液相色谱仪(HPLC)常出现的问题及解决方法

常见问题有:1.液体泄漏原因:更换色谱柱或过滤砂芯时没有拧紧处理方法:拧紧接头和下面的垫滤纸,检查液相操作时是否有液体泄漏。2.高气压原因:过滤砂芯或过滤烧结头堵塞;液相色谱柱筛板堵塞或固定相吸附污垢;肮脏的管道,长细菌处理方法:更换过滤砂芯或过滤烧结头;如果色谱柱使用时间过长,请更换液相色谱柱。洗涤线3.大基线噪声原因:液相色谱柱和脏流通池中有杂质处理方法:打开液相色谱柱出口端,冲洗液相色谱柱,冲洗污垢。4.压力指示不稳定,没有液体流过原因:大量气泡进入泵体处理方法:脱气时,使用注射器帮助抽出泵出口的空气。......阅读全文

液相色谱仪的选型(2.3)

3.阀进样。一般HPLC分析常用六通进样阀(以美国Rheodyne公司的7725和7725i型最常见),其关键部件由圆形密封垫(转子)和固定底座(定子)组成。由于阀接头和连接管死体积的存在,柱效率低于隔膜进样(约下降5~10%左右),但耐高压(35~40MPa),进样量准确,重复性好(0.5%),操

液相色谱仪的选型(2.4)

4.自动进样。用于大量样品的常规分析。

液相色谱仪的选型(3.1)

第三步:色谱柱的选择   色谱是一种分离分析手段,分离是核心,因此担负分离作用的色谱柱是色谱系统的心脏。对色谱柱的要求是柱效高、选择性好,分析速度快等。市售的用于HPLC的各种微粒填料如多孔硅胶以及以硅胶为基质的键合相、氧化铝、有机聚合物微球(包括离子交换树脂)、多孔碳等,其粒度一般为3,5,7

液相色谱仪的选型(3.2)

2.柱的发展方向   因强调分析速度而发展出短柱,柱长3~10cm,填料粒径2~3μm.为提高分析灵敏度,与质谱(MS)联接,而发展出窄径柱、毛细管柱和内径小于0.2mm的微径柱(microbore)。细管径柱的优点是:①节省流动相;②灵敏度增加;③样品量少;④能使用长柱达到高分离度;⑤容易控制

液相色谱仪的选型(3.3)

3.柱的填充和性能评价   色谱柱的性能除了与固定相性能有关外,还与填充技术有关。在正常条件下,填料粒度>20μm时,干法填充制备柱较为合适;颗粒

液相色谱仪的选型(4.1)

第四步:检测器的选择   检测器是HPLC仪的三大关键部件之一。其作用是把洗脱液中组分的量转变为电信号。HPLC的检测器要求灵敏度高、噪音低(即对温度、流量等外界变化不敏感)、线性范围宽、重复性好和适用范围广。   1.分类   1)按原理可分为光学检测器(如紫外、荧光、示差折光、蒸发光

液相色谱仪的选型(4.2)

2.性能指标   1)噪音和漂移:在仪器稳定之后,记录基线1小时,基线带宽为噪音,基线在1小时内的变化为漂移。它们反映检测器电子元件的稳定性,及其受温度和电源变化的影响,如果有流动相从色谱柱流入检测器,那么它们还反映流速(泵的脉动)和溶剂(纯度、含有气泡、固定相流失)的影响。噪音和漂移都会影响测

液相色谱仪的选型(5)

第五步:数据处理和计算机控制系统   早期的HPLC仪器是用记录仪记录检测信号,再手工测量计算。其后,使用积分仪计算并打印出峰高、峰面积和保留时间等参数。80年代后,计算机技术的广泛应用使HPLC操作更加快速、简便、准确、精密和自动化,现在已可在互联网上远程处理数据。计算机的用途包括三个方面:①

液相色谱仪的选型(6)

第六步:恒温装置   在HPLC仪中色谱柱及某些检测器都要求能准确地控制工作环境温度,柱子的恒温精度要求在±0.1~0.5℃之间,检测器的恒温要求则更高。   温度对溶剂的溶解能力、色谱柱的性能、流动相的粘度都有影响。一般来说,温度升高,可提高溶质在流动相中的溶解度,从而降低其分配系数K,但

高效液相色谱仪操作步骤

  1). 过滤流动相,根据需要选择不同的滤膜。  2). 对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。  3). 打开HPLC工作站(包括计算机软件和色谱仪),连接好流动相管道,连接检测系统。  4). 进入HPLC控制界面主菜单,点击manual,进入手动菜单。  5). 有一段时间没用,或者换

什么是制备液相色谱仪?

   制备型高效液相色谱仪通常都被认为和大容量色谱柱和高流速有关联的。然而并不是以设备的大小和系统消耗的流动相的多少来决定制备高效液相色谱,而是依据分离目的来决定。分析液相的目的是给一种组份进行定量和定性。制备液相的目的是对产品的单体进行提取和纯化。与传统的纯化方法(如蒸馏、萃取)比较,制备液相是一

制备液相色谱仪相关介绍

制备液相色谱仪相关介绍  由于液相色谱仪的溶质分子在流动相、静态流动相和固定相中的传质过程而导致的峰展宽.溶质分子在流动相和固定相中的扩散、分配、转移的过程并不是瞬间达到平衡,实际传质速度是有限的,这一时间上的滞后使色谱柱总是在非平衡状态下工作,从而产生峰展宽.液相色谱仪的灵敏度高,分析速度快,操作

生物制备液相色谱仪种类

生物制备液相色谱仪种类有多种。1、按分离目的可分:实验室生物制备液相色谱仪和工业生物制备液相色谱仪。2、按分离规模可分:小型生物制备液相色谱仪和大型生物制备液相色谱仪。3、按产地可分:国产生物制备液相色谱仪和进口生物制备液相色谱仪。4、按分离化合物的分子量可分:小分子生物制备液相色谱仪和大分子生物制

工业制备液相色谱仪分类

工业制备液相色谱仪分类有多种。1、按固定相和流动相的极性大小可分:正相工业制备液相色谱仪和反相工业制备液相色谱仪。2、按产地可分:国产工业制备液相色谱仪和进口工业制备液相色谱仪。3、按分离规模可分:小型工业制备液相色谱仪和大型工业制备液相色谱仪。4、按固定相性质可分:化学键合相工业制备液相色谱仪和硅

半制备液相色谱仪种类

半制备液相色谱仪种类有多种。1、按固定相和流动相的极性大小可分:正相半制备液相色谱仪和反相半制备液相色谱仪。2、按分离对象的属性可分:有机物半制备液相色谱仪和无机物半制备液相色谱仪。3、按产地可分:国产半制备液相色谱仪和进口半制备液相色谱仪。4、按分离规模可分:小型半制备液相色谱仪和大型半制备液相色

液相色谱仪的基本故障

1、柱压高原因    (1)缓冲液盐分如(乙酸铵等)沉积于柱内;    (2)样品污染沉积。处理对于*种情况先用40~50℃的纯水,低速正向冲洗柱子,待柱压逐渐下降后,相应提高流速冲洗,柱压大幅度下降后,用常温纯水冲洗,之后用纯甲醇冲洗液相色谱仪柱子30分钟;对于第二种情况,由样品的沉积引起污染

液相色谱仪(HPLC)的保养

HPLC为广大药学工作者日常工作中必不可少的仪器之一,由于其精度较高,对实验人员和实验室条件要求较高,因此保养也很重要,应引起注意:1.HPLC的日常操作条件:温度:10~30℃; 相对湿度

液相色谱仪的使用维护

 液相色谱仪使用完毕后还需要保养吗?答案是肯定的;    液相色谱仪作为实验室常见的一款仪器,不仅在使用时注意维护,在使用完毕后更要注意保养:    1、短期停机    在完成一天工作以后,都要停机等第二天再继续工作,则可按以下步骤停机。    A)关闭二次仪表(记录仪、积分仪或色谱工作站)。   

液相色谱仪的柱温

柱温是液相色谱仪的重要参数,控制柱温可提高保留时间的重现性。一般情况下,较高柱温能增加样品在流动相中的溶解度,缩短分析时间。升高柱温能增加柱效,提高分离效率。通常柱温升高6℃,组分保留时间减少约30%。分析高分子化合物或粘度大的样品时,柱温必须高于室温。分析具有生物活性的生物分子时,柱温应低于室温

液相色谱仪注意事项

  液相色谱是一类分离与分析技术,其特点是以液体作为流动相,固定相可以有多种形式,如纸、薄板和填充床等。在色谱技术发展的过程中.为了区分各种方法,根据固定相的形式产生了各自的命名,如,纸色谱、薄层色谱和柱液相色谱。   对液相色谱仪的要求   1.流动相必须用HPLC级的试剂,使用前过滤除去

判定液相色谱仪基本故障

由于液相色谱仪对高沸点、难气化合物的混合物通过色谱柱核淋洗剂并以实现分离。所以,能广泛应用于生物医学、环境化学、石油化工等部门,在操作液相色谱仪的过程中,可能会出现一些故障,我们怎么分辨这些故障产生的原因呢?1、柱压高原因(1)缓冲液盐分如(乙酸铵等)沉积于柱内;(2)样品污染沉积。处理对于这种情况

如何选购液相色谱仪?(一)

HPLC系统一般由输液泵、进样器、色谱柱、检测器、数据记录及处理装置等组成。其中输液泵、色谱柱、检测器是关键部件。有的仪器还有梯度洗脱装置、在线脱气机、自动进样器、预柱或保护柱、柱温控制器等,现代HPLC仪还有微机控制系统,进行自动化仪器控制和数据处理。制备型HPLC仪还备有自动馏分收集装置。  

如何选购液相色谱仪?(二)

3.柱的填充和性能评价   色谱柱的性能除了与固定相性能有关外,还与填充技术有关。在正常条件下,填料粒度>20μm时,干法填充制备柱较为合适;颗粒<20μm时,湿法填充较为理想。填充方法一般有4种:①高压匀浆法,多用于分析柱和小规模制备柱的填充;②径向加压法,WatersZL;③轴向加压法,主要

液相色谱仪的使用要点

    色谱法,又称“色层法”、“层析法”,早诞生于俄国植物学家——茨维特之手,后在此基础上又相继发展出薄层色谱法、气相色谱法、液相色谱法以及纸色谱法。目前,常见的液相色谱仪生产厂家有沃特世、安捷伦、岛津、依利特、上海分析仪器厂、北京分析仪器厂等。   在液相色谱仪开机前,我们首先应当做好准备工作,

快速检测液相色谱仪故障

    液相色谱系统在运行时间久了之后难免出现故障。某些简单故障,如接头漏了,紧一紧螺丝就可以了。而有些故障一时难以判断,如峰拖尾的问题,可能一时找不准原因。遵循有规则的模式解决问题,十分重要,而不是漫无目标地逐一检查每一个部件。   1.首先,故障发生后要对系统作一次快速的检查。沿着流动相存贮器经

液相色谱仪常用操作步骤

1)首先对流动相进行过滤,根据需要选择不同的滤膜,一般为有机系和水系,常用的孔径为0.20um和0.45um。2)对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。3)正常情况下,仪器首先用甲醇冲洗10-20分钟,然后再进入测试用流动相(如流动相为缓冲试剂,则要二次重蒸水冲洗10-20分钟,直至色谱柱中有

岛津公司的液相色谱仪

  通过高速进样及多样品处理大幅提高了分析效率的一体型HPLC。如果使用自动启动、停机功能、自动有效性功能,则可实现分析、管理自动化,进一步提高了生产效率。   另外,图解式画面和魔块功能使操作更为便利。   输液部:微冲程串联双柱塞方式,可梯度洗脱(定压混合方式)   进样部:进样速度:

如何正确选择液相色谱仪?

   在正确选择液相色谱仪方面,我们应该把握好方法,才能够选择到性价比合适的色谱仪,下面为您更好地了解和使用液相色谱仪:  如何看指标呢,液相色谱仪的指标很多,有泵的、检测器的、色谱柱等等。我们认为要看主要技术指标,根据国家标准,仪器的主要指标有噪音、漂移、最小检测浓度、定性定量重复性等。这些指标都

液相色谱仪都有哪些优势?

这是一种很常见的仪器。它可以检测各种液体及其成分。这些不同成分的液体进入仪器后会显示不同的状态。机器运行后,可以根据状态对其部件进行测试。如今,液相色谱仪已经得到了广泛的应用,其主要原理是液相色谱仪检测,根据这一原理,我们可以得到非常详细的检测内容。高效液相色谱法具有许多优点。我们在使用它时会发现这

外梯度液相色谱仪类型

外梯度液相色谱仪类型有多种。1、按功能可分:分析型外梯度液相色谱仪和制备型外梯度液相色谱仪。2、按分离目的可分:实验室外梯度液相色谱仪和工业外梯度液相色谱仪。3、按灵敏度可分:微量外梯度液相色谱仪和痕量外梯度液相色谱仪。4、按进样自动性可分:自动进样外梯度液相色谱仪和手动进样外梯度液相色谱仪。5、按