高效液相色谱仪硅胶色谱柱的清洗方法
在液相色谱的检测和分析过程中,当硅胶色谱柱上吸附的样品成分积累到一定程度时,就开始形成新的固定相 新的检测物质可以与残留杂质形成一定的分离机制,从而导致保留时间波动和拖尾现象。随着时间的积累,高效液相色谱仪柱体的反压将超过泵体所能承受的最大压力,使柱体无法工作,在堵塞处产生空容积。再生受污染液体柱的关键是了解污染物的性质,寻找合适的溶剂去除污染物。如果污染是由反复注射过程中积聚的强残留物质引起的,可以用90-100%的强溶剂冲洗20倍体积以去除污染。例如,非水溶剂如甲醇、乙二醇和四氢呋喃可用于柱中残留的脂质。 如果使用缓冲系统,不要直接切换到强溶剂。突然切换到高浓度有机溶剂可能会沉淀高效液相色谱仪流动系统中的缓冲液,从而导致更大的问题,如柱头堵塞、管道堵塞、泵泄漏、活塞损坏或进样阀轴故障。用非缓冲流动相洗涤5——10倍体积后,应更换强溶解剂(即用水更换缓冲溶液)有时,强溶剂洗不掉高效液相色谱仪色谱柱上残留的......阅读全文
高效液相色谱仪分析的定性方法
高效液相色谱仪分析过程中影响溶质迁移的因素较多,同一组分在不同色谱条件下的保留值相差很大,即便在相同的操作条件下,同一组分在不同色谱柱上的保留也可能差别很大,因此,高效液相色谱与气相色谱相比,定性的难度更大。 高效液相色谱仪分析中常用的定性方法有利用已知标准样品定性、利用检测器的选择性
高效液相色谱仪分析的定性方法
高效液相色谱仪分析过程中影响溶质迁移的因素较多,同一组分在不同色谱条件下的保留值相差很大,即便在相同的操作条件下,同一组分在不同色谱柱上的保留也可能差别很大,因此,高效液相色谱与气相色谱相比,定性的难度更大。高效液相色谱仪分析中常用的定性方法有利用已知标准样品定性、利用检测器的选择性定性和利用紫外检
高效液相色谱仪分析的定性方法
高效液相色谱仪分析过程中影响溶质迁移的因素较多,同一组分在不同色谱条件下的保留值相差很大,即便在相同的操作条件下,同一组分在不同色谱柱上的保留也可能差别很大,因此,高效液相色谱与气相色谱相比,定性的难度更大。 高效液相色谱仪分析中常用的定性方法有利用已知标准样品定性、利用检测器的选
液相色谱仪的酸清洗和钝化方法
30%磷酸水溶液通过酸反应和强表面活性剂/洗涤剂的共同作用,可以有效地清洁不锈钢及其它润湿的部件。这一方法比更常用的硝酸“钝化”更有效、且较少损害(特别是对日常使用低紫外波长的应用来说)。这一磷酸清洗步骤不是起钝化作用,但它是系统钝化前清洗的*步。一般来说,对于阳离子的离子色谱分析或配有氧化方式的电
液相色谱仪的酸清洗和钝化方法
30%磷酸水溶液通过酸反应和强表面活性剂/洗涤剂的共同作用,可以有效地清洁不锈钢及其它润湿的部件。这一方法比更常用的硝酸“钝化”绝对更有效、且较少损害(特别是对日常使用低紫外波长的应用来说)。这一磷酸清洗步骤不是起钝化作用,但它是系统钝化前清洗的第一步。 一般来说,对于阳离子的离子色谱分析或
液相色谱仪的酸清洗和钝化方法
30%磷酸水溶液通过酸反应和强表面活性剂/洗涤剂的共同作用,可以有效地清洁不锈钢及其它润湿的部件。这一方法比更常用的硝酸“钝化”更有效、且较少损害(特别是对日常使用低紫外波长的应用来说)。这一磷酸清洗步骤不是起钝化作用,但它是系统钝化前清洗的*步。 一般来说,对于阳离子的离子色谱分析或配有氧
如何保证良好的silica硅胶色谱柱性能与柱寿命
silica硅胶色谱柱清洗方法与技巧在silica硅胶色谱柱检测分析过程中,silica硅胶色谱柱上被吸附的样品成分累积到一定程度时,就开始形成新的固定相。新的检测物质能与残留杂质作用形成一定的分离机理,从而导致保留时间波动,出现拖尾现象。随着时间的积累,silica硅胶色谱柱的反压就会超过泵所能承
如何保证硅胶基质色谱柱的性能与柱寿呢?
色谱柱键合基质分为硅胶基质、聚合物基质等,其中硅胶基质应用较为广泛,其特点主要包括以下3方面: (1)低pH值,硅胶键合键容易水解(pH8)。(2)在接近中性的条件时,硅醇基裸露,显酸性,不适宜分离碱性化合物。(3)某些硅胶被一定金属污染,这些金属会引起峰的不对称或拖尾,甚至化合物的死吸附。 如何保
高效气液分配色谱仪色谱柱的试漏与清洗
高效气液分配色谱仪的色谱柱选定后,需要对色谱柱进行试漏与清洗。一、色谱柱的试漏: 将色谱柱一端堵住,全部浸入水中,另一端通入气体,在高于使用时操作压力下不应有气泡冒出。否则应更换色谱柱。二、色谱柱的清洗: 根据柱材料选择清洗方法。 1、不锈钢柱: 可用
液相色谱仪的色谱柱使用后为什么一定要清洗
清洗是因为有缓冲盐吧?这么说吧,如果流动相里面有无机盐,盐是很容易留在色谱柱里面的。如果析出来的话对色谱柱伤害很大。色谱柱一般来说是保存在纯有机相里面的,而盐类物质在纯有机相里面的溶解度不好。所以要用甲醇水、乙腈水来清洗。为的就是洗掉盐。所以是用过流动相之后,用10%甲醇水冲洗,然后用甲醇封存。再次
高效液相色谱仪中色谱柱的维护保养尤为重要
高效液相色谱仪(HPLC)是分析实验室常用的测试仪器之一,其应用越来越广泛。此种仪器在使用过程中,难免会出现各种各样的问题,并将直接影响到所测数据的准确性和仪器的正常工作。 色谱柱是高效液相色谱仪最主要的部件,被测物质能否被很好的分离和测定,色谱柱的性能起着决定性的作用。因此,在日常工作中,应特
高效液相色谱仪与经典液相柱色谱仪的差别
高效液相色谱仪是在经典液相柱色谱仪的基础上,引入了气相色谱仪的理论,采用了高压输液泵、高效固定相、梯度洗脱技术和高灵敏度检测器,具有高压、高速、高效、高灵敏度、高选择性和应用范围广等特点。一、工作压力差别:1、经典液相柱色谱仪工作压力:常压或减压。2、高效液相色谱仪工作压力:高压,1.5×107~3
高效液相色谱仪色谱柱的主要性能指标
高效液相色谱仪色谱柱的主要性能指标有柱型、柱选择性和柱效等。一、柱型: 目前,高效液相色谱常用标准柱型的柱内径为3.9mm和4.6mm,柱长为20~25cm,柱流动相的体积流速为1mL/min左右,填料颗粒度5~10um,柱效为7000~10000理论塔板数/m。 色谱
高效液相色谱仪分离柱,柱压高是由哪些原因引起的?
如果高效液相色谱仪系统压力过高,首先判断压力产生的位置,然后采用分段拆卸的方法进行判断一般从后向前拆,首先断开色谱柱与检测器的连接,压力不会明显下降或下降,检测器不会被堵塞,检测器也不会被堵塞;然后拆色谱柱,压力会明显下降,色谱柱会有问题,否则泵的出口会堵塞,柱没有问题。当确定该列存在问题时,有以下
高效液相色谱仪和色谱柱常见问题以及解决办法
1 色谱柱柱压问题 色谱柱柱压问题是使用高效液相色谱过程中需要密切注意的地方,柱压的稳定与色谱图峰形的好坏、柱效、分离效果及保留时间等密切相关。所谓柱压稳定并不是指压力值稳定于一个恒定值而是指压力波动范围在345kPa 以内或在50PSI之间(在使用梯度洗脱时,柱压平稳缓慢的变化是允许的)。压
每次使用之后的高效液相色谱柱都要清洗吗
这个是不是需要清洗的问题,需要看你的流动相是什么。一般反相色谱,经常会用到缓冲盐。而盐对于色谱柱伤害比较大。如果盐堵在色谱柱里面那柱子就废了。所以需要把它冲掉。最好是每次都冲掉。如果你的柱子流动相里面没有盐,那就没必要冲洗了。冲洗方法:反相柱子最好保存在纯甲醇或者纯乙腈里面,但是盐不溶于纯有机相。所
每次使用之后的高效液相色谱柱都要清洗吗
这个是不是需要清洗的问题,需要看你的流动相是什么。一般反相色谱,经常会用到缓冲盐。而盐对于色谱柱伤害比较大。如果盐堵在色谱柱里面那柱子就废了。所以需要把它冲掉。最好是每次都冲掉。如果你的柱子流动相里面没有盐,那就没必要冲洗了。冲洗方法:反相柱子最好保存在纯甲醇或者纯乙腈里面,但是盐不溶于纯有机相。所
每次使用之后的高效液相色谱柱都要清洗吗
这个是不是需要清洗的问题,需要看你的流动相是什么。一般反相色谱,经常会用到缓冲盐。而盐对于色谱柱伤害比较大。如果盐堵在色谱柱里面那柱子就废了。所以需要把它冲掉。最好是每次都冲掉。如果你的柱子流动相里面没有盐,那就没必要冲洗了。冲洗方法:反相柱子最好保存在纯甲醇或者纯乙腈里面,但是盐不溶于纯有机相。所
每次使用之后的高效液相色谱柱都要清洗吗
这个是不是需要清洗的问题,需要看你的流动相是什么。一般反相色谱,经常会用到缓冲盐。而盐对于色谱柱伤害比较大。如果盐堵在色谱柱里面那柱子就废了。所以需要把它冲掉。最好是每次都冲掉。如果你的柱子流动相里面没有盐,那就没必要冲洗了。冲洗方法:反相柱子最好保存在纯甲醇或者纯乙腈里面,但是盐不溶于纯有机相。所
每次使用之后的高效液相色谱柱都要清洗吗
这个是不是需要清洗的问题,需要看你的流动相是什么。一般反相色谱,经常会用到缓冲盐。而盐对于色谱柱伤害比较大。如果盐堵在色谱柱里面那柱子就废了。所以需要把它冲掉。最好是每次都冲掉。如果你的柱子流动相里面没有盐,那就没必要冲洗了。冲洗方法:反相柱子最好保存在纯甲醇或者纯乙腈里面,但是盐不溶于纯有机相。所
高效液相色谱仪柱压问题及解决办法
高效液相常见的就是柱压问题及解决办法柱压问题 柱压问题是使用高效液相色谱过程中需要密切注意的地方,柱压的稳定与色谱图峰形的好坏、柱效、分离效果及保留时间等密切相关。所谓柱压稳定并不是指压力值稳定于一个恒定值而是指压力波动范围在50PSI(3.3 Bar)之间(在使用梯度洗脱时,柱压平稳缓慢的变化是允
如何判断高效液相色谱仪何时应更换新柱?
如何判断高效液相色谱仪何时应更换新柱?色谱工作者经常遇到这样的问题。应该何时更改列?列中的列数是否可以反映列的状态?根据经验确定色谱柱应“退役”的标准,当色谱柱中的色板数减少到新色谱柱的百分比时,您可以认为该色谱柱不能再使用。您如何判断您的实验室中不再使用色谱柱?什么?据信,每个色谱工作者都关心分辨
液相色谱柱的清洗
反相色谱是迄今在高效液相色谱中应用最广泛的技术,主要是因为它适用于分析极大多数的非极性物质和很多的可离子化的及离子化合物。大多数用于反相色谱的固定相都是天然的疏水物质,因此,分析物是按照它们与固定相的疏水相互作用的大小来分离的,含有疏水的机制也能以同样的保留方式分离。 固定相上还有少数物质,如混合相
离子色谱柱清洗的原则
离子色谱柱是一款高容量氢氧根体系色谱柱,用于分析疏水性离子(包括多磷酸盐,硫氰酸盐,硫代硫酸盐,高氯酸盐)和多价阴离子(包括多磷酸盐和聚羧酸锌)。 离子色谱柱一般比常规高效液相色谱分析柱价格要贵很多,但如果正常使用,离子色谱柱也可以有很长的使用寿命,因此对离子色谱的维护和清洗十分重要。一般而言,没有
液相色谱柱的清洗
反相色谱是迄今在高效液相色谱中应用最广泛的技术,主要是因为它适用于分析极大多数的非极性物质和很多的可离子化的及离子化合物。大多数用于反相色谱的固定相都是天然的疏水物质,因此,分析物是按照它们与固定相的疏水相互作用的大小来分离的,含有疏水的机制也能以同样的保留方式分离。固定相上还有少数物质,如混合相(
色谱柱的安装和清洗
色谱柱的安装1、请将液相色谱装置中的流动相完全置换后再连接色谱柱。并且完全排出流路内的空气。2、装置内的液体和所使用的流动相不能相溶的情况下,请使用双方都能相溶的液体做过渡。比如从水置换到氯仿的情况,就需要使用丙酮做过渡,才能完全置换。3、将盐溶液置换成有机溶剂的时候,需要通过纯水、丙酮的顺序来进行
色谱柱清洗与保存
色谱柱峰形发生改变、色谱峰分叉、出现肩峰、保留时间漂移、分离度变化或背压升高,都表明色谱柱被污染了。用纯有机溶剂进行冲洗以去除非极性污染物,谨慎操作以避免任何缓冲盐的析出。如果冲洗不能解决问题,可采用以下步骤对色谱柱进行清洗和再生。■ 使用与样品性质和固定相类型(反相、正相或HILIC)相匹配的常规
色谱柱清洗与保存
色谱柱峰形发生改变、色谱峰分叉、出现肩峰、保留时间漂移、分离度变化或背压升高,都表明色谱柱被污染了。用纯有机溶剂进行冲洗以去除非极性污染物,谨慎操作以避免任何缓冲盐的析出。如果冲洗不能解决问题,可采用以下步骤对色谱柱进行清洗和再生。■ 使用与样品性质和固定相类型(反相、正相或HILIC)相匹配的常规
色谱柱筛板如何清洗
色谱柱筛板用甲醇超声清洗,拧紧色谱柱,用甲醇低流速冲洗(20倍柱体积),就可以清洗的很干净。对于色谱柱塌陷部分,找一根废弃的C18柱在出口处拧开,将靠近筛板的填料挖去一部分,再取干净的填料。再将要填修复的色谱柱入口拧开,除去污染的填料,将干净的填料用适宜的工具小心填充到色谱柱头,最好突出一部分),将
实验分析仪器高效液相色谱仪的色谱柱的相关知识
色谱柱色谱是一种分离分析手段,分离是核心,因此担负分离作用的色谱柱是色谱系统的心脏。对色谱柱的要求是柱效高、选择性好、分析速度快等。市售的用于 HPLC 的各种微粒填料如多孔硅胶以及以硅胶为基质的键合相、氧化铝、有机聚合物微球(包括离子交换树脂)、多孔炭等,其粒度一般为3μm、5μm、7μm、10μ