,由美国 14 家生化、医学类行业协会组成的理事会负责管理,是一家全球性、非盈利生物标准品资源中心。 进行细胞系STR鉴定是很重要的。很多生物医药的研究都采用培养细胞来进行,这些细胞可能是受赠于其它研究人员,也可能是从细胞库(如美国?ATCC,
制备干细胞及冷冻干燥
制备干细胞因子冻干粉,将35ml干细胞富因子溶液置于50ml离心管中,离心,1000g的离心力离心10min,以去除细胞碎片及其他大颗粒杂质;所述干细胞富因子溶液,来源于间充质干细胞培养上清液,即间充质干细胞生长汇合度达到95%时收集其培养上清液;向上述离心后得到的溶液中按照4g/100ml的浓度加
细胞冷冻离心机分类方法
细胞冷冻离心机分类方法有多种。1、按分离目的可分:实验室细胞冷冻离心机和工业细胞冷冻离心机。2、按结构可分:细胞台式冷冻离心机和细胞立式冷冻离心机。3、按容量可分:细胞微量冷冻离心机和细胞大容量冷冻离心机。4、按产地可分:国产细胞冷冻离心机和进口细胞冷冻离心机。5、按速度可分:细胞低速冷冻离心机和细
细胞冷冻保存方法、注意事项
1.1. 欲冷冻保存之细胞应在生长良好(log phase) 且存活率高之状态,约为80 – 90 %致密度。1.2. 冷冻前检测细胞是否仍保有其特有性质,例如hybridoma 应在冷冻保存前一至二日测试是否有抗体之产生。1.3. 注意冷冻保护剂之品质。DMSO 应为试剂级等级,无菌且无色(以0.
ATCC菌种生理状况改变原因
ATCC菌种的遗传特性需要在一定条件下才能表现出来。由于培养条件不适当,使菌种处于不利于发酵生产的生理状况,其结果也表现为菌种衰退。菌种处于不利于发酵的生理状况有以下三个方面的原因:①一个菌种不是纯的群体,而是由一些变异株混合组成,这些变异株所占的比例决定该菌种的特性。一个由单菌落发育而来的菌种在固
恒温解冻仪安装和维护方法
恒温解冻仪是在冰冻血浆解冻箱原理的基础上、增加了医用PVC薄膜制造的膜袋,在解冻时让血浆与水隔离,达到干式解冻的目的,改变了传统水温箱式的直接湿式浸泡解冻方法。该产品不但保持了血浆袋外部干爽清洁和标识的完整,又能防止污染水源,同时也能减少医院内交叉感染的几率。可减少血浆袋破裂造成血资源浪费。【安装说
细胞台式冷冻离心机分类方法
细胞台式冷冻离心机分类方法有多种。1、按速度可分:细胞台式冷冻低速离心机和细胞台式冷冻高速离心机。2、按分离规模可分:小型细胞台式冷冻离心机和大型细胞台式冷冻离心机。3、按分离目的可分:细胞化验室台式冷冻离心机和细胞工业台式冷冻离心机。4、按分离功能可分:分析型细胞台式冷冻离心机和制备型细胞台式冷冻
细胞台式冷冻离心机分类方法
细胞台式冷冻离心机分类方法有多种。1、按速度可分:细胞台式冷冻低速离心机和细胞台式冷冻高速离心机。2、按分离规模可分:小型细胞台式冷冻离心机和大型细胞台式冷冻离心机。3、按分离目的可分:细胞化验室台式冷冻离心机和细胞工业台式冷冻离心机。4、按分离功能可分:分析型细胞台式冷冻离心机和制备型细胞台式冷冻
正确冷冻保存细胞的方法和步骤
细胞越来越受广大科研者的喜爱,但细胞不像人们想象中那么强大,在培养复苏等过程中稍有不慎就不可能导致它的死亡。而且它必须是是在无污染的条件下培养,复苏才能保证实验效果。在此总结一下细胞的正确冷冻保存方法、保存详细步骤,相关注意事项如下: 一、保存方法(主要有两个): (1)传统方法:冷
特殊生物的超低温保存法
1.大多数微生物可用超低温保存,超低温保存法是适用范围广的微生物保存法: 通常可用超低温的方法保存(ATCC 1983;Halliday,Baker 1985)。此法是将冻存在小管或安瓿里的细胞以较慢的冷冻速率(1℃/分钟)冷冻,直至—150℃,再将这些小管贮存在—150~-196℃的液氮中。
恒温解冻仪操作使用及系统介绍
使用前一定要将水加到水位线,切勿干烧,以保护加热管。随着开机时间的不断增长,水箱的水回逐渐蒸发,请随时检查水位(加水换水)。确保机器正常运转。血液溶浆机设定温度,按SET键可设定或查看温度设定点。按一下SET键管字符开始闪动,表示仪表进入设定状态,按△键设定值增加,按△或▽键数据会快速变动,再一次按
细胞培养基本技术概述(三)
血清 1. 血清必须贮存于–20 ~ -70 oC,若存放于4 oC,请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶,可将40~45 ml 分装于无菌50 ml 离心管中,由于血清结冻时体积会增加约10 %,必须预留此膨胀体积之空间,否则易发生污染或容器冻裂之情形。 2. 一般厂商提供之血清为无菌,不需再
细胞冷冻保存
实验概要细胞的冷冻保存实验材料材料: 1 生长良好之培养细胞 2 新鲜培养基 3 DMSO (Sigma D-2650) 4 无菌塑料冷冻保存管(Nalgene 5000-0020) 5 0.4 % w/v trypan blue (GibcoBRL 15250-061) 6 血球计数盘
冷冻细胞活化
实验概要1. 冷冻细胞之活化原则为快速解冻,以避免冰晶重新结晶而对细胞造成伤害,导致细胞之死亡。 2. 细胞活化后,约需数日,或继代一至二代,其细胞生长或特性表现才会恢复正常(例如产生单株抗体或是其它蛋白质)。实验材料材料: 37 ℃ 恒温水槽 新鲜培养基 无