反相液相色谱柱是不是LCMS／MS分析的主流？
对于LC-MS/MS色谱柱人们的惯性思维通常是由反相液相色谱柱开始研发, 产生这种惯性思维是因为常规高效液相色谱分析中C18等反相高效液相色谱柱占有统治地位,另一方面是色谱公司不懂LC-MS/MS分析误导用户的结果。这惯性思维是不正确的! LC-MS/MS分析的实用战略和HPLC有很大不同! LC-MS/MS分析的方法的选择性最重要! 色谱公司不能简单地将现成的反相液相色谱填料装成5cm x 2.1mm短柱充当LC-MS/MS柱使用, 但事实上几乎所有色谱公司都是这样做的。这样的反相液相色谱LC-MS/MS柱有三个明显的弱点: (1) 许多极性化合物难以保留，质谱灵敏度差。 许多重要的物质，如抗癌药物DTIC, 抗痛药物河豚毒素，污染物质三聚氰胺, 中草药中糖肽等非常极性, 在反相液相色谱柱上没有保留。还有许多的化合物比较极性, 使用少量的甲醇或乙腈就从反相液相色谱柱上洗脱。在药物代谢研究中, 观察到许多......阅读全文
反相高效液相色谱柱使用维护注意事项
作为基于极性流动相和非极性固定相所组成的液相色谱体系，反相高效液相色谱柱是通过表面间的疏水效应建立的一种色谱模式，根据一般有机分子的结构中具有非极性的疏水部分，同时疏水部分越大，一般保留值越高的性质，反相高效液相色谱柱进行相应的工作。 为尽可能减少日常中不正确色谱操作对反向液相色谱柱的损
反相高效液相色谱柱的保护要怎么做
反相高效液相色谱柱的填料常是以硅胶为基质，表面键合有极性相对较弱官能团的键合相。反向色谱所使用的流动相极性较强，通常为水、缓冲液与甲醇、乙腈等的混合物。样品流出色谱柱的顺序是极性较强的组分先被冲洗出，而极性弱的组分会在色谱柱上有更强的保留。 选择合适的色谱柱可以缩短方法开发时间，并使开发的方
反相液相色谱柱特点和使用缓冲液注意点
反相液相色谱柱采用高纯和高机械强度的硅胶，采用先进的键合技术制备而成, 色谱柱表面键合率高，覆盖完全，对碱性和酸性化合物具有良好的峰形。色谱柱柱容量高，寿命长，是一款具有较高性价比的色谱柱。 反相液相色谱柱为色谱柱提供方便、经济和有效的保护，延长了色谱柱的寿命，保证分析结果的重现性。随着使用时间的增
反相液相色谱柱特点和使用缓冲液注意点
反相液相色谱柱采用高纯和高机械强度的硅胶，采用先进的键合技术制备而成, 色谱柱表面键合率高，覆盖完全，对碱性和酸性化合物具有良好的峰形。色谱柱柱容量高，寿命长，是一款具有较高性价比的色谱柱。 反相液相色谱柱为色谱柱提供方便、经济和有效的保护，延长了色谱柱的寿命，保证分析结果的重现性。随着使用时间
反相液相色谱柱特点和使用缓冲液注意点
反相液相色谱柱采用高纯和高机械强度的硅胶，采用先进的键合技术制备而成, 色谱柱表面键合率高，覆盖完全，对碱性和酸性化合物具有良好的峰形。色谱柱柱容量高，寿命长，是一款具有较高性价比的色谱柱。 反相液相色谱柱为色谱柱提供方便、经济和有效的保护，延长了色谱柱的寿命，保证分析结果的重现性。随着使用时间的增
反相高效液相色谱柱是一种怎样的色谱模式
反相高效液相色谱柱是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式，任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分，这部分越大，一般保留值越高，在高效液相色谱中这是应用面较广的一种分离模式，在生物大分子的反相液相色谱条件下，流动相多采用酸性的、低离子强度的水溶液，并加一定比例的能
液相色谱柱的结构分析
1、空柱由柱接头、柱管及滤片组装而成。 柱接头采用低死体积结构，柱接头是两端螺纹组件，一端是为7/16英寸外螺纹，另一端是3/16英寸的内螺纹(国内外已规范化)。7/16英寸外螺纹与1/4英寸柱管(Φ6.35mm)连接，中间放置压坏用于密封。3/16英寸的内螺纹与1/16英寸(Φ1.57mm)的连
液相色谱柱的结构分析
1、空柱由柱接头、柱管及滤片组装而成。 柱接头采用低死体积结构，柱接头是两端螺纹组件，一端是为7/16英寸外螺纹，另一端是3/16英寸的内螺纹(国内外已规范化)。7/16英寸外螺纹与1/4英寸柱管(Φ6.35mm)连接，中间放置压坏用于密封。3/16英寸的内螺纹与1/16英寸(Φ1.57mm)的连
液相色谱柱的结构分析
1、空柱由柱接头、柱管及滤片组装而成。 柱接头采用低死体积结构，柱接头是两端螺纹组件，一端是为7/16英寸外螺纹，另一端是3/16英寸的内螺纹(国内外已规范化)。7/16英寸外螺纹与1/4英寸柱管(Φ6.35mm)连接，中间放置压坏用于密封。3/16英寸的内螺纹与1/16英寸(Φ1.57mm)的连
正相和反相色谱柱的区别
在正相色谱中，一般采用极性键合固定相，硅胶表面键合的是极性的有机基团，键合相的名称由键合上去的基团而定。最常用的有氰基(-CN)、氨基(-NH2)、二醇基(DIOL)键合相。流动相一般用比键合相极性小的非极性或弱极性有机溶剂，如烃类溶剂，或其中加入一定量的极性溶剂(如氯仿、醇、乙腈等)，以调节流
C18液相色谱柱色谱柱液相色谱柱
分析型到制备型一套完整的填料体系，目前可提供的填料键合相有C18、C4、C8、SI、NH2、CN、Phenyl、Diol以及手性填料TBB和 DMB。孔径有60A、100A和300A三种，满足不同条件的分析。填料粒径可以提供3.5um、5um、7um、10um、13um和16um六种。可谓品
正相色谱柱和反相色谱柱的适用范围
反相柱用于大多数HPLC分析，主要用来做含量分析。正相柱主要用于分离手性化合物，主要用于测试ee值，dr值等。前者流动相一般为与水混溶的溶剂，如水-甲醇，乙腈，甚至加入无机盐配成缓冲溶液，而后者往往用正戊烷等憎水溶剂。正相柱对溶剂中的水有一定要求，过多的水会使其损坏。
正相色谱柱和反相色谱柱的适用范围
反相柱用于大多数HPLC分析，主要用来做含量分析。正相柱主要用于分离手性化合物，主要用于测试ee值，dr值等。前者流动相一般为与水混溶的溶剂，如水-甲醇，乙腈，甚至加入无机盐配成缓冲溶液，而后者往往用正戊烷等憎水溶剂。正相柱对溶剂中的水有一定要求，过多的水会使其损坏。
（LCMS）液相色谱质谱联用技术应用于环境分析
液相色谱与质谱联用LC-MS技术可用于土壤、饮用水或废水、空气和污泥等多种样品的分析。这些样品可能含有许多不同的化合物，从非极性碳氢化合物到离子型有机金属物质。农药和除草剂，包括三嗪衍生物、氯酚、苯氧烷酸和磺酰脲类除草剂，都可以用液相质谱联用技术进行分析，也可以用该技术分离多环芳烃和有机金属化合
反相高效液相色谱2
方案2 填充 RP-HPLC 毛细管微柱试剂、试剂盒甲醇n-丙醇反相硅胶TFA 乙腈溶剂体系仪器、耗材水浴超声波仪色谱加样器层析柱玻璃料末端接口环氧树脂流动池正向光学扫描检测器加热枪加样器液相色谱柱填充泵微柱聚丙烯离心管聚硅酸盐管蓝宝石切刀信号数据收集装置硅胶隔膜Teflon接头UV检测器实验步骤一
反相高效液相色谱概述
结果与保留值之间的关系：利用RP-HPLC 分离多肽首先得确定不同结构的多肽在柱上的保留情况。为了获得一系列的保留系数，Wilce 等利用多线性回归方法对2106 种肽的保留性质与结构进行分析，得出了不同氨基酸组成对保留系数影响的关系，其中极性氨基酸残基在2～20 氨基酸组成的肽中，可减少在柱上
反相高效液相色谱1
方案1 蛋白质 RP-HPLC 的标准色谱条件实验材料蛋白质标样试剂、试剂盒乙睛（HPLC级）去离子水（HPLC级）三氟乙酸（TFA)仪器、耗材HPLC 色谱系统反相柱实验步骤1.进行空白或对照层析谱分析（即在步骤①中不加样）。一般这是进行一天层析工作的开始。下面是推荐使用的用于 RP-HPLC 系
反相高效液相色谱4
方案4 用 RP-HPLC 对固相合成的多肽进行纯化实验实验材料用于分析的肽或蛋白试剂、试剂盒丙酮乙腈（HPLC级）2 -丙醇乙醇硝酸钠硫酸钠硫脲三氟乙酸仪器、耗材分析型 HPLC 装置离心机锥形瓶玻璃容器Hamilton 玻璃注射器氮气冷冻干燥机流动相过滤装置氦气制备型 HPLC 装置实验步骤一、
反相高效液相色谱3
方案3 不易分离的大分子量多肽的纯化实验实验材料大分子量非极性多肽或蛋白质仪器、耗材层析柱HPLC 系统冷冻干燥器微量离心机标准的或专用 HPLC 仪器氮气实验步骤一、用于 RP-HPLC 纯化的大分子非极性多肽或蛋白质样品的制备1.将多肽样品（如果蛋白质是通过固相化学合成法得到的，质量在 30~5
反相高效液相色谱6
方案6 计算机辅助方法优化梯度条件的 RP-HPLC 蛋白质分离实验实验材料HPLC 肽标准品蛋白质样品试剂、试剂盒丙酮乙腈（HPLC级）磷酸磷酸二氢钠硫脲硝酸钠三氟乙酸仪器、耗材分析型 HPLC 装置色谱柱洗脱液瓶Hamilton 玻璃注射器氮气量筒微量离心机流动相过滤装置实验步骤一、配制流动相以
反相高效液相色谱5
方案5 用 RP-HPLC 技术对多肽和蛋白质混合物进行脱盐实验实验材料蛋白质或多肽样品试剂、试剂盒乙腈（HPLC级）2 -丙醇硝酸钠硫脲三氟乙酸仪器、耗材分析型 HPLC 装置色谱柱洗脱液瓶Hamilton 玻璃注射器氮气量筒微量离心机流动相过滤装置实验步骤一、流动相的配制1.配制缓冲液 A(弱流
高效液相色谱之高效反相液相色谱（一）
反相色谱（reversed phasc chromatography, RPC）是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式，任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分，这部分越大，一般保留值越高，在高效液相色谱中这是应用面最广的一种分离模式，在生物大分子的反相液相色
高效液相色谱之高效反相液相色谱（二）
附：色谱柱操作说明，（以迪马公司Diamonsil(TM)柱为例）1. 色谱柱常规参数订货号：Catalog.No. 产品ZL号 Serial No.出厂日期 Date填料 Column Paking 如，Diamonsil(TM)钻石C18 5цm柱规格 Col
高效液相色谱柱的分类与应用特点（二）
三、高效亲水液相色谱柱 高效亲水液相色谱是一个介于正相和反相高效液相色谱之间的运作模式。这个模式最早来自NH2色谱柱的糖分析应用。在此之后，逐步在Diol, 硅胶和亲水性高分子键合相找到了一些有价值的应用。近年来，高效亲水液相色谱成为比较流行的色谱的运作模式, 主要是因为亲水性化合物有良好的保留和高
液相色谱质谱联用(LCMS)常见故障汇总
1.电源接通，LED指示灯不亮原因及解决措施：检查电源线是否正确连接，单相230V电源是否供应到电源板。2.仪器无法连接原因和解决措施:检查USB电缆的连接。检查仪器电源为接通后，重新启动PC。检查Lab solutions软件的环境设置。3.“STATUS” LED灯闪烁相关问题（1）“STATU
c18反相液相色谱柱使用注意事项
c18反相液相色谱柱过程中，须注意以下事项1、新c18反相液相色谱柱在使用前，须先用甲醇或乙腈试剂以20倍柱体积低流速冲洗，作用是使固定相能充分润湿、碳链舒展彻底，使色谱柱的性能达到状态。具体操作是，将配制好65%的乙腈/水冲洗后，把色谱柱进口端连接在色谱仪上，出口端放空（不可连上检测器，以免污染了
高效液相色谱柱的分类与应用特点（一）
高效液相色谱柱大致可分为五类:一、高效反相液相色谱柱 以C18为代表的高效反相液相色谱柱一直被描述为药物发现、开发、方法验证(validation)的心脏! 高效反相液相色谱柱也极其广泛应用在药物代谢及动力学、生命科学、医疗健康、生物分析检测、毒品和兴奋剂检测、食品安全分析、环境分析、军事、国土安全
液质联用中的液相色谱
据统计，已知化合物中约80%的化合物是亲水性强、挥发性低的有机物，热不稳定化合物及生物大分子，这些化合物的分析最适合于液相色谱，当然毛细管电泳也可以，只不过毛细管电泳的毛细管中无填料，因此“变数”较少，适应的复杂体系也较少，远不及液相色谱使用得广泛。当和质谱联用时，液相色谱的流动相适合于流入质谱
反相高效液相色谱的原理
在反相液相色谱中，固定相的极性小于流动相，洗脱顺序取决于溶质分子的疏水性，疏水性强的保留时间长！
反相色谱柱
反相色谱柱