做realtimePCR之前,你应该如何着手设计引物
正在着手做 real-time PCR 的朋友们,我想最开始肯定要考虑引物设计的问题。看完下面的文字,我保证你得到想要的引物设计方法和引物序列。第一步:拿到你所要研究的基因的序列。不要告诉我你不会找序列。如果真的不会,请参考丁香园内其他版块,如NCBI使用,序列查找等。第二步:确定你想用哪种方法。Taqman Probe 还是 SYBR 染料?两种方法各有利弊,这里不赘述,不明白的依然参见其他版块。但需要指出的是,后者在国内更常用,因为比较简单,容易操作,容易分析。建议初学者选择。第三步:动手设计引物1)两种引物设计软件。在设计 real-time PCR 引物时,常用的有非常 NB 的 primer premier 5.0 和 primer express 3.0 (升级版有5.0)。前者可以应用与常规PCR和real-time PCR;后者是ABI公司的real-time PCR仪器配套的引物设计软件,专......阅读全文
做HPLC或者紫外用DMSO做溶剂可以吗
做紫外的时候没有问题,拿dmso做参比就是了。做hplc的时候有点问题就是,dmso与流动相的相溶性问题,相容性不好,出的峰肯定很丑。
做科学-勇敢些
前段时间看到饶毅老师发的 “这是我们目前主流状况:冒险第一不行,第二很多”,我感觉很有意思。这句话看上去是在“骂人”,其实充满了赞扬,也包含着更高的期许。当然,在讨论前,我要把主题特异到“生物医学基础研究”这个方向,这个是我大体能懂的专业,也是一个非常大的且足够重要的领域。 先说“充满了赞扬”,
制氮机的做用
以空气为原料,l利用物理的方法,将其中的氧和氮分离而获得。 工业中有三种,即深冷空分法、分子筛空分法(PSA)和膜空分法
做科研,何苦之有
院士是我国科学技术界、工程技术界的杰出代表,是国家的财富、人民的骄傲、民族的光荣。2019年,中国科学院、中国工程院共新增院士139人,他们在数千万中国科技工作者中脱颖而出。《中国科学报》今起开设“走近新院士”栏目,讲述新晋院士的人生经历,探访其学术成就,使广大读者对顶尖科学家多一分了解,对科
莫做“冷美人”
相关调查研究显示,生活在温暖、阳光充足地区的女性寿命较长,而居住在气候凉爽地区的男性则活得更久,这一规律在全球范围内同样适用。之所以会得出这样的结果,是因为气候会影响人的心理和生理多个方面,进而影响寿命。 女人为了身体健康,最好不要做“冷美人”。中医认为,女人属阴,身体稍不注意便会偏寒、偏凉
做科学-勇敢些
前段时间看到饶毅老师发的 “这是我们目前主流状况:冒险第一不行,第二很多”,我感觉很有意思。这句话看上去是在“骂人”,其实充满了赞扬,也包含着更高的期许。当然,在讨论前,我要把主题特异到“生物医学基础研究”这个方向,这个是我大体能懂的专业,也是一个非常大的且足够重要的领域。 先说“充满了赞扬”
无需ROX校准的Azure-Cielo™-RealTime-PCR光学系统的应用
ROX是一种广泛使用的惰性荧光染料,通常添加到qPCR反应液中以校正荧光信号。然而,随着荧光技术在仪器中的发展,比如在Azure Cielo™实时荧光定量PCR系统,为了标准化而单独使用染料的步骤已不再需要。当实时荧光定量PCR系统首次引入市场时,许多产品使用固定光源和检测系统对96孔整板进行同
兰友科技:坚定原创路线土壤监测做宽做深
分析测试百科网讯 备受瞩目的第十九届北京分析测试学术报告会暨展览会(BCEIA 2021)在北京中国国际展览中心隆重召开。本次BCEIA是在双碳循环概念提出的大背景下,国内顶尖分析仪器行业专家、用户、制造厂商云集的一场行业盛会。北京兰友科技有限公司市场总监李雪在分析测试百科网直播间接受了采访,就
朱永官:从不同角度入手,做前人未做之事
无论从事什么科研工作,都要坚持为国家做事、为人民做事这一基本的原则。在科研工作中,我们要把个人成长融入国家命运和发展中去,永远怀有家国情怀,这样人生价值才能得到最大化的发挥。 今年8月,在英国格拉斯哥举行的2022年国际土壤科学联合会李比希奖颁奖仪式上,中国科学院院士、中国科学院城市环境研究所研
用定量菌种做无菌阳性,还每次做菌落计数吗
菌落总数并不表示样品中实际存在的所有细菌总数,菌落总数并不能区分其中细菌的种类,所以有时被称为杂菌数,需氧菌数等.而霉菌属于真菌,看你是用什么方法测定菌落总数的囖~
做电泳跑page、提取质粒、做WESTERN-BLOT时注意点
做电泳时注意容易出问题,以下问题要注意1. 跑page胶的时候小电压跑会避免高电压产生的热量尔导致的胶层变形。低电压泳道会比大电压泳道跑的直一些,且分离效果更高,有利于分子量相差不大的蛋白分离。2. 提取质粒的时候最后一步的酒精挥发很关键,基本上是其后续的酶切反应的决定性因素。所以这一步尽量挥发长一
国标做砷时用5%盐酸(优级纯)做载流问题
国标做砷时用5%盐酸(优级纯)做载流(即为空白),我试了多少次,空白荧光强度均太高,无法进行测定。现在只能改用3%硝酸。 1. 第一要选好的盐酸,第二器皿要严格洗涤,第三还原剂足量,就不会有什么问题了 2. 调节炉高可以改变空白荧光值 3. 除了灯的因素之外,主要是试剂中的As、Hg含量太高了
“80后”科学家钟南山:做科研上瘾,做医生上心
6月1日上午,北京会议中心。当钟南山院士走上主席台,从徐匡迪名誉主席手里接过光华工程科技奖成就奖时,参加中国工程院第13次院士大会的全体院士报以热烈的掌声。即将进入“80后”的钟南山,曾在13年前的SARS之战中一战成名,也曾因前些年反对烟草技术专家进入院士行列而备受瞩目。这位家喻户晓的科学家,
做溶解氧实验未做避光处理,会造成什么影响
溶于水中的氧称为溶解氧,当水受到还原性物质污染时,溶解氧即下降, 而有藻类繁殖时,溶解氧呈过饱和,因此,水中溶解氧的变化情况在一定程度上反映了水体受污染的程度。碘量法测定溶解氧的原理:在水中加入硫酸锰及碱性碘化钾溶液,生成氢氧化锰沉淀。此时氢氧化锰性质极不稳定,迅速与水中溶解氧化合生成锰酸锰: Mn
RTPCR内参基因选择:除了βactin还能用什么?
Q1: 要做real-time pcr,而该种的β-actin未确定,我知道一般用持家基因作内参,但似乎其他基因各有缺点,有的作者用他们做内参时被SCI杂志要求用两个内参以证实,我想知道的是除了β-actin,哪个基因是SCI公认的内参基因(不用作两个内参了)?A1: 28S和18S rRNA甘油醛
精液检查怎么做
精液检查的具体做法,精液标本采集前应禁欲2-7天,包括无性交、无手淫、无遗精。如果需要多次采集标本,每次禁欲时间尽可能一致。具体精液标本采集的方法包括手淫法、安全套法、体外射精法、电振动法、前列腺按摩法。在精液检查中应注意的事项有,采集标本后应立即送检并注明采集时间,30-60min内检测结果最
ogtt试验怎么做
解释一下 OGTT试验无法看出您糖尿病的分型,但是可以从中得出你自身血糖调节的能力。正规OGTT试验75g葡萄糖溶于200-300ml水中,于5分钟之内喝下,测空腹、半小时、 1、 2、3小时五次静脉血,然后看你血糖及胰岛素分泌能力。这个试验需要您前一天夜间12点之后不吃不喝,晨起空腹于医院做O
ogtt试验怎么做
解释一下 OGTT试验无法看出您糖尿病的分型,但是可以从中得出你自身血糖调节的能力。正规OGTT试验75g葡萄糖溶于200-300ml水中,于5分钟之内喝下,测空腹、半小时、 1、 2、3小时五次静脉血,然后看你血糖及胰岛素分泌能力。这个试验需要您前一天夜间12点之后不吃不喝,晨起空腹于医院做O
ogtt实验怎么做
ogtt实验:口服葡萄糖耐量试验,是指给成人口服75g无水葡萄糖,儿童按每公斤体重1.75g计算,总量不超过75g,然后测其血糖变化,观察病人耐受葡萄糖的能力,是目前公认的诊断糖尿病的金标准,在血糖异常增高但尚未达到糖尿病诊断标准时,为明确是否为糖尿病可以采用该试验。
怎么做细菌培养
细菌培养是一种用人工方法使细菌生长繁殖的技术。大多数细菌可用人工方法培养,即将其接种于培养基上,使其生长繁殖。培养出来的细菌用于研究、鉴定和应用。具体培养步骤:以光合细菌培养方法为例。光合细菌培养的方法,按次序分为容器、工具的消毒,培养基的制备,接种和培养管理四个步骤。(一)容器、工具的消毒参考、此
头痛应做哪些检查?
常规检验项目:1、三大常规。2、血沉及肝肾功能检查。3、比要是做脑脊液检查、磷酸组织胺皮内试验、脑超声检查、脑电图、脑诱发电位检查、X线检查、颈椎摄片、脑血管造影、CT、MRI等。鉴 别 疾 病:颅内病变、颅外病变、全身性疾病、神经官能症、偏头痛、紧张性头痛、痛性眼肌瘫痪。
我在清华做吉他
颜瑄在课程中 受访者供图 今年的春季学期,每逢周三下午,清华大学历史系大一学生颜瑄都会穿过校园长长的林荫小径,走到位于清华东南门附近的基础工业训练中心(简称训练中心)。在那里,她会在老师的指导下专心致志地切割、打磨、粘贴……经过一个学期的时间,制作一把像模像样的吉他。 颜瑄参加的是由训练
北京“做实”物联网
本报讯(记者贾中山)做大物联网,不能仅仅落实在研究层面,本市正在联合“外脑”以打造物联网产业。昨天下午,市经信委与中科院高技术局和北京邮电大学分别签署了战略合作协议,东城区和北京移动公司、朝阳区和京仪集团、朝阳区和时代凌宇公司等签署了物联网项目合作协议。 中科院高技术局称,在为期三年的时间
怎么做核酸检测
新冠病毒核酸检测方法,有实时荧光PCR法和等温扩增法,以实时荧光PCR为主,首先需要用核酸提取试剂,对患者标本进行病毒核酸提取,大概需要1个小时时间。核酸提取以后,再加上PCR扩增试剂,用实时荧光PCR仪,对提取核酸进行扩增检测,扩增时间大概2个小时左右。新冠病毒核酸检测,实验所用时间大概是4-6个
怎么做细菌培养?
细菌培养是一种用人工方法使细菌生长繁殖的技术。大多数细菌可用人工方法培养,即将其接种于培养基上,使其生长繁殖。培养出来的细菌用于研究、鉴定和应用。具体培养步骤:以光合细菌培养方法为例。光合细菌培养的方法,按次序分为容器、工具的消毒,培养基的制备,接种和培养管理四个步骤。(一)容器、工具的消毒参考、此
梯度PCR怎么做
温度梯度不是均匀分布,应该是两边变化慢,中间变化快,你可以设好梯度后查看一下。然后选5个接近的温度对应放置5个反应管
ogtt试验怎么做
解释一下 OGTT试验无法看出您糖尿病的分型,但是可以从中得出你自身血糖调节的能力。正规OGTT试验75g葡萄糖溶于200-300ml水中,于5分钟之内喝下,测空腹、半小时、 1、 2、3小时五次静脉血,然后看你血糖及胰岛素分泌能力。这个试验需要您前一天夜间12点之后不吃不喝,晨起空腹于医院做O
ogtt实验怎么做
ogtt实验:口服葡萄糖耐量试验,是指给成人口服75g无水葡萄糖,儿童按每公斤体重1.75g计算,总量不超过75g,然后测其血糖变化,观察病人耐受葡萄糖的能力,是目前公认的诊断糖尿病的金标准,在血糖异常增高但尚未达到糖尿病诊断标准时,为明确是否为糖尿病可以采用该试验。
振动测试怎么做
振动测量 振动测量vibrationmeasurement 在现场或实验室对振动系统的实物或模型进行响应测量、动态特性参数测定以及载荷识别。其中响应测量包括位移、速度、加速度、应变、应力等;动态特性参数测定包括各阶模态频率、模态阻尼、系统频率响应或脉冲响应等;载荷识别或振动环境描述包括脉冲载荷或
贫血需做哪些检查?
贫血是一种症状,许多疾病都可出现贫血。什么是贫血呢?贫血是指循环中的红细胞数量或血红蛋白的浓度低于正常标准。如血红蛋白(Hb)。110opog/L,为轻度贫血;Hb。90to0卯。为中度贫血;m布小批g。L为重度贫血;H卜*0外为极重度贫血。如果你面色看上去比较苍白或苍黄,只能说你可能有贫血,要彻底