流式细胞仪标本制备荧光标记法
实验方法原理活细胞免疫荧光技术是用于FCM检测的标本准备，染色后也能在荧光显微镜下进行观察，在某些实验条件下，活细胞免疫荧光染色后的特异性和敏感性要优于滴片固定的常规间接免疫荧光的结果。活细胞表面保留有较完整的抗原或受体，先用特异性鼠源性单克隆抗体与细胞表面相应抗原结合，再用荧光标记的第二抗体结合，根据所测定的荧光强度和阳性百分率即可知相应抗原的密度和分布。实验材料细胞悬液试剂、试剂盒羊抗鼠荧光标记物、DPBS、洗涤液、固定液、甲醛、葡萄糖、氯化钠、氯化钾、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾仪器、耗材玻璃管、离心管、荧光显微镜、离心机实验步骤制备活性高的细胞悬液(培养细胞系、外周血单个核细胞、胸腺细胞、脾细胞等均可用于本法)↓用10％FCS RPMI1640调整细胞浓度为5x106～1x107／ml ↓取40ul细胞悬液加入预先有特异性McAb(5～50ul)的小玻璃管或塑料离心管，再加50ul 1∶20(用DPBS稀释)灭活正常......阅读全文
临床物理检查方法介绍流式细胞DNA分析介绍
流式细胞DNA分析介绍: 流式细胞DNA分析是可以研究间期细胞,并不受细胞增殖状态的影响,对检测胸腔积液中的恶性细胞的有重要意义的一种检查方法。 流式细胞仪的检测范围: (1) 流式细胞仪可以检测细胞结构,包括:细胞大小、细胞粒度、细胞表面面积、核浆比例、DNA含量与细胞周期、RNA 含量、蛋白
X荧光光谱仪如何建立面向应用的标样
如何建立面向应用的标准样品呢？可以从以下几步实施： 1、先将用户要检测的样品材料进行分类，将不同材质的样品分成不同类别。 2、同类别的材料再按其基材和主要组份分类。 3、同基材的材料按照其主要组份进行归一化分类。 4、确认归一化的材料的组份差别控制在可容许范围内，并确认其中应无影响谱线的不
原子荧光仪测汞标空白高达上千是怎么回事
用原子荧光法测汞元素时，因为汞自身不稳定所以对原子荧光光度计的RSD值要求很高，你可以在其他仪器重做实验。如果结果还是不理想，就需要考虑是不是你在前处理上了问题或是样品受污染。还有就是汞的记忆效应很大，这也是原子荧光光谱法通病。影响Hg测定的因素太多，在使用SK-2003A原子荧光光谱仪时请你注意以
原子荧光仪测汞标空白高达上千是怎么回事
用原子荧光法测汞元素时，因为汞自身不稳定所以对原子荧光光度计的RSD值要求很高，你可以在其他仪器重做实验。如果结果还是不理想，就需要考虑是不是你在前处理上了问题或是样品受污染。还有就是汞的记忆效应很大，这也是原子荧光光谱法通病。影响Hg测定的因素太多，在使用SK-2003A原子荧光光谱仪时请你注意以
化学发光标记法的目的和用途
为鉴定和检测目的将标记物(如放射性同位素、荧光素或酶)共价连接到另一种化合物上,通过被标记化合物与待检测物之间的特异性反应形成多元复合物,经与未结合的标记物分离后,即可用较简易的方法鉴定和检测待检测物。放射性同位素标记技术广泛用于研究带标记的物质、在体内的代谢过程及其代谢产物。
随机引物合成法双链DNA探针标记法
随机引物合成双链探针是使寡核苷酸引物与DNA模板结合,在Klenow酶的作用下,合成DNA探针。合成产物的大小、产量、比活性依赖于反应中模板、引物、dNTP和酶的量。通常,产物平均长度为400-600个核苷酸。利用随机引物进行反应的优点是：(1)Klenow片段没有5'→3'外切酶活
红外线光谱的重要吸收区段巧记法
红外可分远中近，中红特征指纹区， 1300来分界，注意横轴划分异。看图要知红外仪，弄清物态液固气。 样品来源制样法，物化性能多联系。识图先学饱和烃，三千以下看峰形。 2960、2870是甲基，2930、2850亚甲峰。1470碳氢弯，1380甲基显。 二个甲基同一碳，1380分二半。面内摇摆720，
末端标记法介绍DNA探针的标记方法
末端标记法不是将DNA进行全长标记，只在其5'端或3’端导入标记物进行部分标记。该标记方法可得到全长DNA探针，因为携带的标记分子较少，所以标记比活性不高。
电子顺磁共振谱仪自旋标记法
由美国的 H·M·麦康奈尔于1965年创立，系指将一种稳定的自由基（最常用者为氮氧自由基）结合到单个分子或处于较复杂系统内的分子上的特定部位，而从电子顺磁共振波谱取得有关标记物环境的信息。在进行自旋标记时，应注意到尽量保持专一性和减少对天然系统的生物特性和分子特性引起的扰动。 自旋标记物有4个
同位素标记的探针和非同位素标记的探针的特点和应用
同位素标记的探针通常有很高的放射比活性，杂交的灵敏度高，但使用期限短，且有放射性危害，污染物处置困难，需要特殊的仪器和设备，不适用于普通实验室。近年来非同位素标记法得到很大发展，如酶促标记法（如生物素、地高辛标记法）和化学标记法（如荧光生物素、酶标记法）。非同位素标记的探针保存时间较长、避免了同位素
探针的标记方式的分类和特点介绍
探针的标记方式有放射性标记和非放射性标记。标记物质有放射性元素（如32P等）和非放射性物质（如生物素、地高辛等）。32P是最常用的核苷酸标记同位素，被标记的dNTP本身就带有磷酸基团，便于标记。特点是比活性高，可达9000Ci/mmol；发射的β射线能量高。用它标记的探针自显影时间短，灵敏度高。32
关于基因探针标记的方法介绍
探针的标记方式有放射性标记和非放射性标记。标记物质有放射性元素（如32P等）和非放射性物质（如生物素、地高辛等）。32P是最常用的核苷酸标记同位素，被标记的dNTP本身就带有磷酸基团，便于标记。特点是比活性高，可达9000Ci/mmol；发射的β射线能量高。用它标记的探针自显影时间短，灵敏度高。
“DNA探针”的分类及介绍
DNA探针分为两类:同位素标记的探针和非同位素标记的探针。同位素标记的探针通常有很高的放射比活性,杂交的灵敏度高,但使用期限短,且有放射性危害,污染物处置困难,需要特殊的仪器和设备,不适用于普通实验室。近年来非同位素标记法得到很大发展,如酶促标记法(如生物素、地高辛标记法)和化学标记法(如荧光生物素
细胞膜流动性测定实验
荧光探针标记法 实验方法原理 常用于研究膜脂流动性的荧光探针为1,6-二苯基-1,3,5-己三烯（DPH）。DPH掺入到细胞膜脂烃链区后，介质粘度增加，顺反异
细胞膜流动性测定实验
荧光探针标记法 实验方法原理 常用于研究膜脂流动性的荧光探针为1,6-二苯基-1,3,5-己三烯（DPH）。DPH掺入到细胞膜脂烃链区后，介质粘度增加，顺反异
酶联免疫吸附酶标记法的方法特点介绍
酶与抗体交联，常用戊二醛法和过碘酸盐氧化法。郭春祥建立的HRP标记抗体的改良过碘酸钠法简单易行，标记效果好，特别适用于实验室的小批量制备。其标记程序为：将5μg HRP溶于0.5ml蒸馏水中，加入新鲜配制的0.06 mol/L的过碘酸钠（NaIO4）水溶液0.5ml，混匀置4℃冰箱30分钟 ， 取出
时间分辨荧光免疫分析技术－(TRFIA)－在乙肝病毒血清学标...
时间分辨荧光免疫分析技术 (TRFIA) 在乙肝病毒血清学标志物检测中的应用【摘要】 目的 调查时间分辨荧光免疫分析技术 (TRFIA) 在乙型肝炎血清学标志物检测中的应用情况。方法 采用 AT-2000 时间分辨荧光免疫分析仪及配套试剂对 180 例正常人血清及 46 例乙型肝炎患者血清用 T
抗双链DNA抗体的检测方法
检测抗DNA抗体的方法有多种，如ELISA、IIF、金标法、免疫印记法、放免法等。其中最特异敏感的是应用锥虫或血鞭毛虫（如绿蝇短膜虫）作基质测定抗dsDNA抗体。因为这些血寄生虫的动基体内含大量的纯dsNDA，无其他抗原干扰；在阳性结果时，可见鞭毛一端的动基体显示清晰的荧光。因此该试验用于测定抗
常用RNA标记方法介绍
RNA标记方法：按反应机制分如下四类：直接标记法，加尾标记法，基于逆转录反应的标记方法，基于RNA克隆扩增的标记方法。常用于RNA标记的方法按标记物性质分为：放射性同位素标记：32P、35S、3H非放射性标记：半抗原荧光素化学发光物质地高辛地高辛标记RNA常用的方法是将DIG与UTP共价结合形成DI
靶细胞杀伤实验总论－2
2、流式细胞标记法 （1）PE-mAb/FITC-annexin V 荧光标记法 正常细胞的磷酯酰丝氨（phosphatidylserine，PS）位于细胞膜内表面，细胞凋亡时翻转露于膜外侧，可与annexinV高亲合力结合。研究发现PS外翻为细胞凋亡的早期事件，先于膜通透性增加所51Cr或其他染料
外周血免疫细胞检测
实验材料 静脉全血 试剂、试剂盒 肝素 鼠抗人目的单克隆抗体 溶红细胞液 生理盐
外周血免疫细胞检测
实验材料静脉全血试剂、试剂盒肝素鼠抗人目的单克隆抗体溶红细胞液生理盐水仪器、耗材FCM 测量管实验步骤1. 取 1000 U/ml 肝素 100 ul 抗凝静脉全血，置于 FCM 测量管中。2. 直接标记法：加入带荧光标记的鼠抗人目的单克隆抗体试剂 10 ul，充分混匀，在 4℃ 冰箱中反应 30
外周血免疫细胞检测
实验材料 静脉全血 试剂、试剂盒 肝素 鼠抗人目的单克隆抗体 溶红细胞液 生理盐
浅谈荧光在酶标仪上的应用以及新一代酶标检测系统...一
浅谈荧光在酶标仪上的应用以及新一代酶标检测系统（Paradigm+Tune）的优势前言我们知道目前生命科学及现代分子生物学主要集中在对核酸和蛋白质等生物大分子的分析以及进行一些细胞水平的研究。传统的分析方法是采用放射性同位素作为一种示踪剂，标记在各种生物大分子或者细胞中来研究它们之间的相互作用和变化
浅谈荧光在酶标仪上的应用以及新一代酶标检测系统...二
荧光蛋白报告基因分析 近几年在生命科学研究中，GFP（一种水母中提取的绿色荧光蛋白）作为一种报告基因以其自身的许多优点越来越受到大家重视，首先GFP无毒，自身在不需要辅酶作用下可以发光，且荧光信号稳定。我们可以用目的基因与GFP基因融合，转染细胞进行表达，通过荧光信号强弱来确定其表达量的高低。 时间
动物体内抑瘤实验——生物发光标记法
实验方法原理活体生物发光成像技术的原理：在小型哺乳动物体内利用报告基因（荧光素酶基因）表达所产生的荧光素酶蛋白与其小分子底物荧光素在氧、Mg2+存在的条件下消耗ATP发生氧化还原反应，将部分化学能转化为可见光能释放。因此只有在活细胞内才会发生发光现象。并且光的强度与标记细胞的数目线性相关。实验材料裸
免疫酶标技术
免疫酶标技术1） 直接法1．标本固定。2．PBS洗涤2×3分钟。3．1％ H2O2（或1％ H2O2 甲醇）抑制内源性过氧化物，室温10～20分钟。4．正常血清（1：10）孵育，室温20分钟。5．滴加酶标记的抗体37℃1小时或4℃过夜。6．PBS洗涤3×3分钟。7．DAB＋H2O2显色5～10分钟
免疫酶标技术
实验方法原理 先将酶与抗体结合形成酶标抗体，然后和相应的抗原反应，使抗原抗体复合物上带有酶分子，再与酶的底物H2O2—DAB（3’3—二胺荃联苯胺）发生显色反应，在显微镜下观察，根据颜色产物检测相应抗原。实验材料 抗体试剂、试剂盒 PBSH2O2血清仪器、耗材 显微镜实验步骤 1. 标本固定；2.
配件和标样
先进的条码功能、指纹识别器和其他选件，可以使 LiquiPysics Excellence 系统的操作更加轻松、安全、便捷。密度/折光率的复合标准品可降低不确定度，并提高仪器的全自动性能。了解详情
标液的稀释
在日常分析中常需要对溶液进行稀释，而稀释过程中随着稀释倍数的增加，误差也随之增加。所以某些标准中会有逐级稀释到多少浓度的规定或者每次稀释的倍数不能超过20倍的明确规定。体积法和重量法稀释各有利弊?哪个更优?逐级稀释和一步稀释到底哪个不确定度更高?更省时省力且误差小?本文一一讨论，往下看吧!