做液相色谱不可不知的经验谈
液相色谱仪可以说是药物分析工作者最常使用的“一门武器”。何时能做液相做的如“打游戏”一般时,才算是到了游刃有余、庖丁解牛的境界。现如今的液相色谱软件均已具备了强大的数据处理功能,如能运用自如,可达事半功倍之效。 水相中溶质的溶解 水相中需溶解的无机盐和表面活性剂等固体溶质,建议采用加热法,不建议采用振摇、超声等方式。因为振摇、超声有可能使得溶质处于“临界胶团浓度”,其后一旦遇到某特殊情形(如遇有机溶剂、温度剧降等),极易析出结晶,损伤仪器和色谱柱,呈现泵头处析出“盐和白粉”的现象。 流动相的配制与使用 恒度洗脱 将水相与有机相混合后、使用混合型过滤膜抽滤,用一个管路(如A管)泵入仪器,这是基本原则。若使用两个管路(一个纯水相、一个纯有机相)泵入仪器,极易造成水相中盐和表面活性剂的少量析出。剩余的流动相可继续使用,需密封后放置于阴凉处,待下次实验时与新配制的流动相混合后......阅读全文
简述液相色谱理论
液相色谱法开始阶段是用大直径的玻璃管柱在室温和常压下用液位差输送流动相,称为经典液相色谱法,此方法柱效低、时间长(常有几个小时)。高效液相色谱法(High performance Liquid Chromatography,HPLC)是在经典液相色谱法的基础上,于60年代后期引入了气相色谱理论而
液相色谱基线噪音
对的,虽然理论上分析纯试剂可以上HPLC的,但很多国产的达不到要求,会使仪器噪音高很多但,你可以分析一下噪音的来源1,换100%纯水,不接柱子,当基线平稳时,进空针(就是什么都不进,走一次方法)。如果这时基线同样出现之前的情况,那么应该是仪器本身的问题,联系工程师解决吧(如果用的等度洗脱,这步省略)
液相色谱的用途
高效液相色谱应用很广泛,基本能对有机化合物中百分之七十到百分之八十的化合物进行分离与检测,下面以安捷伦液相色谱技术做为举例:应用液相色谱用途广泛,已经成为大多数化学行业和生命科学行业中的标准配置。安捷伦液相色谱和液-质联用系统正为各种客户群服务,如药物研制和生产、蛋白质、食品安全、环境、国土安全和石
液相色谱发展简史
早在古代罗马时期,人们已知道将一滴含有混合色素的溶液滴在一块布或一片纸上,通过观察溶液展开产生的同心圆环来分析染料与色素。实际上,这种简单操作已经采用了现代色谱学的基本原理。19世纪中叶,德国化学家Runge对古罗马人的这种方法作了重要的改进,使其具有良好的重现性与定量能力,使盐溶液可在纸上分离;另
液相色谱工作原理
系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的吸附-解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被
高效液相色谱技术
高效液相色谱(HPLC:High Performance Liquid Chromatography )是化学、生物化学与分子生物学、医药学、农业、环保、商检、药检、法检等学科领域与专业最为重要的分离分析技术,是分析化学家、生物化学家等用以解决他们面临的各种实际分离分析课题必不可缺少的工具。国际市场
如何使用液相色谱
1.电源准备打开稳压器电源开关,须待电压指示至220V后,才能开启其他有关设备。2.LC-600高效液相色谱仪的准备试剂:三氟乙酸乙腈超纯水(Millipore超纯水)冰乙酸溶液配置:贮液瓶与流动相的准备A液0.1%三氟乙酸(三氟乙酸1ml,超纯水999ml)室温保存B液60%乙腈(乙腈600ml,
液相色谱色谱柱的保养
液相色谱是一类分离与分析技术,其特点是以液体作为流动相,发展到今天已经成为了包括科学研究、工业生产、环境保护、食品安全在内多个领域常用的科研分析仪器之一。与此同时,随着液相色谱的普及,因为仪器故障或者使用不规范导致的事故新闻也时有发生,因此,了解液相色谱相关的规范与使用方法,对于使用者来说尤
液相色谱质谱仪常见色谱故障
常见色谱故障压力过高压力过高的原因有很多,但总体来讲就是一个原因,管路堵塞。所以当出现压力高时候就要分段来检查哪一段发生堵塞,检查柱子进口过滤芯是否被污染; PURGE阀过滤芯是否被污染或色谱柱被污染,检查管路,尤其是针座毛细管,检查进样器旋转密封阀或者进样针及针座有否堵塞。压力过低压力过低总体来
高效液相色谱的色谱柱
填料和流动相的组分应按各品种项下的规定,常用的色谱柱填料有硅胶和化学键合硅胶。后者以十八烷基硅烷键合硅胶最为常用辛基键合硅胶次之,氰基或氨基键合硅胶也有使用;离子交换填料用于离子交换色谱;凝胶或玻璃微球等,用于分子排阻色谱等。注样量一般为数微升。除另有规定外,柱温为室温,检测器为紫外吸收检测器。在用
色谱技术方法高效液相色谱
高效液相色谱 (HPLC)是目前应用最多的色谱分析方法,高效液相色谱系统由流动相储液体瓶、输液泵、进样器、色谱柱、检测器和记录器组成,其整体组成类似于气相色谱,但是针对其流动相为液体的特点作出很多调整。HPLC的输液泵要求输液量恒定平稳;进样系统要求进样便利切换严密;由于液体流动相粘度远远高于气体,
气相色谱与液相色谱的异同点
不同点:一、流动相不同:HPLC为液体流动相,GC为永久性气体作流动相(通常叫做载气)二、进样器不同:高效液相为平头进样针,气相色谱为尖头进样针三、色谱柱长不同:(1)气相色谱柱通常几米到几十米(气相色谱由于载气的相对分析量较低,分子间隙大,故粘度低,流动性好,组分在气相中流动速度快,因此可以增加柱
气相色谱与液相色谱的异同点
不同点:一、流动相不同:HPLC为液体流动相,GC为永久性气体作流动相(通常叫做载气)二、进样器不同:高效液相为平头进样针,气相色谱为尖头进样针三、色谱柱长不同:(1)气相色谱柱通常几米到几十米(气相色谱由于载气的相对分析量较低,分子间隙大,故粘度低,流动性好,组分在气相中流动速度快,因此可以增加柱
气相色谱与液相色谱的异同点
不同点:一、流动相不同:HPLC为液体流动相,GC为永久性气体作流动相(通常叫做载气)二、进样器不同:高效液相为平头进样针,气相色谱为尖头进样针三、色谱柱长不同:(1)气相色谱柱通常几米到几十米(气相色谱由于载气的相对分析量较低,分子间隙大,故粘度低,流动性好,组分在气相中流动速度快,因此可以增加柱
高效液相色谱和气相色谱的异同点
不同点:一、流动相不同:HPLC为液体流动相,GC为永久性气体作流动相(通常叫做载气)二、进样器不同:高效液相为平头进样针,气相色谱为尖头进样针三、色谱柱长不同:(1)气相色谱柱通常几米到几十米(气相色谱由于载气的相对分析量较低,分子间隙大,故粘度低,流动性好,组分在气相中流动速度快,因此可以增加柱
气相色谱与液相色谱的异同点
1、流动相 气相色谱法的流动相是气体(又称载气),液相色谱法的流动相为液相(又称淋洗液)。2、分类(按固定相不同) 气相色谱法中,按固定相不同可分为:气---固色谱法;气---液色谱法。高效液相色谱法中,按固定相不同可分为:液---固色谱法;液---液色谱法。3、固定相 气固(液固)色谱的固定相:多
高效液相色谱和气相色谱的异同点
不同点:一、流动相不同:hplc为液体流动相,gc为永久性气体作流动相(通常叫做载气)二、进样器不同:高效液相为平头进样针,气相色谱为尖头进样针三、色谱柱长不同:(1)气相色谱柱通常几米到几十米(气相色谱由于载气的相对分析量较低,分子间隙大,故粘度低,流动性好,组分在气相中流动速度快,因此可以增加柱
气相色谱液相色谱主要调节哪些参数
液相的主要参数1 泵:流速,比例阀或梯度洗脱表的时间和比例2 自动进样器:进样量,洗针程序,进样序列表等等3 柱温箱:柱温4 检测器:根据不同检测器来设定。一般紫外设波长气相的主要参数1 自动进样器:进样量,洗针程序,进样序列表2 顶空进样器:气压,加热炉温度和时间,进样序列表,导管温度3 进样口:
气相色谱与液相色谱如何选择流动相流速
因液相色谱柱柱效是色谱柱中流动相线性流速的函数,使用不同的流速可得到不同的色谱柱柱效。对于一根特定的液相色谱柱,要追求最佳柱效,最好使用最佳流速。对内径为4.6mm的色谱柱,流速一般选择1ml/min,对于内径为4.0mm柱,流速0.8ml/min为佳。当选用最佳流速时,分析时间可能延长。可采用改变
气相色谱与液相色谱如何选择流动相流速
因液相色谱柱柱效是色谱柱中流动相线性流速的函数,使用不同的流速可得到不同的色谱柱柱效。对于一根特定的液相色谱柱,要追求最佳柱效,最好使用最佳流速。对内径为4.6mm的色谱柱,流速一般选择1ml/min,对于内径为4.0mm柱,流速0.8ml/min为佳。当选用最佳流速时,分析时间可能延长。可采用改
超高效液相色谱相比高效液相色谱有哪些提升
超高效液相色谱(Ultra Performance Liquid Chromatography,UPLC)借助于HPLC(高效液相色谱)的理论及原理,涵盖了小颗粒填料、非常低系统体积及快速检测手段等全新技术,增加了分析的通量、灵敏度及色谱峰容量。 超高效液相色谱法的原理与高效液相色谱法基本
高效液相色谱与超高效液相色谱条件有什么差异
原理是一致的。不同的地方一个是仪器,一个是色谱柱。后者超高效液相色谱,可以缩短检测时间,节省时间,节省流动相,大大地提高了效率。先说色谱柱,超高效液相色谱柱的粒径会更小,柱子也更短。如果说样品流过液相色谱柱的感觉是流过满是石头的管路,那么超高效液相色谱柱就是装满了沙子的管路。一般液相色谱柱的粒径是5
超高效液相色谱相比高效液相色谱有哪些提升
超高效液相色谱(Ultra Performance Liquid Chromatography,UPLC)借助于HPLC(高效液相色谱)的理论及原理,涵盖了小颗粒填料、非常低系统体积及快速检测手段等全新技术,增加了分析的通量、灵敏度及色谱峰容量。 超高效液相色谱法的原理与高效液相色谱法基本
超高效液相色谱相比高效液相色谱有哪些提升
超高效液相色谱(Ultra Performance Liquid Chromatography,UPLC)借助于HPLC(高效液相色谱)的理论及原理,涵盖了小颗粒填料、非常低系统体积及快速检测手段等全新技术,增加了分析的通量、灵敏度及色谱峰容量。 超高效液相色谱法的原理与高效液相色谱法基本
多维度液相色谱与一维液相色谱有什么不同
一维液相色谱的缺点 色谱做为繁杂化合物的分离出来专用工具,对化学物质的分离出来剖析充分发挥了挺大的功效。现阶段应用的大部分仪器设备为一维色谱分析,应用一条柱头,合适于含一百多至几十个化学物质的试品剖析。当试品更繁杂时,比如许多人剖析鹿茸片蛋白质,获得上百个色谱峰,但是经质谱判定说明,均值每
色谱柱、气相色谱、液相色谱等各种色谱的分离原理
色谱最大的特点是能将一个复杂的混合物中的各组分彼此分离开,还能检测出来这些组分是什么。 我们从茨维特的试验可以看出,碳酸钙装在玻璃管中固定不动,称为固定相。石油醚不断流过固定相(碳酸钙),所以流动的石油醚为流动相。要完成色谱分离最起码的条件要有固定相和流动相参与。色谱的分离过程就是利用相对
色谱柱、气相色谱、液相色谱等各种色谱的分离原理
色谱最大的特点是能将一个复杂的混合物中的各组分彼此分离开,还能检测出来这些组分是什么。 我们从茨维特的试验可以看出,碳酸钙装在玻璃管中固定不动,称为固定相。石油醚不断流过固定相(碳酸钙),所以流动的石油醚为流动相。要完成色谱分离最起码的条件要有固定相和流动相参与。色谱的分离过程就是利用相对
色谱柱、气相色谱、液相色谱等各种色谱的分离原理
色谱最大的特点是能将一个复杂的混合物中的各组分彼此分离开,还能检测出来这些组分是什么。 我们从茨维特的试验可以看出,碳酸钙装在玻璃管中固定不动,称为固定相。石油醚不断流过固定相(碳酸钙),所以流动的石油醚为流动相。要完成色谱分离最起码的条件要有固定相和流动相参与。色谱的分离过程就是利用相对静止的固
液相色谱在液相检验中的应用方法
液相色谱法是一种以液体为流动相的色谱法,液相色谱法是现在应用十分广泛的一种液相色谱法,这种方法是20世纪60年代兴起的,经过不断的完善和发展,现已被应用于各个领域。在医药分析领域,液相检验的应用已经普及,而液相色谱法作为液相检验中的一种重要手段,也得到了大力的推广与应用,目前实验室常用的P2
液相色谱流动相选择要点
1)流动相应不改变填料的任何性质。低交联度的离子交换树脂和排阻色谱填料有时遇到某些有机相会溶胀或收缩,从而改变色谱柱填床的性质。碱性流动相不能用于硅胶柱系统。酸性流动相不能用于氧化铝、氧化镁等吸附剂的柱系统。2)纯度。色谱柱的寿命与大量流动相通过有关,特别是当溶剂所含杂质在柱上积累时。3)必须与检测