凝胶色谱仪工作原理
凝胶色谱仪是根据样品分子尺寸大小进行分离。凝胶色谱仪色谱柱的填料是凝胶,凝胶表面呈惰性,含有许多不同尺寸的孔穴。凝胶的孔穴仅允许直径小于孔径的组分分子进入,这些孔对于流动相分子来说是相当大的,以致流动相分子可以自由地扩散出入。不同大小的组分分子可以分别渗入到凝胶孔穴的不同深度,大的组分分子可以渗入到凝胶的大孔内,但进不了小孔甚至被完全排斥。小的组分分子,大孔和小孔都可以渗入,甚至进入很深,一时不易洗脱出来。大的组分分子在色谱柱中停留时间较短,很快被洗脱出来,洗脱体积很小。小的组分分子在色谱柱中停留时间较长,洗脱体积较大,直到所有孔内的最小分子到达色谱柱出口,完成按分子大小的分离过程。凝胶色谱仪广泛用于大分子的分级,即分析大分子物质相对分子质量的分布。......阅读全文
凝胶色谱的原理
凝胶色谱,又称为分子排阻色谱,其分离物质的原理为分子筛原理,且多用于分离有机大分子化合物,如蛋白质、多肽、多糖等.分子筛效应:一个含有各种分子的样品溶液缓慢地流经凝胶色谱柱时,各分子在柱内同时进行着两种不同的运动,垂直向下的移动和无定向的扩散运动.大分子物质由于直径较大,不易进入凝胶颗粒的微孔,而只
凝胶色谱的原理
凝胶色谱的原理比较特殊,类似于分子筛。待分离组分在进入凝胶色谱后,会依据分子量的不同,进入或者不进入固定相凝胶的孔隙中,不能进入凝胶孔隙的分子会很快随流动相洗脱,而能够进入凝胶孔隙的分子则需要更长时间的冲洗才能够流出固定相,从而实现了根据分子量差异对各组分的分离。调整固定相使用的凝胶的交联度可以调整
凝胶色谱重要参数
⑴柱体积:柱体积是指凝胶装柱后,从柱的底板到凝胶沉积表面的体积。在色谱柱中充满凝胶的部分称为凝胶床,因此柱体积又称“床”体积,常用Vt 表示。⑵外水体积:色谱柱内凝胶颗粒间隙,这部分体积称外水体积,亦称间隙体积,常用Vo表示。⑶内水体积:因为凝胶为三维网状结构,颗粒内部仍有空间,液体可进入颗粒内部,
凝胶过滤色谱柱
凝胶过滤色谱柱如多糖类化合物。凝胶的代表是葡萄糖系列,洗脱溶剂主要是水。凝胶渗透色谱法主要用于有机溶剂中可溶的高聚物 (聚苯乙烯、聚氯已烯、聚乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯等) 相对分子质量分布分析及分离,常用的凝胶为交联聚苯乙烯凝胶,洗脱溶剂为四氢呋喃等有机溶剂。凝胶色谱不但可以用于分离测定高聚物的相对分
关于凝胶色谱法凝胶种类的介绍
1、凝胶色谱法—聚丙烯酰胺凝胶 是一种人工合成凝胶,是以丙烯酰胺为单位, 由甲叉双丙烯酰胺交联成的,经干燥粉碎或加工成形制成粒状,控制交联剂的用量可制成各种型号的凝胶。交联剂越多,孔隙越小。聚丙烯酰胺凝胶的商品为生物胶-P (Bio-Gel P),由日本tosoh的TSKGEL的pw系列,适合
凝胶色谱法的凝胶种类及性质
⑴Sephadex G交联葡聚糖的商品名为Sephadex,不同规格型号的葡聚糖用英文字母G表示,G后面的阿拉伯数为凝胶得水值的10倍。例如,G-25为每克凝胶膨胀时吸水2.5克,同样G-200克每克干胶吸水20克。交联葡聚糖凝胶的种类有G-10,G-15,G-25,G-50,G-75,G-100,
凝胶色谱仪分类
凝胶色谱仪分类有多种。1、按分离目的可分:化验室凝胶色谱仪和工业凝胶色谱仪。2、按功能可分:分析型凝胶色谱仪和制备型凝胶色谱仪。3、按结构可分:台式凝胶色谱仪和落地式凝胶色谱仪。4、按分离规模可分:微型凝胶色谱仪、小型凝胶色谱仪和大型凝胶色谱仪。5、按用途可分:生物凝胶色谱仪、制药凝胶色谱仪、化工凝
凝胶色谱法原理
凝胶色谱法原理 :凝胶色谱法的固定相为多孔性凝胶类物质,流动相为水溶液或有机溶剂,它是根据不同组分分子体积的大小进行分离的。小分子可以扩散到凝胶空隙,由其中通过,出峰最慢;中等分子只能通过部分凝胶空隙,中速通过;而大分子被排斥在外,出峰最快;溶剂分子小,故在最后出峰。全部在死体积前出峰;可对相对分
凝胶色谱法原理
凝胶色谱法原理在凝胶色谱中会有三种情况,一是分子很小,能进入分子筛全部的内孔隙;二是分子很大,完全不能进入凝胶的任何内孔隙;三是分子大小适中,能进入凝胶的内孔隙中孔径大小相应的部分。大、中、小三类分子彼此间较易分开,但每种凝胶分离范围之外的分子,在不改变凝胶种类的情况下是很难分离的。对于分子大小不同
TSK凝胶色谱柱简介
TOSOH公司是世界上专门从事生产生物样品分离介质的公司之一,其最著名的产品是TSK-GEL色谱柱及其填料,已经在世界范围内非常多的实验室和工厂使用。大量的数据表明该产品非常适合生物及相关样品的分析分离。 TSK-GEL SW系列凝胶色谱柱 TSK-GEL SW系列色谱柱的填料是以刚性的球形硅胶为基
凝胶渗透色谱的发展
凝胶渗透色谱(Gel Permeation Chromatography,GPC)是20世纪60年代发展起来的一种分离技术,它是液相分配色谱的一种。凝胶渗透色谱的分离基础是溶液中溶质分子的体积(即流体力学体积)大小不同。溶质分子的淋洗体积(即在色谱柱中的保留体积)主要取决于分子尺寸、填料孔径、孔度和
凝胶渗透色谱的诞生
凝胶渗透色谱的发展历史最早可以追溯到1925年,Lugere在研究黏土对离子的吸附作用时,发现有可能按离子体积大小把它们分开·这一发现迈出了分子筛和离子交换法分离的重要一步;1926年,Mcbain利用人造沸石成功地分离气体分子和低分子量的有机化台物;1930年.Friedman将琼脂凝胶用于分离
凝胶渗透色谱研究体系
在非水体系方面的凝胶渗透色谱,由于填料、检测、输液等方面的技术还相当落后,特别是当时还没有研制出适用于有机溶剂体系的填料,因而该技术并没有取得多大的进展。直到1964年,Moore在总结了前人经验和结合大网状结构离子交换树脂制备经验的基础上,在各种稀释剂存在下,以苯乙烯和二乙烯基苯共聚制成了一系列7
SRT凝胶色谱柱特点
SRT凝胶色谱柱特点:● 高柱容量、高分辨率● 宽的pH范围 (pH范围2-8.5)● 使用寿命长● 低盐浓度洗脱,适合LC-MS分析● 对于生物样品无强吸附● 极低的非特异性吸附, 高的蛋白回收率及活性回收率● 解决多维色谱分析应用
凝胶渗透色谱的应用
凝胶色谱不但可以用于分离测定高聚物的相对分子质量和相对分子质量分布,同时根据所用凝胶填料不同,可分离脂溶性和水溶性物质,分离相对分子质量的范围从几百万到100以下。近年来,凝胶色谱也广泛用于小分子化合物。相对分子质量相近而化学结构不同的物质,不可能通过凝胶渗透色谱法达到完全分离纯化的目的。凝胶色谱不
凝胶渗透色谱的优点
(1)全部组分均在溶剂分子洗脱之前洗脱下来,分离时间短。 (2)可以预测洗脱时间,可以连续进样。 (3)凝胶色谱的分离过程不依靠分子间作用力,一般情况下,没有强保留的分子累积在色谱柱,所以分离时试样组分不会丢失,柱的使用寿命也会延长。 (4)保留时间短,色谱峰窄,容易检测。
凝胶色谱柱清洗方法
亲水性乙烯基树脂基质蛋白分离用色谱柱,除了可选用键合了离子交换基团的离子交换柱外,还可选用疏水反应、亲和等其他多种类型的柱子。 这些类型的色谱柱,其充填介质化学稳定性好,不易发生由于官能基脱落而导致样品组分洗脱位置变化的现象。尽管如此,由于柱子的反复使用,在长时间使用后,样品组分的洗脱情况
凝胶色谱柱清洗方法
亲水性乙烯基树脂基质蛋白分离用色谱柱,除了可选用键合了离子交换基团的离子交换柱外,还可选用疏水反应、亲和等其他多种类型的柱子。 这些类型的色谱柱,其充填介质化学稳定性好,不易发生由于官能基脱落而导致样品组分洗脱位置变化的现象。尽管如此,由于柱子的反复使用,在长时间使用后,样品组分的洗脱情况还
凝胶色谱法介绍
凝胶色谱法又叫凝胶色谱技术,是六十年代初发展起来的一种快速而又简单的分离分析技术,由于设备简单、操作方便,不需要有机溶剂,对高分子物质有很高的分离效果。凝胶色谱法又称分子排阻色谱法。凝胶色谱法主要用于高聚物的相对分子质量分级分析以及相对分子质量分布测试。根据分离的对象是水溶性的化合物还是有机溶剂可
凝胶色谱净化联用技术
基质比较复杂或者含有杂质较多的样本(如含有大量的油脂,色素,生物碱等),经过凝胶色谱净化虽然可以除去大部分大分子杂质,但是,与农药分子大小相近的杂质却无法去除,对剩余的这一部分杂质需要使用其它净化技术进一步挣化,以防止杂质污染进样口或柱头,或者杂质占据分析系统中的活性点,导致色谱分离能力降低、干
凝胶色谱仪概述
凝胶色谱属于液相色谱,它是按被分析混合物不同组分分子大小的不同进行分离的,多用于高聚物的分析。它以液体做流动相,以多孔固体做固定相,其中孔是有一定尺寸限制的,而且大小不一。 它的分离过程是在装有多孔固定相的色谱柱中进行的。当尺寸大小不同的分子通过色谱柱时,可占据的窨体积也不同对流动相分子而言,填料孔
凝胶色谱仪简介
凝胶色谱仪是依据分子尺寸大小差异进行分离的液相色谱仪,可分为凝胶渗透色谱仪和凝胶过滤色谱仪。一、凝胶渗透色谱仪(GPC):1、固定相:苯乙烯-二乙烯基苯共聚物。2、流动相:以有机溶剂为流动相,如四氢呋喃(THF)和二甲基甲酰胺(DMF)等。3、应用:主要用于聚合物领域。二、凝胶过滤色谱仪(GFC):
凝胶色谱法简介
凝胶色谱技术是六十年代初发展起来的一种快速而又简单的分离分技术,由于设备简单、操作方便,不需要有机溶剂,对高分子物质有很高的分离效果。目前已经被生物化学、分子生物学、生物工程学、分子免疫学以及医学等有关领域广泛采用,不但应用于科学实验研究,而且已经大规模地用于工业生产。 一、基本理论
TSK凝胶色谱柱简介
TOSOH公司是世界上专门从事生产生物样品分离介质的公司之一,其最著名的产品是TSK-GEL色谱柱及其填料,已经在世界范围内非常多的实验室和工厂使用。大量的数据表明该产品非常适合生物及相关样品的分析分离。TSK-GEL SW系列凝胶色谱柱TSK-GEL SW系列色谱柱的填料是以刚性的球形硅胶为基质,
凝胶色谱的分离原理
一个含有各种分子的样品溶液缓慢地流经凝胶色谱柱时,各分子在柱内同时进行着两种不同的运动:垂直向下的移动和无定向的扩散运动。大分子物质由于直径较大,不易进入凝胶颗粒的微孔,而只能分布颗粒之间,所以在洗脱时向下移动的速度较快。小分子物质除了可在凝胶颗粒间隙中扩散外,还可以进入凝胶颗粒的微孔中,即进入
凝胶色谱的实验技术
层析柱 层析柱是凝胶层析技术中的主体,一般用玻璃管或有机玻璃管。层析柱的直径大小不影响分离度,样品用量大,可加大柱的直径,一般制备用凝胶柱,直径大于2厘米,但在加样时应将样品均匀分布于凝胶柱床面上。此外,直径加大,洗脱液体体积增大,样品稀释度大。分离度取决于柱高,为分离不同组分,凝胶柱床必须有
凝胶色谱的研究动向
凝胶色谱的大量研究工作仍是多方面的,其中仪器、填料、联用技术、色谱理论等方面的进展是和整个液体色谱的进展相关的。但是下面四个研究动向意义较大,值得注意。 通过与其他仪器联用,解决凝胶色谱法测定高聚物分子量分布从相对法向绝对法过渡。测定高聚物分子量分布是凝胶色谱最重要的应用。试样先根据分子体积(
凝胶色谱法分类
凝胶过滤色谱: 凝胶过滤色谱一般用于分离水溶性的大分子,如多糖类化合物。凝胶的代表是葡萄糖系列,洗脱溶剂主要是水。 凝胶渗透色谱: 凝胶渗透色谱法主要用于有机溶剂中可溶的高聚物(聚苯乙烯、聚氯已烯、聚乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯等)相对分子质量分布分析及分离,常用的凝胶为交联聚苯乙烯凝胶,洗脱溶
凝胶色谱法原理
凝胶色谱法又称体积排阻色谱法,使用水溶液流动相的称为凝胶过滤色谱,使用有机溶剂流动相的称为凝胶渗透色谱。凝胶色谱的固定相是多孔物质,如多孔凝胶、交联聚苯乙烯、多孔玻璃及多孔硅胶等。试样是按照其中各组分分子大小的不同而分离的。大于填料微孔的分子,由于不能进入填料微孔,而直接通过柱子,Z先流出柱外,
凝胶渗透色谱分离原理
分离原理凝胶具有化学惰性,它不具有吸附、分配和离子交换作用。让被测量的高聚物溶液通过一根内装不同孔径的色谱柱,柱中可供分子通行的路径有粒子间的间隙(较大)和粒子内的通孔(较小)。当聚合物溶液流经色谱柱(凝胶颗粒)时,较大的分子(体积大于凝胶孔隙)被排除在粒子的小孔之外,只能从粒子间的间隙通过,速率较