高效液相色谱仪中气泡对检测的影响及解决方法
高效液相色谱仪中若存在气泡,会造成色谱图出现尖锐的噪声峰,严重时会造成分析灵敏度下降;气泡变大进入流路或色谱柱时,会使流动相的流速变慢或不稳定,使基线起伏。造成上述现象的主要原因有:1、流动相中因混入了空气而形成气泡。2、系统开始工作时未能将流路中的空气驱赶干净。3、在注入样品时不注意混入了空气。为了避免这类问题的出现,高效液相色谱仪分析过程中必须对流动相进行脱气处理。常用的脱气方法有:1、吹氦脱气法。2、加热回留法。3、超声波脱气法。4、抽真空脱气法。5、在线真空脱气法。 ......阅读全文
科普什么是色谱和色谱法?
什么是色谱?色谱的本质是一种分离分析方法。常见的分离方法有蒸馏、离心、电泳、过滤等。色谱是目前最有效的分离方法之一。色谱法的原理利用混合物中各组份在不同的两相中溶解、分配、吸附等性质的差异,当两相作相对运动时,使各组分在两相中反复多次受到各作用力而达到相互分离。两相中有一相是固定的,叫作固定相(St
液相色谱柱的色谱柱再生
液相色谱柱的色谱柱再生 液相柱是消耗品,会随使用时间或进样的次数增加,出现色谱峰高降低,峰宽加大或出现肩峰,柱效下降,需要定期进行彻底清洗和再生。 1、反相柱 分别用甲醇:水=90:10、纯甲醇、二氯甲烷等溶剂着流动相,依次冲洗,每种流动相流经色谱柱不少于20倍的色谱柱体积。然后再以相反的次
气相色谱和色谱理论的出现
1952年马丁和詹姆斯提出用气体作为流动相进行色谱分离的想法,他们用硅藻土吸附的硅酮油作为固定相,用氮气作为流动相分离了若干种小分子量挥发性有机酸。 气相色谱的出现使色谱技术从最初的定性分离手段进一步演化为具有分离功能的定量测定手段,并且极大的刺激了色谱技术和理论的发展。相比于早期的液相色谱,
正相色谱和反相色谱的区别
1、固定相不同:正相硅胶具有极性基的表面,而反相硅胶是经过改性,表面键合烷基链(例如 C-18),极性更小,因此对极性化合物有较小的保留。2、适用的样品类型不同:由于反相条件下,修饰了硅胶表面的羟基,使其极性降低,使得其适用性变得更加宽广(相对比反相而言),各类极性的大小分子,天然产物,都可以在反相
常见色谱仪的色谱分离原理
高效液相色谱法按分离机制的不同分为液固吸附色谱法、液液分配色谱法(正相与反相)、离子交换色谱法、离子对色谱法及分子排阻色谱法。 1.液固色谱法:使用固体吸附剂,被分离组分在色谱柱上分离原理是根据固定相对组分吸附力大小不同而分离。分离过程是一个吸附-解吸附的平衡过程。常用的吸附剂为硅胶或
液相色谱仪色谱柱的分类
色谱柱是液相色谱分离系统的核心,是不同样品分离的基础,也是主要的消耗品。一般来说,高效液相色谱仪分析是根据样品的性质来确定使用哪种高效液相色谱仪方法,然后选择不同类型的色谱柱,即不同类型的色谱柱代表不同的色谱方法。不同类型的液相色谱柱与柱结构和柱填充柱尺寸的差异是不同的。色谱柱有不同的尺寸,包括制备
色谱仪分析的色谱峰参数
色谱仪分析的色谱峰参数有色谱图、基线、基线噪声、基线漂移、色谱峰、峰高、峰宽、对称因子、峰面积、前延峰、拖尾峰、畸峰、反峰和假峰等。一、色谱图: 指色谱分析中,检测器输出的电信号强度对时间所绘制的曲线,又称色谱流出曲线。二、基线: 指色谱操作条件稳定后,仅
正相色谱和反相色谱的区别
1、固定相不同:正相硅胶具有极性基的表面,而反相硅胶是经过改性,表面键合烷基链(例如 C-18),极性更小,因此对极性化合物有较小的保留。2、适用的样品类型不同:由于反相条件下,修饰了硅胶表面的羟基,使其极性降低,使得其适用性变得更加宽广(相对比反相而言),各类极性的大小分子,天然产物,都可以在反相
液相色谱仪色谱柱填料选择
色谱柱可分为填充柱和开管柱两大类。多为金属或玻璃制作。有直管形、盘管形、U形管等形状。液相色谱通常均采用填充柱。而对于液相色谱而言,色谱填料的选择有时候恰恰决定了样品分析效果的好快。今天小编就围绕常见的色谱填料种类,讲解一下,应该如何针对仪器使用环境对色谱填料进行合适的选择。 硅胶填料
液相色谱仪色谱柱结构解析
色谱柱是液相色谱仪的核心部件,色谱柱的柱材料、柱结构、柱规格和柱连接方式等对分析起着关键作用。一、柱材料:色谱柱管常采用内壁经过精密加工抛光的不锈钢管,以获得高柱效。不锈钢管耐溶剂、水和缓冲溶液的腐蚀,使用前色谱柱管先用氯仿、甲醇和水依次清洗,再用50%的HNO3对柱内壁作钝化处理。钝化时使HNO3
液相色谱仪之色谱柱结构
液相色谱柱由柱管、压帽、卡套(密封环)、筛板(滤片)、接头、螺丝(封头)与柱填料等组成。柱管:多用不锈钢制成,若果使用时柱压不高于70kg/cm2时,也可采用厚壁玻璃或石英管,管内壁要求有很高的光洁度,用于柱填料的装填。空柱各组件均为不锈钢材质,能耐受一般的溶剂作用。但由于含氯化物的溶剂对其有一定的
气相色谱色谱柱的安装方法
一、进样应注意问题手不要拿注射器的针头和有样品部位、不要有气泡(吸样时要慢、快速排出再慢吸,反复几次,10ul注射器 金属针头部分体积0.6ul,有气泡也看不到,多吸1-2ul把注射器针尖朝上气泡上走到顶部再推动针杆排除气泡,(指10ul注射器,带芯子注射器平感觉)进样速度要快(但不易特快),每次进
色谱制样中纸色谱法
纸色谱法 以纸为载体,用单一溶剂或混合溶剂进行分配。亦即以纸上所含水分或其他物质为固定相,用流动相进行展开的分配色谱法。 所用滤纸应质地均匀平整,具有一定机械强度,必须不含会影响色谱效果的杂质,也不应与所用显色剂起作用,以免影响分离和鉴别效果,必要时可作特殊处理后再用。 试样经层析后可用比移
离子色谱与液相色谱的区别
离子色谱和液相色谱是分析仪器中重要的两种类型,都对支持于实际的科学检测中。但是,如何区分离子色谱和液相色谱呢?下面主要就气路、流路、流动相、试剂要求、色谱柱、抑制器、检测器和检测对象这几部分对这两者进行区分。离子色谱液相色谱气路(氮气或氦气)对用NaOH流动相,用于保护流动相以免同空气接触。其它系统
气相色谱色谱柱的安装方法
一、进样应注意问题手不要拿注射器的针头和有样品部位、不要有气泡(吸样时要慢、快速排出再慢吸,反复几次,10ul注射器 金属针头部分体积0.6ul,有气泡也看不到,多吸1-2ul把注射器针尖朝上气泡上走到顶部再推动针杆排除气泡,(指10ul注射器,带芯子注射器平感觉)进样速度要快(但不易特快)
色谱试剂与色谱纯试剂的区别
色谱试剂与色谱纯试剂是两个截然不同的概念,色谱纯是指试剂的纯度而色谱试剂是指试剂应用的对象。色谱纯试剂纯度发很高,除要求含量高以外,还对微尘、水分都有很高的要求,属于高纯试剂的范畴。而色谱试剂是指用于色谱分析、色谱分离、色谱制备的化学试剂。因色谱种类多,过程复杂,故又把色谱试剂分类成各种不同的色
常见色谱仪的色谱分离原理
高效液相色谱法按分离机制的不同分为液固吸附色谱法、液液分配色谱法(正相与反相)、离子交换色谱法、离子对色谱法及分子排阻色谱法。 1.液固色谱法:使用固体吸附剂,被分离组分在色谱柱上分离原理是根据固定相对组分吸附力大小不同而分离。分离过程是一个吸附-解吸附的平衡过程。常用的吸附剂为硅胶或
正相色谱和反相色谱的区别
1、固定相不同:正相硅胶具有极性基的表面,而反相硅胶是经过改性,表面键合烷基链(例如 C-18),极性更小,因此对极性化合物有较小的保留。2、适用的样品类型不同:由于反相条件下,修饰了硅胶表面的羟基,使其极性降低,使得其适用性变得更加宽广(相对比反相而言),各类极性的大小分子,天然产物,都可以在反相
反相色谱与正相色谱的差异
在液-固吸附色谱,,液-液分配色谱这两种液相色谱中才涉及到正相色谱及反相色谱。液-固吸附色谱(固定相是固体吸附剂,它是根据物质在固定相是吸附作用差异来分离的。吸附作用越强,K值越大,保留时间越长)液-液分配色谱(是将固定液涂在担体上作为固定相的,它的分离原理与液液萃取的原理相同,从而服从分配定律。在
液相色谱仪色谱柱的保养
正常情况下,液相色谱仪色谱柱至少可以使用3~6个月,能完成数百次分离。但若操作不慎,将很容易损坏色谱柱而不能使用。因此为了保持柱效、柱容量和渗透性,必须对色谱柱进行仔细保养。一、色谱柱的保护:1、流动相和样液都需用0.45um孔径的滤膜过滤。2、加3~5cm保护柱。3、进样阀进样。4、用纯甲醇保存色
什么是正相色谱和反相色谱
正相色谱基本上可以被看做是液固吸附色谱,其柱填料是吸附剂,其表面上分布有活性吸附位点,溶剂和溶质分子均能被吸附于活性位点上。由于相互作用力有大有小,溶剂分子与溶质分子、溶质分子相互之间又存在竞争吸附,从而造成了在柱内保留时间的差异,使不同物质得到分离。流动相极性大于固定相极性的情况,称为反相色谱。非
气相色谱和色谱理论的起源
1952年马丁和詹姆斯提出用气体作为流动相进行色谱分离的想法,他们用硅藻土吸附的硅酮油作为固定相,用氮气作为流动相分离了若干种小分子量挥发性有机酸。气相色谱的出现使色谱技术从最初的定性分离手段进一步演化为具有分离功能的定量测定手段,并且极大的刺激了色谱技术和理论的发展。相比于早期的液相色谱,以气体为
液相色谱仪色谱相关术语标准
校准(calibration)在规定条件下为确定测量仪器或测量系统的示值与被测量相对应的已知值之间关系的一组操作。
高效液相色谱仪的色谱介绍
(high performance liquid chromatography,HPLC)也叫高压液相色谱(high pressure liquid chromatography)、高速液相色谱(high speed liquid chromatography)、高分离度液相色谱(high re
液相色谱仪色谱柱的再生
液相色谱仪色谱柱长期使用后柱效会下降(色谱柱的理论塔板数减小),可对色谱柱进行再生。一、建议用来冲洗色谱柱的溶剂体积:1、Ф4×125mm色谱柱:柱体积为1.6mL,所用溶剂体积为30mL。2、Ф4×250mm色谱柱:柱体积为3.2mL,所用溶剂体积为60mL。3、Ф10×250mm色谱柱:柱体积为
正相色谱和反相色谱的区别
1、固定相不同:正相硅胶具有极性基的表面,而反相硅胶是经过改性,表面键合烷基链(例如 C-18),极性更小,因此对极性化合物有较小的保留。2、适用的样品类型不同:由于反相条件下,修饰了硅胶表面的羟基,使其极性降低,使得其适用性变得更加宽广(相对比反相而言),各类极性的大小分子,天然产物,都可以在反相
液相色谱柱的色谱柱再生
液相柱是消耗品,会随使用时间或进样的次数增加,出现色谱峰高降低,峰宽加大或出现肩峰,柱效下降,需要定期进行彻底清洗和再生。 1、反相柱 分别用甲醇:水=90:10、纯甲醇、二氯甲烷等溶剂着流动相,依次冲洗,每种流动相流经色谱柱不少于20倍的色谱柱体积。然后再以相反的次序冲洗。 2、正相柱
常见色谱仪的色谱分离原理
高效液相色谱法按分离机制的不同分为液固吸附色谱法、液液分配色谱法(正相与反相)、离子交换色谱法、离子对色谱法及分子排阻色谱法。 1.液固色谱法:使用固体吸附剂,被分离组分在色谱柱上分离原理是根据固定相对组分吸附力大小不同而分离。分离过程是一个吸附-解吸附的平衡过程。常用的吸附剂为硅胶或氧化铝
液相色谱仪色谱柱净化样品
用溶剂溶解的样品,多数组分在一定的时间内能完全从柱中流出来,不会造成危害。有些样品可能含有微粒物质,样品中的某种组分在柱头上沉积下来,组分子在固定相上保留很强,溶剂带走柱填料等,都会造成液相色谱仪色谱柱柱效下降或降低寿命,有必要采取措施防止色谱柱性能下降。如在光线照射下观察样品是浑浊的火带有乳白色,
液相色谱超临界流体色谱联用
当复杂样品中欲测组分不易挥发或热不稳定,用液相色谱初步分离后的欲测组分不能用气相色谱分析,则可用超监界流体色谱取代气相色谱,组成液相色谱-超临界流体色谱联用(LC-SFC)系统,其接口可采用液相色谱-气相色谱联用时的保留间隙技术,其典型流路如图11-4-30所示。1991年Moulder用此系统分析