色谱柱的平衡

关于峰形的变化多加一节番外——关于色谱柱的平衡,这一点也是一般书中不会多讲的,但是实际工作中很容易遇到的,所以小编单独开一节。当然,由于引起峰形异常的原因非常明确——仅仅是柱子未平衡完全,所以下文中主要谈到的是如何平衡以及不合理的平衡措施所产生的影响。 色谱柱平衡未完全也会引起峰形的变化,当然,未平衡完全更多情况下会带来保留时间的变化。关于这一点,我们今天暂时不考虑,该话题放到今后保留时间的话题中再讨论。由于平衡未完全导致的峰形失真通常伴随着保留时间的改变。 在我们把柱子安装到仪器中前,必须确认仪器中原有管路中的试剂跟色谱柱保存试剂是相容的。如果不相容,需要在接上柱子前先打开purge阀把仪器管路中的试剂过渡并切换成与色谱柱保存试剂相容的试剂。 特别需要关注系统正反相切换的时候:对于反相色谱柱,可能会因为正反相不相容而使接下去的实验出现不可估计的异常现象;而对于正相硅胶柱,或者氧化铝色谱柱,或者某些......阅读全文

色谱柱的操作

  安装  1、首先应确认柱和仪器的接头以及管路是否匹配。为减少死体积,进样阀、柱子、检测器之间的连接管路内径尽可能使用内径较小的管线,同时控制进样器、色谱柱和检测器之间连接管线的长度。安装色谱柱之前,确认流路系统中的溶剂是否正常。对分析较复杂的样品建议安装保护柱。  2、为了使色谱柱与仪器系统达最

色谱柱是什么

色谱柱可分为填充柱和开管柱两大类。多为金属或玻璃制作。有直管形、盘管形、U形管等形状。液相色谱通常均采用填充柱。色谱柱的分离效果取决于所选择的固定相,以及色谱柱的制备和操作条件。色谱是一种分离分析手段,分离是核心,因此担负分离作用的色谱柱是色谱系统的心脏。色谱柱由柱管、压帽、卡套(密封环)、筛板(滤

色谱柱分离原理

原理很简单,就是相似相溶的原理,相溶的停留时间长,极性不相溶的仪时间短。

色谱柱的作用

什么是色谱柱;色谱柱由柱管、压力帽、夹套、筛板、接头、螺钉等组成。大多数管子是不锈钢制成的,当压力不超过70 kg/cm2时,也可以使用厚壁玻璃或石英管。管子的内壁需要很高的光洁度。为了提高色谱柱的效率,减少壁效应,对不锈钢色谱柱的内壁进行了多次抛光。另一些则在不锈钢柱的内壁涂上塑料,以提高

怎样老化色谱柱?

怎么样老化色谱柱?新填充的色谱柱不能马上使用还需要进行老化处理。老化的目的有两个:一.是为了彻底除去填充物中的残余溶剂,和某些挥发性杂质。二.是促进固定液均匀的、牢固分布在单体的表面上。老化的方法:把柱子与汽化室连接,与检测器一端要断开,以氮气为载气,流速是正常的一半即可,温度选择固定液的最高使用温

色谱柱常规处理

常规处理:硅胶、氧化铝、极性键合相色谱柱每一次用完后用低流速长时间的二氯甲烷或正己烷等溶剂冲洗;键合相硅胶色谱柱、离子交换色谱柱和凝胶色谱柱先用蒸馏水冲洗,再用甲醇冲洗,然后用甲醇与蒸馏水以一定比例混合的溶液冲洗后过夜。对于已使用一段时间后柱效下降的色谱柱可按以下方法进行再生。再生处理包括活化(右→

色谱柱的保存

保存色谱柱时应将柱内充满乙腈或甲醇,柱接头要拧紧,防止溶剂挥发干燥。绝对禁止将缓冲溶液留在柱内静置过夜或更长时间。

色谱柱分离经验

色谱柱子可以分为:加压,常压,减压。    压力可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集的时间,但是会减低柱子的塔板数。所以其他条件相同的时候,常压柱是效率最高的,但是时间也最长,比如天然化合物的分离,一个柱子几个月也是有的。    减压柱能够减少硅胶的使用量,感觉能够节省一半甚至更多,但是由于大量的

什么是柱色谱?

为向玻璃管中填入固定相,以流动相溶剂浸润后在上方倒入待分离的溶液,再滴加流动相,因为待分离物质对固定相的吸附力不同,吸附力大的固着不动或移动缓慢,吸附力小的被流动相溶剂洗下来随流动相向下流动,从而实现分离。

色谱柱的性能

色谱柱由柱管、压帽、卡套(密封环)、筛板(滤片)、接头、螺丝等组成。性能评价色谱柱的性能除了与固定相性能有关外,还与填充技术有关。在正常条件下,填料粒度>20um时,干法填充制备柱较为合适;颗粒

色谱柱的构造

色谱柱按用途可分为分析型和制备型两类,尺寸规格也不同:①常规分析柱(常量柱),内径2~5mm(常用4.6mm,国内有4mm和5mm),柱长10~30cm;②窄径柱(narrow bore,又称细管径柱、半微柱semi-microcolumn),内径1~2mm,柱长10~20cm;③毛细管柱(又称

色谱柱老化问题

1、色谱柱老化的目的:是彻底除去填充物中的残留溶剂和某些挥发性的物质;另一方面是促进固定液均匀牢固地分布在担体的表面上。 而且新的气相色谱柱必须老化。2、方法:在常温下使用的柱子,可直接装在色谱仪上,接通载气,冲至基线平稳即可使用;如果柱子在高温操作条件下应用,则在比操作温度稍高的温度下通载气几小时

凝胶色谱柱操作

1、 溶胀商品凝胶是干燥的颗粒,通常以40~63um的使用zui多。凝胶使用前需要在洗脱液中充分溶涨一至数天,如在沸水浴中将湿凝胶逐渐升温到近沸,则溶涨时间可以缩短到1~2小时。凝胶的溶涨一定要完全,否则会导致色谱柱的不均匀。热溶涨法还可以杀死凝胶中产生的细菌、脱掉凝胶中的气泡。2、 装柱由于凝胶的

色谱柱的分类

1.根据所有的担体材料分为三种:(1)硅胶型:机械强度高,易制成小颗粒,理论塔板数高。(2)聚合物型:在广泛的PH值范围内稳定。(3)羟基磷灰石型:对蛋白质等生物高分子样品有特殊的选择性。2.根据分离方式分为:(1)正相:SIL--磷脂、NH--糖、维生素E,CN--甾类激素。(2)反相:ODS(C

色谱柱的保养

    色谱柱是化合物分离的关键。保养良好的色谱柱具有很高的塔板数,且仪器基线平稳。  1、避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况;柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料,因此在调节流速时应该缓慢进行,在阀进样时阀的转动不能过缓(如前所述)。

色谱柱分离经验

色谱柱可以分为:加压、常压、减压色谱柱。压力可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集的时间,但是会减低柱子的塔板数。所以其他条件相同的时候,常压柱是效率最高的,但是时间也最长,比如天然化合物的分离,一个柱子几个月也是有的。减压柱能够减少硅胶的使用量,感觉能够节省一半甚至更多,但是由于大量的空气通过硅胶

色谱柱的作用

色谱柱是进行色谱分析的主要仪器,色谱柱的正确安装才能保证发挥其最佳的性能和延长使用寿命。 

色谱柱的维护

色谱柱的正确使用和维护十分重要,稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。在色谱操作过程中,需要注意下列问题,以维护色谱柱。  ① 避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况;柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料,因此在调节流速时应该缓慢进行

色谱柱是什么

色谱柱可分为填充柱和开管柱两大类。多为金属或玻璃制作。有直管形、盘管形、U形管等形状。液相色谱通常均采用填充柱。色谱柱的分离效果取决于所选择的固定相,以及色谱柱的制备和操作条件。色谱是一种分离分析手段,分离是核心,因此担负分离作用的色谱柱是色谱系统的心脏。色谱柱由柱管、压帽、卡套(密封环)、筛板(滤

怎样老化色谱柱?

新填充的色谱柱不能马上使用还需要进行老化处理。老化的目的有两个,一是为了彻底除去填充物中的残余溶剂,和某些挥发性杂质,另一个目的是促进固定液均匀的、牢固分布在单体的表面上。老化的方法:----把柱子与汽化室连接,与检测器一端要断开,以氮气为载气,流速是正常的一半即可,温度选择固定液的最高使用温度,老

怎样老化色谱柱

新填充的色谱柱不能马上使用还需要进行老化处理。老化的目的有两个,一是为了彻底除去填充物中的残余溶剂,和某些挥发性杂质,另一个目的是促进固定液均匀的、牢固分布在单体的表面上。老化的方法:----把柱子与汽化室连接,与检测器一端要断开,以氮气为载气,流速是正常的一半即可,温度选择固定液的最高使用温度,老

色谱柱的再生

高效液相柱是消耗品,会随使用时间或进样的次数增加,出现色谱峰高降低,峰宽加大或出现肩峰,柱效下降。需要定期进行彻底清洗和再生。1、反相柱分别用甲醇:水=90:10、纯甲醇、二氯甲烷等溶剂着流动相,依次冲洗,每种流动相流经色谱柱不少于20倍的色谱柱体积。然后再以相反的次序冲洗。2、正相柱分别用正己烷、

色谱柱的保存

反相液相色谱柱色谱柱每天实验后的保养:使用缓冲液或含盐的流动相,实验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟,洗掉色谱柱中的盐,再用甲醇冲洗30分钟。注意:不能用纯水冲洗柱子,应该在水中加入10%的甲醇,防止将填料冲塌陷。(2)长期保存色谱柱:如色谱柱要长时间保存,必须存于合适的溶剂下。对于反相柱可以

色谱柱清洗方法

  吸附的主要原因   反相硅胶柱填充介质(固定相)与样品间常常会发生下列吸附现象:   (1) 残存硅醇基与碱性物质间的离子吸附;(2) 硅胶表面的金属杂质与金属配位物质间的吸附;   (3) 疏水性极强的物质在柱中的蓄积。以上现象,会引起反相色谱柱柱效下降、拖尾、重复性不良等状况的发生   清洗

色谱柱的老化

•目的:除去溶剂、水分、以及色谱柱制备过程中其他挥发性杂质;促进固定液均匀牢固的分布在担体上。•老化方法(略)•老化温度的选择应注意:足够高以除去不挥发物质;足够低以延长柱寿命和减少柱流失;温度越低老化时间应越长;不超过色谱柱的最高使用温度•填充柱比毛细管柱应更经常、更严格的老化•填充柱老化时间应长

什么是色谱柱

  色谱是一种分离分析方法,分离是其核心。因此起到分离作用的色谱柱是色谱系统的核心。色谱仪对色谱柱的要求是选择性好,柱效高且分析速度快。用于分析的各种微粒填料如以以硅胶为基质的键合相及多孔硅胶、氧化铝、多孔碳及有机聚合物微球等粒度一般为3至10μm,柱效的理论值可以达到五至六万每米。对于一般分析只需

如何选择色谱柱

如何选择色谱柱  在选择色谱柱之前,先多了解自己的样品和杂质,他们的类型结构、极性、酸碱性、分子量大小等等。   1.样品是极性的且弱酸性的;就可以选择C18在100%酸性水溶液条件下检测,即要选择承受100%纯水且对极性化合物保留很好的色谱柱。  2. 如果样品极性太强,或酸性太强;可以选择CN,

色谱柱的平衡

关于峰形的变化多加一节番外——关于色谱柱的平衡,这一点也是一般书中不会多讲的,但是实际工作中很容易遇到的,所以小编单独开一节。当然,由于引起峰形异常的原因非常明确——仅仅是柱子未平衡完全,所以下文中主要谈到的是如何平衡以及不合理的平衡措施所产生的影响。 色谱柱平衡未完全也会引起峰形的变化,当然,未平

如何平衡色谱柱?

平衡过程中,将流速缓慢地提高   用流动相平衡色谱柱直到获得稳定的基线(缓冲盐或离子对试剂度如果较低,则需要较长的时间来平衡)色谱柱的再生  进行色谱柱再生时,应使用一个谦价的泵,我们建议zui好不使用您的高效液相色谱仪上的泵。      表1 建议用来冲洗的溶剂体积      色谱柱尺寸 柱体积

什么是色谱柱

色谱柱是一种以凝胶填充的柱子(长的,圆柱形的柱状容器,两头各有一孔,进液和出液口,分实验室用的和工业用的,区别就是大小不一样,但都叫层析柱)。凝胶分很多种,一般来说要分离的物质而具体定,层析柱都是用来分离和提纯物质的