分离肽和蛋白质色谱柱的维护
1、使用常规要求 pH:为了保证色谱柱长寿命,硅胶基质色谱柱的使用pH范围是2~7,超出此范围的色谱柱寿命与功能团结构有关,但是偏离2~7范围越远,色谱柱性能下降的越快。 温度:典型硅胶基质色谱柱的使用温度在5℃与60℃之间,高温使用会缩短柱寿命。 缓冲溶液:生物样品分离通常要求使用缓冲溶液控制流动相的pH值,仔细控制避免缓冲溶液与流动相有机溶剂混合时产生沉淀,色谱柱和HPLC系统不能储存在含盐或缓冲溶液的体系中。 压力:操作压力升高,色谱柱寿命缩短,通常要求色谱柱使用中压力低于3000psi。压力与流动相流速和柱长成正比,与粒径平方成反比。相同规格的3µm填料色谱柱压力约为5µm色谱柱的两倍。流动相不同压力也会有明显差异,如60/40的甲醇/水大约是60/40甲醇/水的两倍。随色谱柱使用,压力会缓慢增加,色谱柱压力突然增加可能是色谱柱或连接管堵塞。 2、色谱柱的维护 ......阅读全文
色谱柱柱温的高低对色谱分离有什么影响
柱温越高,出峰越快,保留时间越短,有些组份可能分离度不够.无法完全分开.
色谱柱柱温的高低对色谱分离有什么影响
柱温越高,出峰越快,保留时间越短,有些组份可能分离度不够.无法完全分开.
色谱柱柱温的高低对色谱分离有什么影响
柱温越高,出峰越快,保留时间越短,有些组份可能分离度不够.无法完全分开.
色谱柱常见操作维护
色谱柱常见操作维护一、正确使用缓冲盐 缓冲盐通常易溶于水,难溶于有机溶剂,因此缓冲盐使用不当会使其析出,堵塞填料基质上的微孔和颗粒间的空隙,使填料板结,柱压上升;同时阻碍了基质上键合的碳链自由舒展,使色谱柱的保留能力下降,柱效降低。缓冲盐析出后,去除非常困难,因此,正确的使用缓冲盐对延长色谱柱
色谱柱使用及维护
色谱柱使用及维护12大要点在日常分离分析工作中,色谱柱的正确使用和维护十分重要,色谱柱使用是否得当,直接影响色谱柱的寿命,稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。在色谱操作过程中,需要注意下列问题,以维护色谱柱。1柱子在装卸、更换时,动作要轻,接头拧紧要适度。必须防止较强的机械振动,以免柱床产生
色谱柱使用及维护
新的色谱柱在使用之前应该在您自己的液相色谱仪上进行性能测试,即使用色谱柱附带的检验报告上测试条件和样品来测定该色谱柱的柱效。并且,在以后的使用中,应时常对色谱柱进行测试。卡套柱的安装(不加预柱)1.将卡套架套入柱芯;2.将两片夹套片嵌入柱芯的凹槽,使柱芯高于夹套;3.将已套到柱芯上的卡套架向上推,直
色谱柱应该怎样维护?
色谱柱的正确使用和维护十分重要,稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。在色谱操作过程中,需要注意下列问题,以维护色谱柱。 ① 避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况;柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料,因此在调节流速
色谱柱应该怎样维护
色谱柱的正确使用和维护十分重要,稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。在色谱操作过程中,需要注意下列问题,以维护色谱柱。 避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况;柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料,因此在调节流速时应该缓慢进行,在阀
色谱柱使用及维护
新的色谱柱在使用之前应该在您自己的液相色谱仪上进行性能测试,即使用色谱柱附带的检验报告上测试条件和样品来测定该色谱柱的柱效。并且,在以后的使用中,应时常对色谱柱进行测试。 卡套柱的安装(不加预柱) 1.将卡套架套入柱芯;2.将两片夹套片嵌入柱芯的凹槽,使柱芯高于夹套;3.将已套到柱芯上的卡套架向上推
色谱柱应该怎样维护?
色谱柱的正确使用和维护十分重要,稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。在色谱操作过程中,需要注意下列问题,以维护色谱柱。① 避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况;柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料,因此在调节流速时应该缓慢进行,在
色谱柱参数对分离的影响
气相色谱分析中柱长、柱内径、柱温、载气流速、固定相、进样等操作条件对分离的影响 1、柱长,柱内径:一般讲,柱管增长,可改善分离能力,短则组分馏出的快些;柱内径小分离效果好,柱内径大处理量大,但柱内径过大,将导致担体不能均匀地分布在色谱柱中。分析用柱管一般内径为3-6毫米,柱长为1-4米。2、柱温:是
液相色谱仪色谱柱的分离条件
多数液相色谱仪色谱柱有很宽的试验条件范围,但具体应用又受到限制,主要是pH值、柱温和流动相的选择。 传统硅胶为基质的键合相要求pH值在2~8之间,极端pH值的流动相能“溶解”硅胶,使键合相流失。结构非碱性组分的保留不断减少,碱性组分的保留增加,引起碱性组分峰变宽。如果一定要用高或低pH值的流动相
液相色谱仪色谱柱的分离条件
多数液相色谱仪色谱柱有很宽的试验条件范围,但具体应用又受到限制,主要是pH值、柱温和流动相的选择。 传统硅胶为基质的键合相要求pH值在2~8之间,极端pH值的流动相能“溶解”硅胶,使键合相流失。结构非碱性组分的保留不断减少,碱性组分的保留增加,引起碱性组分峰变宽。如果一定要用高或低pH值的流动相,
色谱柱的分离柱效好坏由什么决定?
决定相邻组分分离好坏的主要因素有:*,两个组分的保留值之差,也就是色谱柱内迁移速率的差异;它取决于各组分与固定相、流动相的相互作用的差异。第二,组分的峰宽反映组分区带在移动过程中的扩张程度,很大程度上取决于色谱的分离条件。 在考虑液相色谱色谱柱的分离柱效时,需要特别注意以下几个问题。 *
“高性能色谱分离材料和色谱柱的研制”课题顺利通过验收
2010年6月11日,“十一五”国家科技支撑计划重大项目《科学仪器设备研制与开发》——“高性能色谱分离材料和色谱柱的研制”课题验收会议在天津举行。会议由项目组织单位国家质检总局科技司组织,科技部科研条件与财务司吴学梯副司长、天津市科学技术委员会的李宝纯副主任,天津滨海新区科技局黄亚楼主任等多位领
液相色谱柱的使用和维护注意事项
色谱柱的正确使用和维护十分重要,稍有不慎就会降低柱效缩短使用寿命甚至损坏在色谱操作过程中,需要注意下列问题,以维护色谱柱 避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况;柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料,因此在调节流速时应该缓慢进行,在阀进样时
气相色谱柱的日常维护和常规保养(四)
4)样品及前处理 样品要尽可能清洁,可选用样品过滤器或样品预处理柱(SPE)对样品进行预处理;若样品不便处理,要使用保护柱。流动相中所使用的各种有机溶剂要使用色谱 纯,配流动相的水最好是超纯水或双蒸水。如果将所配得流动相再经过0.45μm的滤膜过滤一次则更好,尤其是含盐的流动相。
气相色谱柱的日常维护和常规保养(二)
2)当反相使用高浓度缓冲盐时,注意过渡 在使用高浓度的盐或缓冲液作洗脱剂时,一定要注意应先用10%左右的低浓度的有机相洗脱剂过渡一下,否则缓冲液中的盐在高浓度的有机相中很容易析出,造成系统堵塞。另外,在发现系统压力升高异常时,要仔细检查,段段排除包括保护柱、混合器、管路或者流通池等。
气相色谱柱的日常维护和常规保养(六)
6)色谱柱冲洗保养 当使用了缓冲液或含盐的流动相,实验完成后应用10%的甲醇水溶液冲洗30分钟,洗掉色谱柱中的盐,再用甲醇冲洗30分钟。注意:不能用纯水冲洗柱子,应 该在水中加入至少10%的甲醇,防止将填料冲塌陷。还有就是绝对不能在这个工作上面打折扣,否则,一些保留强的杂质没有洗脱下来,只能
液相色谱柱的使用和维护注意事项
影响液相色谱柱寿命的主要因素 流动相因素 1.流动相pH 不同基质的填料具有不同的pH适用范围。常温下无定形硅胶在纯水中的溶解度约为100mg·L-1,且在pH 1~9的范围内溶解的硅胶量几乎是常量,考虑到溶解速度的影响,对于硅胶基质的填料,其所能承受的流动相pH范围约为1~8。键合相硅胶填料
气相色谱柱的日常维护和常规保养(三)
3)当更换色谱柱时,原来的实验情况发生变化首先,如果之前开发方法时色谱柱已经做过别的样品,那么之前的样品或使用的流动相对这个样品分析可能有干扰,只能重新找条件。建议:开发方法时使用新的色 谱柱。(其次,如果是更换了品牌发生这样的情况,可能是由于不同品牌的键合技术不同,造成了选择性的细微差异
液相色谱柱的使用和维护注意事项
液相色谱柱的使用和维护注意事项色谱柱的正确使用和维护十分重要,稍有不慎就会降低柱效缩短使用寿命甚至损坏在色谱操作过程中,需要注意下列问题,以维护色谱柱 避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况;柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料,因此在调节
气相色谱柱的日常维护和常规保养(一)
色谱柱利用色谱柱先将混合物分离,然后利用检测器依次检测已分离出来的组分。色谱柱的直 径为数毫米,其中填充有固体吸附剂或液体溶剂,所填充的吸附剂或溶剂称为固定相。与固定相相对应的还有一个流动相。流动相是一种与样品和固定相都不发生反 应的气体,一般为氮或氢气。 待分析的样品在色谱柱顶端
气相色谱柱的日常维护和常规保养(五)
5)色谱柱基线问题 通常情况,基线问题是由于系统或者流动相引起的,和色谱柱关系不大。可能导致的原因:(1)泵头进气泡(2)系统污染(3)流通池漏液(4)流动相使用的某成分易挥发不稳定(检测波长不合适)(5)检测波长低,水的质量不好等等。
12个液相色谱柱的使用和维护要点
在日常分析工作中,色谱柱的正确使用和维护十分重要,色谱柱使用是否得当,直接影响色谱柱的寿命,稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。 在色谱操作过程中,需要注意下列问题,以维护色谱柱。 1、柱子在装卸、更换时,动作要轻,接头拧紧要适度。必须防止较强的机械振动,以免柱床产生空隙。 2、如果仪
PH梯度萃取分离及柱色谱分离原理
pH梯度萃取法是分离酸性、碱性、两性成分常用的手段.其原理是由于溶剂系统 pH变化改变了它们的存在状态(游离型或解离型),从而改变了它们在溶剂系统中的分配系数.如混合黄酮苷元,由于结构中酚羟基的数目和位置不同,...
气相色谱柱如何进行安装和维护?
气相色谱柱是气相色谱仪的核心部分,所以色谱柱的使用、保养与维护的内容就很重要,本文主要介绍关于气相色谱柱的相关知识。 一、气相色谱柱的安装 首先,当然是色谱柱的安装。安装色谱柱可以说是气相色谱使用的入门级操作,大家一般情况下都是驾轻就熟的。但是,有几个问题还是要提起注意: 1
反相液相色谱柱应当怎样维护和使用
反相液相色谱柱是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式,任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分,这部分越大,一般保留值越高,在液相色谱中这是应用面较广的一种分离模式,在生物大分子的反相液相色谱条件下,流动相多采用酸性的、低离子强度的水溶液,并加一定比例的能与水互溶
常见的柱色谱和分离化学成分机理
液相柱1、C18、C8等反相柱。2、氨基柱、苯基柱、氰基柱、硅胶等正相柱3、手性柱。(大赛璐)4、离子柱(离子交换柱和离子分析柱)5、凝胶柱(体积排阻法SEC)6、亲和色谱柱。
常见的柱色谱和分离化学成分机理
液相柱1、C18、C8等反相柱。2、氨基柱、苯基柱、氰基柱、硅胶等正相柱3、手性柱。(大赛璐)4、离子柱(离子交换柱和离子分析柱)5、凝胶柱(体积排阻法SEC)6、亲和色谱柱。