液相流动相知识
流动相是影响液相色谱的关键因素。一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。高效液相色谱法中的流动相主要用水性溶剂、有机溶剂或它们的混合液，但是如何配制。选择配制的方法不同，分析结果特别是保留时间，是会有显著差别的。高效液相色谱法中的流动相主要用水性溶剂、有机溶剂或它们的混合液，水性溶剂也常用于缓冲液。常因资料上表示的内容和实际的配制方法不同，而产生流动相的差异，影响了色谱图和分析结果。一般来说，溶剂的混合按体积比（V/V）或重量比（W/W）进行。溶液的体积因温度而变化，所以按重量比混合可调制再现性较好的混合溶剂，但由于操作较麻烦，通常多用体积比混合。只要没有特别标明，就可按体积比进行混合，但在特殊情况下，如胺类粘度高的溶液混合时，有时用重量—体积比（W/V）的方法。液相色谱是样品组分在柱填料与流动相之间质量交换而达到分离的目的，因此要求流动相具备以下的特点：a.流动相对样品具有一定的......阅读全文
反相高效液相色谱的固定相是什么，流动相有什么
反相高效液相色谱的固定相是非极性溶剂，常见的固定相是十八烷基键合硅胶，流动相是极性溶剂，常见的流动相是甲醇，乙腈。反相高效液相色谱是由非极性固定相和极性流动相所组成的液相色谱体系，它正好与由极性固定相和弱极性流动相所组成的液相色谱体系（正相色谱）相反。RP-HPLC的典型的固定相是十八烷基键合硅胶，
高效液相色谱流动相的选择、使用及贮存需注意哪些？
高效液相色谱的流动相通常是各种低沸点溶剂和水溶液。它是影响分离的一个非常重要因素。在实际工作中，流动相的选择和优化是确定色谱分析的主要工作。流动相溶剂的选择1）所选用的流动相溶剂要有一定的化学稳定性，不与固定相和样品组分起反应，其纯度和化学特性必须满足色谱过程的稳定性和重复性的要求。2）溶剂应当不干
液液分配色谱仪固定液和流动相介绍
液液分配色谱仪是基于样品组分在固定液和流动相之间分配系数不同实现分离的。一、固定相：液液分配色谱的固定相为涂渍在载体上的固定液。1、载体：理想的载体应孔容大，孔径为10～50nm。孔径太小，较大的分子可能被完全排阻，而保留时间短，分离不佳。孔径太大，固定液易流失，柱稳定性差。由于毛细管作用，固定液在
液液分配色谱仪固定液和流动相介绍
液液分配色谱仪是基于样品组分在固定液和流动相之间分配系数不同实现分离的。一、固定相： 液液分配色谱的固定相为涂渍在载体上的固定液。 1、载体： 理想的载体应孔容大，孔径为10～50nm。孔径太小，较大的分子可能被完全排阻，而保留时间短，分离不佳。孔径太大
液液分配色谱仪固定液和流动相介绍
液液分配色谱仪是基于样品组分在固定液和流动相之间分配系数不同实现分离的。一、固定相：液液分配色谱的固定相为涂渍在载体上的固定液。1、载体：理想的载体应孔容大，孔径为 10～50 nm。孔径太小，较大的分子可能被完全排阻，而保留时间短，分离不佳。孔径太大，固定液易流失，柱稳定性差。由于毛细管作用，固定
液固吸附色谱仪流动相的选择
在液固吸附色谱仪中，除了固定相对样品的分离起主要作用外，流动相的恰当选择对改善分离效果也产生重要效应。一、使用极性固定相时：使用硅胶和氧化铝等极性固定相时，应以弱极性的戊烷、己烷和庚烷作为流动相的主体，再适当加入二氯甲烷、氯仿、异丙醚、乙酸乙酯和甲基叔丁基醚等中等极性溶剂，或适当加入四氢呋喃、乙腈、
液固吸附色谱仪流动相的选择
在液固吸附色谱仪中，除了固定相对样品的分离起主要作用外，流动相的恰当选择对改善分离效果也产生重要效应。一、使用极性固定相时：使用硅胶和氧化铝等极性固定相时，应以弱极性的戊烷、己烷和庚烷作为流动相的主体，再适当加入二氯甲烷、氯仿、异丙醚、乙酸乙酯和甲基叔丁基醚等中等极性溶剂，或适当加入四氢呋喃、乙腈、
液相流动相溶剂过滤器操作说明
液相流动相溶剂过滤器是适用于搭配各种品牌、型号的HPLC液相色谱使用的一款配套设备。其主要作用是用于去除色谱流动相中的杂质，延长色谱柱的使用寿命，同时整个过滤的过程中也起到了较好的脱气效果，去除气泡后可显著提高分析精度。液相流动相溶剂过滤器(以R300MF举例）其主要由抽滤泵、抽滤瓶组成，两个部分通
在做高效液相时流动相用完有气体进入会产生什么后果
系统的流路中存在气泡。由于气泡的存在，会造成色谱图上出现尖锐的噪声峰，严重时会造成分析灵敏度下降；气泡变大进入流路或色谱柱时会使流动相的流速变慢或不稳定，使基线起伏。造成上述现象的主要原因有三条：一是流动相溶液中往往因溶解有氧气或混入了空气而形成气泡；二是系统开始工作时未能将流路中的空气驱赶干净；三
实验室高效液相色谱仪液相色谱流动相的贮存
流动相一般贮存于玻璃、聚四氟乙烯或不锈钢容器内,不能贮存在塑料容器中。因许多有机溶剂如甲醇、乙酸等可浸出塑料表面的增塑剂,导致溶剂受污染。这种被污染的溶剂如用于HPLC系统,可能造成柱效降低。贮存容器一定要盖严,防止溶剂挥发引起组成变化,也防止氧和二氧化碳溶入流动相。磷酸盐、乙酸盐缓冲液很易长霉,应
液相色谱流动相是甲醇和乙酸铵保留时间往后拖
加入了乙酸铵缓冲盐，就像增加了摩擦阻力一样，增加了在填料中流过的时间。出峰时间自然往后拖。
药品研发中HPLC液相色谱柱的选择和流动相的优化
分析方法的开发主要包括色谱柱的选择、流动相的选择、检测波长的选择和梯度的优化几个方面。目前高效液相色谱法（HPLC)多使用反相色谱法，本文主要以反相为例讲解。1.液相色谱柱的选择 原料药生产对产品的纯度和杂质含量的要求非常苛刻，要求检测使用的色谱柱有较高的理论塔板数，能提
高效液相色谱使用磷酸盐做流动相时应该注意什么
一个就是在流动相配制的过程中，保证磷酸盐完全溶解，然后减压抽滤。因为一般实验室使用的磷酸盐只是化学纯的，所以一定要过滤。避免污染色谱柱。另外一个就是在实验前后记得冲洗系统和冲洗色谱柱。无机盐对于色谱柱和系统都有损伤，所以使用之后要清洗干净。又因为无机盐在水溶液中容易溶解，但是在有机相中溶解度非常低。
药品研发中HPLC液相色谱柱的选择和流动相的优化
分析方法的开发主要包括色谱柱的选择、流动相的选择、检测波长的选择和梯度的优化几个方面。目前高效液相色谱法（HPLC)多使用反相色谱法，本文主要以反相为例讲解。 1.液相色谱柱的选择 原料药生产对产品的纯度和杂质含量的要求非常苛刻，要求检测使用的色谱柱有较高的理论塔板
高效液相色谱色谱法检测样品大概多少体积的流动相
不同的样品洗脱体积是不同的，以保留时间计算，大概在7min-15min出峰为宜，当然这是对单一样品来说的，如果目标峰或干扰峰较多，则首先要考虑的是分离度。这样计算的话（1ml/min的流速），一个样品大概需要10-20ml的流动相，另外色谱柱的平衡也需要消耗流动相。
离子对试剂在液相流动相的浓度一般多少
对于辛烷和庚烷磺酸钠这类的东西来说，一般加1g后配成1000ml流动相
高效液相色谱使用磷酸盐做流动相时应该注意什么
高效液相色谱使用磷酸盐做流动相时一般注意以下几点：1. 注意冲洗系统2. 注意冲洗色谱柱；3. 注意冲洗进样口；4. 注意清洗泵头所有的目的都是为了不让无极盐析出。因为磷酸盐的水溶性好，但磷酸盐在有机物中的溶解度不好。对于甲醇，乙腈很容易沉淀。然后液体管道会被堵塞。例如，你的流动相为0.05mol/
液相色谱中流动相、固定相和保留时间的关系是怎样
一般极性大的样品用反相色谱柱，流动相极性大于固定相极性，样品极性越小，保留时间越长。极性小的样品用正相色谱柱，流动相极性小于固定相极性，样品极性越大，保留时间越长。当然如果有其它保留机理，如氢键等，波流时间会变化。固定相不同保留能力会有不同，如C8的保留能力弱于C18。流动相根据不同的溶解能力、极性
关于液相维护的一些小知识
一、混合溶剂必须要过滤以后才能混合，万一要混合后过滤的话，只能用有机的，绝对不能用水系的。因为水系的材料是纤维素，有机相回或多或少的溶解一点纤维素的，造成污染。 二、标样或样品zui好用流动相溶解(排除特殊情况)，可以避免很多麻烦。 三、给色谱柱加温，温度升高的目的，部分在于增加溶质的溶解度，但更重
液相色谱系统图谱相关知识问答
液相色谱系统的许多问题都能在谱图上反映出来。其中有一些问题可以通过改变设备参数得到解决;而其他的问题必须通过修改操作程序来解决。对于色谱柱和流动相的正确选择是得到好的色谱图的关键。 1峰拖尾 原因和解决方法 1、筛板阻塞 a、反冲色谱柱 b、更换进口筛板
关于液相维护的相关知识与经验
一、混合溶剂必须要过滤以后才能混合，万一要混合后过滤的话，只能用有机的，绝对不能用水系的。因为水系的材料是纤维素，有机相回或多或少的溶解一点纤维素的，造成污染。 二、标样或样品最好用流动相溶解（排除特殊情况），可以避免很多麻烦。 三、给色谱柱加温，温度升高的目的，部分在于增加溶质的溶解度，但
维护液相色谱的有关知识和经验
一、混合溶剂必需要过滤以后才能混合，万一要混合后过滤的话，只能用有机的，绝对不能用水系的。由于水系的材料是纤维素，有机相回或多或少的溶解一点纤维素的，造成污染。 二、标样或样品最好用活动相溶解（排除特殊情况），可以避免良多麻烦。 三、给色谱柱加温，温度升高的目的，部门在于增加溶质的溶解度，但
关于液相维护的一些小知识
一、混合溶剂必须要过滤以后才能混合，万一要混合后过滤的话，只能用有机的，绝对不能用水系的。因为水系的材料是纤维素，有机相回或多或少的溶解一点纤维素的，造成污染。二、标样或样品最好用流动相溶解(排除特殊情况)，可以避免很多麻烦。三、给色谱柱加温，温度升高的目的，部分在于增加溶质的溶解度，但更重要的是降
流动相只有AB吗
甲醇和水相做流动相的时候的确有点说法，就是甲醇的比例比较大的时候和水的比例比较大的时候，色谱压力都比较低，只有在二者比例接近1：1的时候压力是最大的。举个我以前做方法开发的压力数据吧：C18柱250的柱长，4.6内径，5UM的粒度，25度柱温。
流动相体积怎么算
要是完全分离,分离度=1.5.由于知道了容量因子,分配比,那么由公式可以计算出要使两种物质完全分离的柱长要达到2.61M
如何获得梯度流动相？
获得梯度流动相的方式有两种，一种为低压梯度混合，另一种为高压梯度混合。
色谱柱的流动相
1、在进行样品检测前，至少使用20倍柱体积流动相使色谱柱充分平衡。流动相一定要使用色谱级别的溶剂。如使用水相的缓冲液应当天配制以保持新鲜避免细菌产生。2、流动相使用前需用微孔滤膜过滤,消除流动相中颗粒对色谱系统和色谱柱的损坏。缓冲液与其他流动相混合后应重新过滤避免溶解度变化造成产生新的沉淀。不应使用
色谱流动相如何调整？
色谱流动相如何调整？还在模棱两可的看过来 开发方法或方法验证时最重要的一步就是流动相的选择和比例的调整。我想大家肯定都遇到过分离度不好或峰形不好的情况，大部分原因就是流动相没调好，那到底该怎么调，怎么选择呢？看完下文可能你就知道答案了。 秘诀1：由强到弱 一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水
HPLC流动相如何选择
对于一般的反相柱，用甲醇/水或乙腈/水作流动相。甲醇/水作流动相时，如果得到的色谱图出的峰分的不完全，可以加大水的比例。如果出得峰太靠后而分离效果又不错，可加大甲醇的比例，可使峰出的早一些。对于一些难分离的物质，要选用乙腈/水作流动相。
流动相的选择原则
选择流动相时应考虑以下几个方面：1）流动相应不改变填料的任何性质。低交联度的离子交换树脂和排阻色谱填料有时遇到某些有机相会溶胀或收缩，从而改变色谱柱填床的性质。碱性流动相不能用于硅胶柱系统。酸性流动相不能用于氧化铝、氧化镁等吸附剂的柱系统。2）纯度。色谱柱的寿命与大量流动相通过有关，特别是当溶剂所含