单细胞提取与质谱联用的新型无损提取检测技术(一)
单细胞代谢组学分析能够为对细胞功能分析提供诸多帮助。但是受制于测试条件问题,所得到的结果一直并不理想。随着质谱与单细胞提取手段的发展,目前已经出现了多种不同的提取方法。本文就基于FluidFM提取技术和MALDITOF联用的新型无损提取测试技术进行简述。众所周知由于细胞异质性的存在,使得每个细胞的实际结构、功能都不完全相同,因此对于单细胞层面的研究变得十分具有意义。当前单细胞测序、转录技术已经发展的较为完备,具有比较成熟的模型。但是单细胞代谢组学的研究却仍处于起步阶段,因为细胞的代谢是十分复杂的。这不仅是细胞内代谢的化学成分种类多,浓度低,并且标记很有可能导致其生物功能被干扰改变。因此使用高灵敏质谱的测量策略有可能解决这一问题。除了检测仪器,提取手段在检测过程中也起到十分重要的地位。目前的提取主要手段是将细胞消化、悬浮,然后进行裂解得到内容。这种方法需要将细胞悬浮并使用酶进行裂解。这一过程改变了细胞生存的环境,将无法避免的对细胞......阅读全文
单细胞蛋白的生产特性
单细胞蛋白质生产周期短。单细胞生物繁殖特别快,世代周转迅速。如酵母菌在良好条件下每接种100千克,1天即可获得2500千克酵母,其生长繁殖速度约为大豆的1300倍,为动物生长的2000倍。所以,这类饲料生长速度快,世代周转迅速。 生产单细胞蛋白质饲料产品的原料多为烃类及其衍生物、天然气、石油加
单细胞研究指南:细胞分离
多细胞生物的每个细胞都携带着相同的遗传学信息。不过,近年来蓬勃发展的单细胞研究告诉我们,每一个细胞都是独一无二的。不同类型的细胞激活特定组合的机制,即使是同类型细胞,基因表达也会出现差异。 那么,细胞之间的哪些差异有生物学意义,哪些差异来自于技术偏好呢?要获得可靠的结果又需要研究多少细胞呢?这
单细胞生物的主要影响
单细胞生物虽然个体微小,但是与人类的生活有着密切的关系。多数单细胞生物是浮游生物的组成部分,是鱼类的天然饵料。草履虫对污水净化有一定的作用,据统计,一只草履虫每小时大约能形成60个食物泡,每个食物泡中大约含有30个细菌,因此,一只草履虫每天大约能吞食43000个细菌。但是单细胞生物也有对人类有害
单细胞mRNA差异显示实验
目前有几种方法可以显示生理刺激下组织样本中未知基因的表达水平变化。然而, 很多组织内的细胞又存在形态和功能上的异质性,因此常常需要从单个细胞水平研究基因表达的差异。现在,我们介绍一种新方法,它常规用来在单细胞水平考察未知基因的差异性表达。现代神经科学研究技术作者:U.Windhorst & H. J
单细胞生物的生产特性
单细胞蛋白质生产周期短。单细胞生物繁殖特别快,世代周转迅速。如酵母菌在良好条件下每接种100千克,1天即可获得2500千克酵母,其生长繁殖速度约为大豆的1300倍,为动物生长的2000倍。所以,这类饲料生长速度快,世代周转迅速。 生产单细胞蛋白质饲料产品的原料多为烃类及其衍生物、天然气、石油加
单细胞动物的进化过程
当生命进化到真核细胞以后,便有了动物和植物之分。最早的动物叫原生动物,是最低等的一类动物,它的个体是由一个细胞构成的。仅管如此,“麻雀虽小却五脏俱全”,这是一个完整的生命活动体,拥有作为一个动物应具备的主要生活机能,如新陈代谢、刺激感应、运动和繁殖等,它的体内有了原始的分化,各具一定功能,形成了
单细胞mRNA差异显示实验
实验方法原理 ##流程图 试剂、试剂盒 溶液和缓冲液 仪器、耗材
单细胞凝胶电泳介绍
单细胞凝胶电泳(single-cell gel eiectrophoresis,SCGE)又称慧星试验(comet assay)是一项较新的电泳方法。自1978年被Rydcbert B.等人成功地用于检验DNA单链断裂以来,经过不断的改进,已成为一种快速、灵敏、简便的检测DNA损伤的方法,广泛地应用
单细胞分选效率的分析
引言在单克隆细胞培养时,手动有限稀释法是最经典的分离单细胞手段之一。这种方式分离单细胞,每个孔中落进去的细胞数目符合泊松分布。依靠单细胞分选仪器分离单细胞的效率,无论从分选能力还是重复性都要明显优于手动的有限稀释方法。测定一款设备分选效率的标准方法,是用荧光校准微球来分选检验。实验方法Namocel
新型单细胞活性分析技术
近日,一项刊登在国际杂志Nature Biotechnology上的研究论文中,来自加利福尼亚大学的研究人员通过运用一种分析单一细胞基因活性的先进技术,鉴别出了人类大脑脑细胞的特性,该研究揭示,如今进行大规模的细胞调查分析比过去我们所认为的要更加高效,而且廉价。 研究者Arnold
单细胞生物的科技应用
单细胞分析 单细胞分析是分析化学、生物学和医学多学科相互渗透发展形成的跨学科前沿领域。单细胞分析的各种方法,包括毛细管电泳、微流控芯片、多种光学显微镜(荧光显微镜、聚焦荧光显微镜、全内反射荧光显微镜、多光子荧光显微镜、荧光相关显微镜、近场扫描光学显微镜等)、扫描电化学显微镜、质谱成像、原子力显
单细胞mRNA差异显示实验
实验方法原理 ##流程图试剂、试剂盒 溶液和缓冲液仪器、耗材 水浴槽PCR热循环仪微量离心机塑料制品和滤器实验步骤 一、RNA 的分离收集对照组和实验组细胞,放入含 45ul2 mmol/L DTT 的 1.5 ml 微量离心管中。95℃ 水浴热解 2 min。每管加入以下物质:37℃ 温育 30
单细胞分离仪最新应用
随着人们对环境研究的不断深入,研究人员逐渐将目光转向藻类的单细胞层面:有些需要对藻类进行单细胞级别的分析(如藻类单细胞测序等),也有需要对单细胞藻类进行培养。这样就面临一个棘手的问题,那就是如何获取藻类的单个细胞。通常实验室里的方式,是在显微镜下用毛细管吸取。这种方式比较直观,对哪个细胞感兴趣就挑哪
单细胞生物的相关介绍
单细胞生物指的是身体只有一个细胞,在生物圈中还有肉眼很难看见的生物。 生物可以根据构成的细胞数目分为单细胞生物(Protozoa)和多细胞生物(Metazoa)。单细胞生物只由单个细胞组成,而且经常会聚集成为细胞集落。单细胞生物个体微小,全部生命活动在一个细胞内完成,一般生活在水中。 第一个
单细胞铺板的原理介绍
单细胞铺板是将一个孔加入少量无血清培养基,晃动浸润整个孔底,然后用移液枪吸至第二孔,同样方法浸润孔底,其它孔依此类推,这样整个孔底都是湿润的,细胞悬液会平铺在整个孔底。 加细胞悬液的时候可以避免加在中间中间细胞多,而加在周边晃匀后周边细胞多中间少的现象,细胞分散较均匀,注意加完细胞悬液后要放工作台
单细胞测序的临床应用
近期精准医学的进展集中在发展基于基因组学的诊断和治疗。这些方法通常包括从患者的组织样本中生成DNA或RNA序列信息,并分析它以确定可用于诊断、预后或通知临床管理的特定特征。‘bulk’一词指的是从大量细胞中集体生成基因组数据的方法,或者在无细胞DNA的情况下,来自许多细胞的基因组材料。因此,这些基因
关于碳醇提取的要求和提取介绍
1、碳-醇提取的要求: 质量能保证的纯工业用醇,可用于提取乙醇。如没有乙醇,也可以用试剂纯的甲醇。要取1升溶剂蒸馏并蒸干,来检查它的杂质含量。只要残渣小于5毫克,这种溶剂就可以用。 2、碳-醇提取的乙醇提取: 从碳中除去残存的氯仿的方法,是往碳上吹入已预净化的温热空气(在索氏提取器内)并通
关于香菇多糖的提取的提取方法介绍
香菇多糖属于极性大分子化合物,其特定的结构与免疫活性密切相关。一般认为:增加多糖溶解度有利于提高其生理活性;中等相对分子质量多糖的活性超过过高的或过低的相对分子质量多糖;可溶于热水的多糖被证实有抗肿瘤活性。目前香菇多糖的提取多采用热水及稀碱溶液,避免在强酸、碱溶液中进行,否则极易造成多糖中糖苷键
核酸提取仪核酸提取仪种类、优势、特点
酸提取仪,是应用配套的核酸提取试剂来自动完成样本核酸的提取工作的仪器,核酸提取仪分为两类:一类是大型的自动化的,一般称为自动液体工作站;另一类是小型自动核酸提取仪,利用封装好的配套试剂自动完成提取纯化过程。大型自动液体工作站因为设备成本高昂,运行成本高,适合一次提取几千个同一种类标本,所以真正得
溶剂提取法提取白藜芦醇的介绍
溶剂提取法是一种国内外应用最广泛的提取方法。常用的溶剂提取法主要包括3种:渗漉法、浸提法和回流法。回流提取白藜芦醇的常用溶剂有甲醇、乙醇、丙酮、醋酸乙酯等,其中以60%~90%乙醇水溶液对白藜芦醇原植物进行回流提取最为常用,其他溶剂由于效率低或毒性相对较大,故很少使用。
茶多酚提取设备应用的提取方法有那些
从茶叶中制备茶多酚的传统方法主要分为以下三类。溶剂提取法 将茶叶用极性溶剂浸渍,然后把浸取液进行液—液萃取分离,最后浓缩得到产品。目前工业化生产主要采用此法。产品收率5%~10%,产品纯度为80%~98%。所用溶剂有丙酮、乙醚、甲醇、已烷及三氯甲烷等。该法生产成本高,且易造成污染。离子沉淀法 用金属
提取实验中提取率及含量的计算
提取率(%)=(C×V×10-6)W
提取胡萝卜素提取的方法介绍
一、胡萝卜素的萃取法提取: 1、原理:胡萝卜素易溶于有机溶剂。 2、萃取剂的选择:萃取胡萝卜素的有机溶剂应该具有很高的沸点,能够充分溶解胡萝卜素,并且不与水混溶。最佳萃取剂为石油醚。 3、影响萃取的因素 二、主要因素:萃取剂的性质和使用量。 三、次要因素:原材料颗粒的大小、紧密程度、含
超声提取-台式恒温超声波提取机
超声提取这一技术在被发现50多年后真正走向产业化应用。在基础上,不断完善配套系统,开发出药材物料输送及控制系统、提取溶媒流量及温度控制系统、药渣挤干及烘干处理系统、提取药液渣液分离系统、提取管段搅拌系统、提取管段加热保温系统、在线清洗(WIP)系统、集中电气操作控制等系统,构成一套功能齐全的机电一体
微波提取法提取叶黄素的方法介绍
微波是一种瞬时穿透式加热方式,在微波场的作用下破碎植物细胞壁,从而加快了萃取速率和有效地提高了产品得率。微波提取技术在天然色素提取方面也取得了良好的效果。其优点是既降低了设备投资和运行成本,又符合环保要求 。
热水提取法提取胶原蛋白的方法介绍
热水提取法是将原料经过除杂蛋白等前处理之后,在一定条件下直接用热水浸提已经变性了的胶原蛋白或胶原蛋白水解物,使用的温度有100℃沸水浴、60-70℃、40-45℃
超声提取与热回流提取技术优点对比
超声提取主要是运用了超声波的原理,由于超声波自身所具有的性质空化作用,机械效应及热效应,由于自身的这几个特点决定了它对中药提取的得天独厚的优势,它利用自己的空化效应和机械效应能迅速作用于中药材植物细胞的细胞壁,使得纤维素分子和果胶分子发生分离,细胞壁的架构发生破坏,细胞内容物比如多糖类、黄酮类、生物
脂肪检测—索式提取器提取法详解
原理样品经前处理后,放入圆筒滤纸内,将滤纸筒置于索式提取管中,利用YM或石油醚在水浴中加热回流,使样品中的脂肪进入溶剂中,回收溶剂后所得到的残留物,即为脂肪(粗脂肪)。采用这种方法测出游离态脂,此外还含有磷脂、色素、蜡状物、挥发油、糖脂等物质,所以用索氏提取法测得的脂肪为粗脂肪。适用范围与特点索氏提
总RNA提取实验——氯化锂提取法
实验方法原理用高浓度尿素变性蛋白并抑制RNA 酶,用氯化锂选择沉淀RNA ,其特别适合于从大量样品中提取少量组织RNA ,具有快速简洁的长处,但也存在少量DNA的污染及RNA 得率不高,小RNA 片断丢失的缺陷。实验材料微生物动物细胞植物组织试剂、试剂盒氯化锂尿素Tris-HCLEDTASDS仪器、
多功能单细胞显微操作系统FluidFM-BOT在单细胞力学实验...
多功能单细胞显微操作系统FluidFM BOT在单细胞力学实验中的创新应用瑞士Cytosurge公司的多功能单细胞显微操作系统FluidFM BOT,是将原子力系统、微流控系统、纳米位移台系统合为一体的单细胞操作系统,能够在单细胞水平上为研究者提供很大的便利,可应用于单细胞力谱、单细胞质谱、单细