高效液相色谱常见故障的判定及解决方法
故障 可能原因 解决方法 (一) 保留时间变化 1 柱温变化 柱恒温，必要时需配置恒温箱 2 等度与梯度间未能充分平衡 至少用10倍柱体积的流动相平衡柱 3 缓冲液容量不够 用>25mmol/L的缓冲液 4 柱污染 每天冲洗柱 5 柱内条件变化 稳定进样条件，调节流动相 ......阅读全文
超高效液相色谱相比高效液相色谱有哪些提升
超高效液相色谱（Ultra Performance Liquid Chromatography，UPLC）借助于HPLC（高效液相色谱）的理论及原理，涵盖了小颗粒填料、非常低系统体积及快速检测手段等全新技术，增加了分析的通量、灵敏度及色谱峰容量。 超高效液相色谱法的原理与高效液相色谱法基本
超高效液相色谱相比高效液相色谱有哪些提升
超高效液相色谱（Ultra Performance Liquid Chromatography，UPLC）借助于HPLC（高效液相色谱）的理论及原理，涵盖了小颗粒填料、非常低系统体积及快速检测手段等全新技术，增加了分析的通量、灵敏度及色谱峰容量。 超高效液相色谱法的原理与高效液相色谱法基本
制备型高效液相和分析型高效液相的相同点
制备型高效液相和分析型高效液相的相同点：制备液相的就是放大版的分析型液相，可以提供更大流速，更大的进样量。
分析型高效液相色谱和制备型高效液相色谱的区别
是的,两者有关也没关,制备液相一般是中药用的,差别在于精密度和载样量上,普通液相接上制备柱就是制备液相
高效液相色谱串联质谱和高效液相色谱质谱法的区别
两个的区别是质谱部分不同，串联质谱的质谱部分是多级的，而后者是一级的。
高效液相色谱串联质谱和高效液相色谱质谱法的区别
两个的区别是质谱部分不同，串联质谱的质谱部分是多级的，而后者是一级的。
高效液相色谱的流动相要点
流动相溶剂的选择1）所选用的流动相溶剂要有一定的化学稳定性，不与固定相和样品组分起反应，其纯度和化学特性必须满足色谱过程的稳定性和重复性的要求。2）溶剂应当不干扰检测器的工作，溶剂应与检测器匹配，选择不影响检测器正常工作应选择在测定波长范围内无吸收的流动相。3）在制备分离中，溶剂应当易于除去，不干扰
高效液相色谱流动相如何脱气
高效液相色谱仪（HPLC）现已成为有机化学分析的重要手段之一。同样，在食品分析中，无论是残留分析还是成分分析，HPLC也已成为不可或缺的分析仪器。和其它分析仪器一样，你若想让HPLC很好地为你工作、得到可靠的数据，首先你要保养好它，使它处于一个良好的待机状态，这样你操作它进行分析时就可以比较顺利地获
液质联用仪高效液相系统
高效液相系统高效液相色谱仪一般包括四个部分：高压输液系统、进样系统、分离系统和检测系统。此外，还可以根据一些特殊的要求，配备一些附属装置，如梯度洗脱、自动进样及数据处理装置等。
液相色谱的分类和高效液相色谱用途
制备型加压液相色谱，按照色谱柱和样品量的大小，分为：（1）低压液相色谱；（2）中压液相色谱；（3）高压液相色谱；（4）快速色谱。低压、中压与高压液相色谱的压力范围之间会存在一定交叠，没有统一、明确的标准。 1、快速色谱 柱压通常为2bar（或30psi）左右，对于那些容易分离的简单混
高效液相色谱的应用
关于高效液相色谱的应用回答如下：一、分离混合物高效液相色谱法只要求样品能制成溶液，不受样品挥发性的限制，流动相可选择的范围宽，固定相的种类繁多，因而可以分离热不稳定和非挥发性的、离解的和非离解的以及各种分子量范围的物质。通过与试样预处理技术相配合，高效液相色谱法所达到的高分辨率和高灵敏度，可分离并同
高效液相层析的概述
70年代新发展的层析法。其特点是：用高压输液泵，压强最高可达5000psi（相当于34个标准大气压）。用直径约3～10微米的超细支持物装填均匀的不锈钢柱。常用的支持物是在玻璃小珠上涂一层1～2微米的二氧化硅，经硫酰氯反应生成Si—Cl，进一步连接疏水的烷基，如Si—C18H37，或阳离子交换基团
高效液相色谱使用步骤
高效液相色谱仪操作步骤如下：1)． 过滤流动相，根据需要选择不同的滤膜.2)． 对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。3)． 打开hplc工作站（包括计算机软件和色谱仪），连接好流动相管道，连接检测系统。4)． 进入hplc控制界面主菜单，点击manual，进入手动菜单。5)． 有一段时间没用
反相高效液相色谱概述
结果与保留值之间的关系：利用RP-HPLC 分离多肽首先得确定不同结构的多肽在柱上的保留情况。为了获得一系列的保留系数，Wilce 等利用多线性回归方法对2106 种肽的保留性质与结构进行分析，得出了不同氨基酸组成对保留系数影响的关系，其中极性氨基酸残基在2～20 氨基酸组成的肽中，可减少在柱上
高效液相色谱故障排除
注意：在对NH2改性的色谱柱进行再生时，由于NH2可能成铵根离子的形式存在，因此应该在水洗后用0.1M的氨水冲洗，然后再用水冲洗至碱溶液完全流出。如果简单的有机溶剂/水的处理不能够完全洗去硅胶表面吸附的杂质，用0.05M稀硫酸冲洗非常有效。色谱柱的维护1．使用预柱保护分析柱（硅胶在极性流动相/离子性
反相高效液相色谱3
方案3 不易分离的大分子量多肽的纯化实验实验材料大分子量非极性多肽或蛋白质仪器、耗材层析柱HPLC 系统冷冻干燥器微量离心机标准的或专用 HPLC 仪器氮气实验步骤一、用于 RP-HPLC 纯化的大分子非极性多肽或蛋白质样品的制备1.将多肽样品（如果蛋白质是通过固相化学合成法得到的，质量在 30~5
高效液相色谱的类型
1．吸附色谱法(Absorption Chromatography)2．分配色谱法(Partition Chromatography)3．离子色谱法(Ion Chromatography)4．分子排阻色谱法/凝胶色谱法(Size Exclusion Chromatography)5．键合相色谱法（b
反相高效液相层析实验
实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 TFA乙腈盐酸胍仪器、耗材 层析柱HPLC进样器实验步骤 1. 用经脱气的HPLC级水洗去反相柱的有机溶剂，梯度从100%有机溶剂到100%水，流速1 ml/min，持续15 min 以上。 2. 以100%的TFA/乙腈缓冲液平衡柱子至柱压和光吸收值达到恒定。用1
反相高效液相色谱6
方案6 计算机辅助方法优化梯度条件的 RP-HPLC 蛋白质分离实验实验材料HPLC 肽标准品蛋白质样品试剂、试剂盒丙酮乙腈（HPLC级）磷酸磷酸二氢钠硫脲硝酸钠三氟乙酸仪器、耗材分析型 HPLC 装置色谱柱洗脱液瓶Hamilton 玻璃注射器氮气量筒微量离心机流动相过滤装置实验步骤一、配制流动相以
高效液相色谱知识（二）
正相色谱法 采用极性固定相（如聚乙二醇、氨基与腈基键合相）；流动相为相对非极性的疏水性溶剂（烷烃类如正已烷、环已烷），常加入乙醇、异丙醇、四氢呋喃、三氯甲烷等以调节组分的保留时间。常用于分离中等极性和极性较强的化合物（如酚类、胺类、羰基类及氨基酸类等）。反相色谱法 一般用非极性固定相（如C18、C8
高效液相色谱的优势
高效液相色谱（High Pe-rformance Liauid Chromatography，HPLC）的主要优点是：⑴分辩率高于其它色谱法；⑵速度快，十几分钟到几十分钟可完成；⑶重复性高；⑷高效相色谱柱可反复使用；⑸自动化操作，分析精确度高。根据分离过程中溶质分子与固定相相互作用的差别，高效液相色
高效液相色谱怎么分析
计算含量的方法很多：面积归一化法,外标法,内标法常用的：面积归一化法那很简单,配制一个供试品,进样分析.一个色谱峰代表一个物质,最大的那个通常是你的主峰,其余的基本都是杂质.杂质（%）=杂质的峰面积/主峰峰面积*100%（这个数值在你的分析报告中应该可以看到）如果是外标法或者内标法,你需要有对照品.
高效液相色谱定性方法
与气相色谱相比，高效液相色谱定性的难度更大。HPLC过程中影响待测组分迁移的因素较多，同一组分在不同色谱条件下的保留值可能相差很大。即便在相同的操作条件下，同一组分在不同色谱柱上的保留值也可能有很大差别。因此，在高效液相色谱分析过程中，对定性分析方法提出了更高的要求。 （1）利用检测器的选择性进
高效液相色谱怎么分析
计算含量的方法很多：面积归一化法,外标法,内标法常用的：面积归一化法那很简单,配制一个供试品,进样分析.一个色谱峰代表一个物质,最大的那个通常是你的主峰,其余的基本都是杂质.杂质（%）=杂质的峰面积/主峰峰面积*100%（这个数值在你的分析报告中应该可以看到）如果是外标法或者内标法,你需要有对照品.
高效液相色谱故障排除
注意：在对NH2改性的色谱柱进行再生时，由于NH2可能成铵根离子的形式存在，因此应该在水洗后用0.1M的氨水冲洗，然后再用水冲洗至碱溶液完全流出。 如果简单的有机溶剂/水的处理不能够完全洗去硅胶表面吸附的杂质，用0.05M稀硫酸冲洗非常有效。 色谱柱的维护 1．使用预柱保护分析柱（
高效排阻液相色谱
高效排阻液相色谱又叫体积排阻色谱（ SEC），分子筛色谱，凝胶过滤等，生化界常用凝胶过滤。SEC是一种纯粹按照溶质分子在流动相溶剂中的体积大小分离的色谱法，填料具有一定范围的孔尺寸，大分子进不去而先流出色谱柱，小分子后流出。用于生物大分子分离的传统SEC填料主要是多糖聚合物软胶，只能在低压下作慢速分
高效液相色谱的应用
例一、磺胺分析样 品：磺胺、磺胺嘧啶、磺胺甲基异噁唑和甲氧苄氨嘧啶的混合物色谱仪：“南京科捷LC600”液相色谱仪，740色谱数据处理机检测器：UV 481型紫外检测器，波长240nm色谱柱：μ-Bondapak C18 , 5μm，柱长25 cm，柱径4.6 mm流动相：由KH2PO4（0.05
高效液相色谱使用步骤
高效液相色谱仪操作步骤如下：1)． 过滤流动相，根据需要选择不同的滤膜.2)． 对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。3)． 打开hplc工作站（包括计算机软件和色谱仪），连接好流动相管道，连接检测系统。4)． 进入hplc控制界面主菜单，点击manual，进入手动菜单。5)． 有一段时间没用
高效液相色谱使用步骤
高效液相色谱仪操作步骤如下：1)． 过滤流动相，根据需要选择不同的滤膜.2)． 对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。3)． 打开hplc工作站（包括计算机软件和色谱仪），连接好流动相管道，连接检测系统。4)． 进入hplc控制界面主菜单，点击manual，进入手动菜单。5)． 有一段时间没用
高效液相色谱串联质谱法
动物源性食品等不同基质中糖皮质激素类药物的检测方法主要采用液相色谱法（HPLC）、液质联用法（LC-MS 或LC-MS/MS）和气质联用法（GC-MS）。实验方法原理糖皮质激素是由肾上腺皮质分泌的一类甾体激素，具有调节糖、脂肪和蛋白质的生物合成和代谢的作用，还具有抗炎作用，称其为“糖皮质激素”是因为