常见色谱仪的色谱分离原理
高效液相色谱法按分离机制的不同分为液固吸附色谱法、液液分配色谱法(正相与反相)、离子交换色谱法、离子对色谱法及分子排阻色谱法。 1.液固色谱法:使用固体吸附剂,被分离组分在色谱柱上分离原理是根据固定相对组分吸附力大小不同而分离。分离过程是一个吸附-解吸附的平衡过程。常用的吸附剂为硅胶或氧化铝,粒度5~10μm。适用于分离分子量200~1000的组分,大多数用于非离子型化合物,离子型化合物易产生拖尾。常用于分离同分异构体。 2.液液色谱法:使用将特定的液态物质涂于担体表面,或化学键合于担体表面而形成的固定相,分离原理是根据被分离的组分在流动相和固定相中溶解度不同而分离。分离过程是一个分配平衡过程。 涂布式固定相应具有良好的惰性;流动相必须预先用固定相饱和,以减少固定相从担体表面流失;温度的变化和不同批号流动相的区别常引起柱子的变化;另外在流动相中存在的固定相也使样品的分离和收集复杂化。由于涂布式固......阅读全文
液相色谱仪的分离系统
该系统包括色谱柱、连接管和恒温器等。色谱柱一般长度为10~50cm(需要两根连用时,可在二者之间加一连接管),内径为2~5mm,由"优质不锈钢或厚壁玻璃管或钛合金等材料制成,住内装有直径为5~10μm粒度的固定相(由基质和固定液构成).固定相中的基质是由机械强度高的树脂或硅胶构成,它们都有惰性(
电泳色谱仪的分离模式
电泳是电解质中的带电粒子在电场作用下,以不同的速度向电荷相反方向迁移的现象。利用电泳现象对化学和生物化学组分进行分离的仪器称为电泳色谱仪(简称电泳仪),电泳仪的分离模式有区带电泳、移界电泳、等电聚焦电泳和等速电泳等。一、区带电泳:不同的离子成分在均一的缓冲液中分离成独立的区带,可用染色等方法显示出来
色谱仪分离过程的特点
色谱仪分离过程具有应用范围广、分离效率高、操作模式多样和高灵敏度在线检测等特点。一、应用范围广:从极性到非极性、离子型到非离子型、小分子到大分子、无机到有机以及生物活性物质、热稳定到热不稳定的化合物,都可用色谱分离,尤其在生物大分子分离和制备方面其它方法无法代替。二、分离效率高:每米柱长可达几千至几
液相色谱仪的分离系统
液相色谱仪的分离系统由色谱柱、色谱柱的连接部件、柱恒温装置和固定相等组成。一、色谱柱:液相色谱仪的色谱柱一般用内部抛光的不锈钢制成,柱内径为1~4mm,柱长为10~50cm,柱形多为直形,内部充满微粒固定相。近年来,由于高性能填充剂的细粒化,3~5um微粒填料的使用,趋向柱内径为0.8~1.5mm,
凝胶色谱仪的分离模式
凝胶色谱仪是以多孔性物质作为固定相,样品分子受固定相孔径大小的影响而实现分离。样品分子与固定相之间不存在相互作用力(吸附、分配和离子交换等),因而凝胶色谱仪又称为体积排斥色谱仪、空间排阻色谱仪和分子筛色谱仪等。比固定相孔径大的溶质分子不能进入孔内,迅速流出色谱柱,不能被分离。比固定相孔径小的分子才能
液相色谱仪色谱柱的分离条件
多数液相色谱仪色谱柱有很宽的试验条件范围,但具体应用又受到限制,主要是pH值、柱温和流动相的选择。 传统硅胶为基质的键合相要求pH值在2~8之间,极端pH值的流动相能“溶解”硅胶,使键合相流失。结构非碱性组分的保留不断减少,碱性组分的保留增加,引起碱性组分峰变宽。如果一定要用高或低pH值的流动相,
液相色谱仪色谱柱的分离条件
多数液相色谱仪色谱柱有很宽的试验条件范围,但具体应用又受到限制,主要是pH值、柱温和流动相的选择。 传统硅胶为基质的键合相要求pH值在2~8之间,极端pH值的流动相能“溶解”硅胶,使键合相流失。结构非碱性组分的保留不断减少,碱性组分的保留增加,引起碱性组分峰变宽。如果一定要用高或低pH值的流动相
色谱仪分离机理
色谱仪是利用样品各组分在固定相和流动相中分配或吸附等作用的差异,使各组分在作相对运动的两相中反复多次受到上述各作用而达到相互分离。组分要完全分离,两峰间的距离必须足够远,两峰间的距离是由组分在两相间的分配系数决定的,即与色谱过程的热力学性质有关。但是两峰间虽有一定距离,如果每个峰都很宽,以致彼此重
仪器课堂之气相色谱仪应用的色谱法与色谱分离原理
气相色谱仪是一种高效、快速、高灵敏度的现代分析仪器,在我国正逐渐普及并广泛应用。主要应用于在石油、化工、生物化学、医药卫生、食品工业、环保等方行业。 气相色谱仪应用的是色谱法。色谱法用于分离分析复杂的多组分混合物,是一种根据分子的不同迁移速度而达到分离的方法。色谱技术是建立在吸附、分配、离
薄层色谱分离法分离原理
薄层色谱法是一种吸附薄层色谱分离法,它利用各成分对同一吸附剂吸附能力不同,使在流动相(溶剂)流过固定相(吸附剂)的过程中,连续的产生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附,从而达到各成分的互相分离的目的。
小型气相色谱仪气相色谱法的分离原理解析
小型气相色谱仪的分离原理是利用要分离的诸组分在流动相(载气)和固定相两相间的分配有差异(即有不同的分配系数),当两相作相对运动时,这些组分在两相间的分配反复进行,从几千次到数百万次,即使组分的分配系数只有微小的差异,随着流动相的移动可以有明显的差距,zui后使这些组分得到分离。 气相色谱法的理论
液相色谱仪的色谱法分离方法
色谱法的最早应用是用于分离植物色素,其方法是这样的:在一玻璃管中放入碳酸钙,将含有植物色素(植物叶的提取液)的石油醚倒入管中。此时,玻璃管的上端立即出现几种颜色的混合谱带。然后用纯石油醚冲洗,随着石油醚的加入,谱带不断地向下移动,并逐渐分开成几个不同颜色的谱带,继续冲洗就可分别接得各种颜色的色素
常见高效液相色谱的分离类型
常见高效液相色谱法按其分离原理可以分为液-固吸附色谱法、正相液-液分配色谱法、反相液-液分配色谱法、离子交换色谱法、离子对色谱法及分子排阻色谱法。以下对这几种高效液相色谱法进行简介: 1.高效液相色谱法:在液固吸附色谱法中,流动相为液体,并使用固体吸附剂,被分离组分在色谱柱上分离原理是根
色谱法的分离原理
GC主要是利用物质的沸点、极性及吸附性质的差异来实现混合物的分离,待分析样品在汽化室汽化后被惰性气体(即载气,也叫流动相)带入色谱柱,柱内含有液体或固体固定相,由于样品中各组分的沸点、极性或吸附性能不同,每种组分都倾向于在流动相和固定相之间形成分配或吸附平衡。但由于载气是流动的,这种平衡实际上很难建
色谱法的分离原理
凝胶色谱,又称空间排阻色谱。它是利用某些凝胶对混合物各组分因分子量不同,其阻滞作用也不同而进行分离、分析的方法。凝胶色谱的分离要理和其它色谱法不同,它类似于分子筛的作用,但凝胶的孔径要比分子筛大得多,一般为几百至几千埃。色谱柱内填充具有一定大小孔穴的凝胶。当样品进入色谱柱后,不同大小的样品分子(图1
气相色谱的分离原理
气相色谱是一种物理的分离方法。利用被测物质各组分在不同两相间分配系数(溶解度)的微小差异,当两相作相对运动时,这些物质在两相间进行反复多次的分配,使原来只有微小的性质差异产生很大的效果,而使不同组分得到分离。
色谱法的分离原理
溶于流动相(mobile phase)中的各组分经过固定相时,由于与固定相(station phase)发生作用(吸附、分配、排阻、亲和)的大小、强弱不同,在固定相中滞留时间不同,从而先后从固定相中流出。又称为色层法、层析法。 HPLC是在经典的液相色谱法基础上发展起来的,其以液体作为流动相,并
色谱法的分离原理
GC主要是利用物质的沸点、极性及吸附性质的差异来实现混合物的分离,待分析样品在汽化室汽化后被惰性气体(即载气,也叫流动相)带入色谱柱,柱内含有液体或固体固定相,由于样品中各组分的沸点、极性或吸附性能不同,每种组分都倾向于在流动相和固定相之间形成分配或吸附平衡。但由于载气是流动的,这种平衡实际上很难建
色谱法的分离原理
色谱法的分离原理 : 当混合物随流动相流经色谱柱时,就会与柱中固定相发生作用(溶解、吸附等),由于混合物中各组分物理化学性质和结构上的差异,与固定相发生作用的大小、强弱不同,在同一推动力作用下,各组分在固定相中的滞留时间不同,从而使混合物中各组分按一定顺序从柱中流出。这种利用各组分在两相中性能上的
聚酰胺色谱的分离原理
聚酰胺分子中既有亲水基团又有亲脂基团,当用极性溶剂(如含水溶剂)作为流动相时,聚酰胺中的烷基作为非极性固定相,其色谱行为类似于反相分配色谱,因黄酮苷的极性大于苷元,所以黄酮苷比苷元容易洗脱;当用非极性流动相(如氯仿—甲醇)时,聚酰胺则作为极性固定相,其色谱行为类似于正相分配色谱。黄酮苷元的极性小于黄
色谱仪分离的基础是什么?
色谱仪是基于固定相对样品中各组分的吸附或溶解能力的强弱进行分离的,这种吸附或溶解能力的强弱可以用分配系数定量。分配系数是在一定温度和压力下,样品组分在固定相和流动相之间的分配达到平衡时,其在固定相和流动相中的浓度之比。当样品组分被流动相带入色谱柱后,在固定相与流动相之间不断地进行分配平衡。分配系数小
色谱仪分离技术的共同特点
色谱仪分离技术的共同特点:1、色谱仪都存在有两个相,即流动相和固定相。流动相是气体或液体,固定相是固体或涂渍在固体表面上的高沸点液体。2、流动相对固定相作相对运动,携带样品通过固定相。3、被分离样品中的各组分与色谱两相间具有不同的作用力,这种作用力一般表现为吸附力和溶解能力。正是这种作用力的差异导致
色谱仪分离方法的选择原则
色谱仪分离方法的选择原则:一、根据相对分子质量选择:1、相对分子质量很低的样品采用气相色谱。2、液液分配色谱、液固吸附色谱和离子交换色谱最适合分析相对分子质量为200~2000的样品。3、相对分子质量大于2000的样品,采用凝胶色谱为最优。二、根据溶解度选择:1、溶于水并能离解的样品,采用离子交换色
色谱仪分离技术的共同特点
色谱仪分离技术的共同特点:1、色谱仪都存在有两个相,即流动相和固定相。流动相是气体或液体,固定相是固体或涂渍在固体表面上的高沸点液体。2、流动相对固定相作相对运动,携带样品通过固定相。3、被分离样品中的各组分与色谱两相间具有不同的作用力,这种作用力一般表现为吸附力和溶解能力。正是这种作用力的差异导致
提高色谱仪分离度的措施
提高色谱仪分离度的措施有提高柱效、提高选择性因子和增大容量因子。一、提高柱效 N:分离度R与理论塔板数 N 的平方根成正比关系,增加塔板数,有利于提高分离度。1、增加柱长可增加 N,改善分离,但分析时间将大大延长,峰产生扩展。2、减小塔板高度 H:(1)根据速率方程的启示,制备一根性能优良的色谱柱是
色谱仪的分离效能指标
色谱仪的分离效能指标有分配系数、分配比、峰高分离度、分离度、理论塔板数、理论塔板高度、有效塔板数、有效塔板高度和柱效率等。一、分配系数K:在一定温度和压力下,组分在固定相和流动相之间的分配达到平衡时的浓度之比称为分配系数K。一定温度下,组分的分配系数K越大,出峰越慢。样品一定时,分配系数K主要取决于
色谱仪分析的分离度解析
色谱仪分析的分离度反应了组分在色谱仪色谱柱中的分离情况,同时体现了选择性和柱效能,即热力学因素和动力学因素,将实现分离的可能性与现实性结合了起来。一、影响分离度大小的因素:1、色谱过程的热力学因素:保留值之差(tR2-tR1)2、色谱过程的动力学因素:峰宽(W1+W2)二、分离度的计算公式:
气相色谱仪的分离系统
分离系统分离系统是色谱仪的心脏部分。其作用就是把样品中的各个组分分离开来。分离系统由柱室、色谱柱、温控部件组成。其中色谱柱是色谱仪的核心部件。色谱柱主要有两类:填充柱和毛细管柱(开管柱)。柱材料包括金属、玻璃、融熔石英、聚四氟等。色谱柱的分离效果除与柱长、柱径和柱形有关外,还与所选用的固定相和柱填料
高效液相色谱仪的分离系统
高效液相色谱仪的分离系统由色谱柱、色谱柱的连接部件、柱恒温装置和固定相等组成。一、色谱柱:高效液相色谱仪的色谱柱一般用内部抛光的不锈钢制成,柱内径为 1~4 mm,柱长为 10~50 cm,柱形多为直形,内部充满微粒固定相。近年来,由于高性能填充剂的细粒化,3~5um 微粒填料的使用,趋向柱内径为
色谱仪分离方法的选择原则
色谱仪分离方法的选择原则:一、根据相对分子质量选择:1、相对分子质量很低的样品采用气相色谱。2、液液分配色谱、液固吸附色谱和离子交换色谱适合分析相对分子质量为 200~2000 的样品。3、相对分子质量大于 2000 的样品,采用凝胶色谱为优。二、根据溶解度选择:1、溶于水并能离解的样品,采用离子交