液相色谱仪(HPLC)常出现的问题及解决方法
常见问题有:1.液体泄漏原因:更换色谱柱或过滤砂芯时没有拧紧处理方法:拧紧接头和下面的垫滤纸,检查液相操作时是否有液体泄漏。2.高气压原因:过滤砂芯或过滤烧结头堵塞;液相色谱柱筛板堵塞或固定相吸附污垢;肮脏的管道,长细菌处理方法:更换过滤砂芯或过滤烧结头;如果色谱柱使用时间过长,请更换液相色谱柱。洗涤线3.大基线噪声原因:液相色谱柱和脏流通池中有杂质处理方法:打开液相色谱柱出口端,冲洗液相色谱柱,冲洗污垢。4.压力指示不稳定,没有液体流过原因:大量气泡进入泵体处理方法:脱气时,使用注射器帮助抽出泵出口的空气。......阅读全文
液相色谱仪响应值
响应值一般来说是峰面积,这是针对在一定的色谱条件下,某个物质在某个浓度下做液相色谱分析后出的峰面积,峰面积与浓度的比值叫响应因子,在一定前提下,响应因子是一个物质的特征常数。
液相色谱仪的使用步骤
目的:制定规范的高效液相色谱仪操作、维护保养和清洁规程。范围:适用于Agilent 1260 HPLC。责任:色谱检验工程师负责本规程执行。内容:1 开机1.1 打开电脑。1.2 打开液相色谱各个模块的电源。1.3 双击桌面“仪器—联机”,进入联机界面。1.4 排气:1.4.1 手动旋开泵处冲洗阀(
痕量高效液相色谱仪分类
痕量高效液相色谱仪分类有多种。1、按分离目的可分:痕量高效液相化验室色谱仪和痕量高效液相工业色谱仪。2、按固定相和流动相的极性大小可分:痕量高效液相正相色谱仪和痕量高效液相反相色谱仪。3、按分离原理可分:痕量高效液相吸附色谱仪、痕量高效液相分配色谱仪和痕量高效液相离子色谱仪。4、按色谱柱形状可分:痕
液相色谱仪的结构组成
一、液相色谱仪的组成 液相色谱仪是实现液相色谱分析的设备。液相色谱仪主要由贮液器、脱气器、高压泵、进样器、色谱柱和检测器等组成。 1、脱气器 脱气的目的是为了防止流动相从高压柱内流出时释放出气泡进入检测器而使噪声剧增,至使不能正常检测,一般情况下通常采用氦气鼓泡来驱除流动相中溶解的气体,因为氦
液相色谱仪维修小知识:液相色谱仪检测器换氘灯方法
大部分品牌液相色谱仪仪器更换氘灯步骤非常简单,仅仅拧几个螺丝就可以了。也有一些液相色谱仪尤其是老型号的仪器更换氘灯或者钨灯时需要打开仪器外壳,并调整对准光路。一般而言,氘灯有(6~12)个月的货架寿命,因此不要在实验室贮备更多的氘灯。 需要注意的是,每一次换灯,都应该有记录。原先很多厂商在灯上安
液相色谱仪的原理是什么
液相色谱仪系统是由由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。液相色谱仪的原理:储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的吸附-解吸的分配过程,各组
液相色谱仪的维护及保养
做好液相色谱仪的日常维护保养,养成良好的使用习惯,能极大地降低故障率,减少停机和降低维修成本。从液相色谱仪的硬件结构来看,按照流动相经过的顺序有以下组成部分:流动相→输液泵→进样器→色谱柱→检测器。下面就依照此顺序来探讨液相色谱仪各部件、各环节在日常使用中需要注意的事项。 流动相的保养 1
液相色谱仪使用经验谈
色谱柱在使用前,进行柱的性能测试,并将结果保存起来,作为今后评价柱性能变化的参考。但要注意:柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同;另外,在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是zui佳条件),只有这样,测得的结果才有可比性。 1、样品的前处
液相色谱仪流动相的贮存
液相色谱仪流动相一般贮存于玻璃、聚四氟乙烯或不锈钢容器内,不能贮存在塑料容器中。因为许多有机溶剂(如甲醇和乙酸等)可浸出塑料表面的增塑剂,导致溶剂被污染。这种被污染的溶剂如用于HPLC系统,可能造成柱效降低。贮存容器一定要盖严,防止溶剂挥发引起组成变化,防止氧和二氧化碳溶入流动相。磷酸盐和乙酸盐缓冲
液相色谱仪的日常维护技巧
一、泵 泵是液相色谱仪的心脏,须精心维护和保养。处于良好工作状态的泵,其基线平稳,保留时间重现性好,梯度洗脱时压力变化缓慢而平稳。要使泵具备良好的操作性能,应该保持泵系统的洁净。具体做法如下: 1.要选择优质的溶剂和试剂,在进入仪器
高效液相色谱仪脱气常用方法
在食品分析中,无论是残留分析还是成分分析,HPLC 也已成为不可或缺的分析仪器。流动相脱气是HPLC 系统能得到可靠数据的一个很有效的措施。下面分析一下,高效液相色谱脱气的必要性,并总结归纳了脱气常用的方法。一、脱气的必要性 流动相脱气是HPLC 系统能得到可靠数据的一个很有效的措施。HPLC
高效液相色谱仪进样系统
进样系统进样器:是将样品送入色谱柱的装置,进样方式可以分为两种:阀进样或自动进样。比较常用的是采用自动进样器装样。
液相色谱仪样品检测要点
液相色谱仪是一种精度极高的检测仪器,在环境、食品、生物、医药行业都有广泛的应用。本文简单介绍在液相色谱仪检测分析样品的几个要点。流动相比例调整:我国药品标准中没有规定色谱柱的长度及填料的粒度,因此每次检测一个新样品时都须重新调整流动相,所以建议第一次检验样品时配备适量的流动相即可,以免浪费。制备流动
专用型液相色谱仪分类方法
专用型液相色谱仪分类方法有多种。1、按功能可分:专用型液相分析色谱仪和专用型液相制备色谱仪。2、按色谱柱可分:专用型填充柱液相色谱仪和专用型毛细管柱液相色谱仪。3、按分离目的可分:专用型实验室液相色谱仪和专用型工业液相色谱仪。4、按固定相和流动相的极性大小可分:专用型正相液相色谱仪和专用型反相液相色
液相色谱仪检测器简介
液相色谱仪检测器有溶质性检测器和总体检测器两种基本类型。溶质性检测器仅对样品组分的理化性质有响应,有紫外检测器、荧光检测器和电化学检测器等。总体检测器对样品组分和洗脱剂总的理化性质有响应,有示差折光检测器、蒸发激光散射检测器和电导检测器等。一、紫外吸收检测器:1、可变波长紫外吸收检测器:连续光源(如
液相色谱仪的操作小要求
操作液相色谱仪的要求 1.流动相必须用HPLC级的试剂,使用前过滤除去其中的颗粒性杂质和其他物质(使用0.45μm或更细的膜过滤)。 2.流动相过滤后要用超声波脱气,脱气后应该恢复到室温后使用。 3.不能用纯乙腈作为流动相,这样会使单向阀粘住而导致泵不进液。 4.使用缓冲溶液时,做完样品
高效液相色谱仪的原理特点
高效液相色谱仪可以完成二元高压梯度洗脱,也可以拓展为制备系统,采用高压混合器连接两个高压恒流泵,利用RS232通讯,即可实现梯度分析; 便于用户自由选择与搭配,混合器材主要由不锈钢、生物惰性PEEK等构成,用途广泛; 可广泛应用于研究开发、医药检验、食品检测、化工分析、环境监测等
液相色谱仪的操作规程
一、液相色谱要放置在平稳牢固的台面上。 二、液相色谱要有可靠的接地。 三、高压气瓶要放置在阴凉、通风处,通过减压阀和机器连接。 四、使用氢火焰时,应先开助燃气,后开氢气,关闭时应先关氢气,后关助燃气。注意检查氢瓶、减压 阀、连接管线是否泄漏,如有泄漏应立即处理。 五、温控设备,压力表应
高效液相色谱仪梯度洗脱曲线
高效液相色谱仪梯度洗脱时,常用一个弱极性溶剂A和一个强极性溶剂B组合,以梯度洗脱时间为横坐标,以流动相中强极性组分B的体积百分含量为纵坐标,可绘出梯度洗脱曲线。若在单位时间内,强极性溶剂B在流动相中的体积百分含量以恒定速率增加,则流动相的极性呈线性梯度输出;若不以恒定速度增加,则流动相的极性呈凸形或
高效液相色谱仪的工作原理
高效液相色谱仪的工作原理:储液器中的流动相被高压泵打入检测系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样本溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的“吸附-解吸”的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出
化验室液相色谱仪分类
化验室液相色谱仪分类有多种。1、按分离规模可分:小型化验室液相色谱仪和大型化验室液相色谱仪。2、按功能可分:化验室液相分析色谱仪和化验室液相生产色谱仪。3、按色谱柱形状可分:化验室液相填充柱色谱仪和化验室液相毛细管色谱仪。4、按结构可分:台式化验室液相色谱仪和落地式化验室液相色谱仪。5、按用途可分:
汇总液相色谱仪原理及条件
色谱法的分离原理是:溶于流动相( phase)中的各组分经过固定相时,由于与固定相(stationary phase)发生作用(吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和)的大小、强弱不同,在固定相中滞留时间不同,从而先后从固定相中流出。又称为色层法、层析法。 色谱法zui早是由俄国植物学家茨维特(Tswe
液相色谱仪有哪些性能特点?
泵形式:串联或并联双柱塞浮动式自校正密封圈技术和泵头自清洗功能技术,可延长密封圈使用寿命,确保了仪器耐用益方便易用的流量和压力校正功能,确保仪器的高精度和稳定性采用两种梯度运行程序设计:线性梯度和阶梯梯度可选程序化的溶剂类和压缩因子,可自动补偿完整的预清洗功能,更于快速溶剂更换采用全息双光栅技术应用
关于高效液相色谱仪的简介
高效液相色谱仪(HPLC)是应用高效液相色谱原理,主要用于分析高沸点不易挥发的、受热不稳定的和分子量大的有机化合物的仪器设备。它由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相) 内,由于样品溶液中
液相色谱仪的简介及组成
液相色谱仪根据固定相是液体或是固体,又分为液-液色谱(LLC)及液-固色谱(LSC)。现代液相色谱仪由高压输液泵、进样系统、温度控制系统、色谱柱、检测器、信号记录系统等部分组成。与经典液相柱色谱装置比较,具有高效、快速、灵敏等特点。
液相色谱仪的正确安装事项
液相色谱仪采用了高压输液泵、微粒固定相和高灵敏度检测器,HPLC在分析速度、分离效率、检测灵敏度和操作自动化方面,都达到了可与GC相比的程度,并保持了样品适用范围广、流动相种类多和便于制备的柱层析优点,在生物工程、制药工业、食品工业、环境监测和石油化工等领域获得了广泛的应用。仪器系统由储液器、泵、进
液相色谱仪色谱柱的再生
液相色谱仪色谱柱长期使用后柱效会下降(色谱柱的理论塔板数减小),可对色谱柱进行再生。一、建议用来冲洗色谱柱的溶剂体积:1、Ф4×125mm色谱柱:柱体积为1.6mL,所用溶剂体积为30mL。2、Ф4×250mm色谱柱:柱体积为3.2mL,所用溶剂体积为60mL。3、Ф10×250mm色谱柱:柱体积为
液相色谱仪故障解决方法
一、流动相脱气不充分 流动相受热,或者流动相不同组分混合时会有气体产生,气泡进人泵内引起压力波动,增加噪音,色谱图上出现毛刺。可试用下列方法解决问题流动相再脱气采用更有效的脱气方法(如通氮气保护)或两种方法配合使用改系统内混合为系统外低压预混合。如果仍有毛刺,应考虑在检测器后面加阻尼器。 二、流
高效液相色谱仪的操作步骤
高效液相色谱仪操作步骤:1). 过滤流动相,根据需要选择不同的滤膜.2). 对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。3). 打开hplc工作站(包括计算机软件和色谱仪),连接好流动相管道,连接检测系统。4). 进入hplc控制界面主菜单,点击manual,进入手动菜单。5). 有一段时间没用,或
液相色谱仪维护之关键点
色谱-质谱联用技术,结合色谱及质谱的技术,是目前分离和鉴定的重要的分析方法之一。其中液相色谱-质谱仪应用更为广泛,液相色谱除了能分析一般的化合物,还能分析气相色谱不能分析的强极性、热不稳定性、难挥发的化合物。液相色谱质谱仪由色谱仪、接口、质谱仪、电子系统、记录系统和计算机系统六大部分组成,是一