高效液相色谱仪分析的定性方法
高效液相色谱仪分析过程中影响溶质迁移的因素较多,同一组分在不同色谱条件下的保留值相差很大,即便在相同的操作条件下,同一组分在不同色谱柱上的保留也可能差别很大,因此,高效液相色谱与气相色谱相比,定性的难度更大。高效液相色谱仪分析中常用的定性方法有利用已知标准样品定性、利用检测器的选择性定性和利用紫外检测器全波长扫描功能定性等。一、利用已知标准样品定性:利用标准样品对未知化合物定性是最常用的高效液相色谱定性方法。由于每一种化合物在特定的色谱条件下(流动相组成、色谱柱和柱温等相同),其保留值具有特征性,因此,可以利用保留值进行定性。如果在相同的色谱条件下,被测化合物与标准样品的保留值一致,可以初步认为被测化合物与标准样品相同。若流动相组成经多次改变后,被测化合物的保留值仍与标准样品的保留值一致,就能进一步证实被测化合物与标准样品为同一化合物。二、利用检测器的选择性定性:同一种检测器对不同种类的化合物的响应值是不同的,而不同的检测器对同......阅读全文
高效液相色谱仪的工作原理
高效液相色谱仪的工作原理:储液器中的流动相被高压泵打入检测系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样本溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的“吸附-解吸”的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出
高效液相色谱仪进样系统
高效液相色谱仪进样系统(1)六通阀进样阀 进样阀种类繁多常用的六通阀进样阀。进样体积可通过选择不同体积定量管来改变,常规高效液相色谱仪中通常使用的是10μL和20μL体积的定量管。其手柄有两个位置:一个位置为采样位置(Load),可用平头微量注射器(体积应约为定量管体积的4~5倍)注入样品溶液,样
高效液相色谱仪应用举例(一)
例1.稠环芳烃分析(环境气体分析)样 品:含六苯并苯等8种稠环芳烃的混合物色谱仪:“南京科捷LC600”液相色谱仪,配有色谱工作站检测器:UV紫外检测器,340nm色谱柱:C18键合相(ODS-224),5μm,柱长25cm,柱径4.6mm流动相:甲醇-二氯甲烷(8:2)混合溶剂流 速:1mL/mi
高效液相色谱仪日常维护经验
一.混合溶剂在混合前必须过滤。在混合和过滤的情况下,只能使用有机溶剂,不能使用水系统。由于水系统的物质是纤维素,有机相或多或少地溶解了少量的纤维素,造成污染。二.标准样品或样品应在流动相中溶解,避免了许多麻烦。三.升温提高色谱柱的温度部分是为了增加溶质的溶解度,更重要的是降低溶剂的粘度,从而提高色谱
高效液相色谱仪高压输液系统
高压输液系统一般包括储液器、高压输液泵、过滤器及梯度洗脱装置等。(1)储液器储液器的材料应耐腐蚀,可为不锈钢、玻璃、聚四氟乙烯或特种塑料聚醚醚酮(PEEK),容积一般以0.5~2.0L为宜。使用过程储液器应密闭,以防止溶剂蒸发引起流动相的变化。(2)高压输液泵 高压输液泵是高效液相色谱仪的关键部件,
高效液相色谱仪操作三要点
高效液相色谱仪(HPLC)现已成为有机化学分析的重要手段之一。同样,在食品分析中,无论是残留分析还是成分分析,HPLC也已成为不可或缺的分析仪器。和其它分析仪器一样,你若想让HPLC很好地为你工作、得到可靠的数据,首先你要保养好它,使它处于一个良好的待机状态,这样你操作它进行分析时就可以比较顺利
高效液相色谱仪的工作原理
液相色谱仪是一款以用户为核心的智能化的色谱仪,具有常规HPLC的基本性能,并扩展了更多智能化的功能,能很好的满足用户的各类不同的应用要求,使用户能更加轻松的使用,并获得准确的分析数据。一、原理:高效液相色谱法的原理是在原始的经典色谱法基础上面引用气象色谐的理论,色谱柱则是用特殊的方式用小颗粒装填而成
高效液相色谱仪—脱气常用方法
在食品分析中,无论是残留分析还是成分分析,HPLC 也已成为不可或缺的分析仪器。流动相脱气是HPLC 系统能得到可靠数据的一个很有效的措施。下面分析一下,高效液相色谱脱气的必要性,并总结归纳了脱气常用的方法。 一、脱气的必要性 流动相脱气是HPLC 系统能得到可靠数据的一个很有效的措施。HPLC 泵
高效液相色谱仪国家标准
《高效液相色谱仪》(GB/T 26792-2011)《High performance liquid chromatography》于2011年12月1日实施。
高效液相色谱仪的基本操作
一、实验准备阶段需要配置好实用所需的流动相,要注意所使用的流动相不能对实验或设备造成影响或损害(比如堵塞或腐蚀)。准备好流动相之后,需要对仪器及色谱柱进行冲洗和平衡,确保仪器压力正常,基线稳定。样品填写需要经过必要的净化处理,过0.45um以下微孔滤膜确保样品是澄清溶液,并装入合适的液相色谱样品瓶待
高效液相色谱仪的操作步骤
高效液相色谱仪操作步骤:1). 过滤流动相,根据需要选择不同的滤膜.2). 对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。3). 打开hplc工作站(包括计算机软件和色谱仪),连接好流动相管道,连接检测系统。4). 进入hplc控制界面主菜单,点击manual,进入手动菜单。5). 有一段时间没用,或
高效液相色谱仪的工作原理
液相色谱仪是一款以用户为核心的智能化的色谱仪,具有常规HPLC的基本性能,并扩展了更多智能化的功能,能很好的满足用户的各类不同的应用要求,使用户能更加轻松的使用,并获得准确的分析数据。一、原理:高效液相色谱法的原理是在原始的经典色谱法基础上面引用气象色谐的理论,色谱柱则是用特殊的方式用小颗粒装填而成
高效液相色谱仪的发展历史
1960年代,由于气相色谱对高沸点有机物分析的局限性,为了分离蛋白质、核酸等不易气化的大分子物质,气相色谱的理论和方法被重新引入经典液相色谱。1960年代末科克兰(Kirkland)、哈伯、荷瓦斯(Horvath)、莆黑斯、里普斯克等人开发了世界上第一台高效液相色谱仪,开启了高效液相色谱的时代。高效
高效液相色谱仪主要系统介绍
高效液相色谱仪主要有进样系统、输液系统、.分离系统、检测系统和数据处理系统,下面将分别叙述其各自的组成与特点。 1.进样系统 一般采用隔膜注射进样器或高压进样间完成进样操作,进样量是恒定的。这对提高分析样品的重复性是有益的。 2.输液系统 该系统包括高压泵、流动相贮存器和梯度仪三部分。高压泵的一般压
高效液相色谱仪的工作原理
高效液相色谱仪的工作原理:储液器中的流动相被高压泵打入检测系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样本溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的“吸附-解吸”的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出
高效液相色谱仪的假期症状
高效液相色谱仪假日综合征主要表现为泵堵塞、泵漏、显示屏不亮、击键失败等。1.由于节假日前高效液相色谱仪系统未清洗好,导致盐析或粉尘附着,导致输液泵堵塞,单向阀和滤头一般用10%甲醇水超声清洗1~2小时。基本上是可以解决的。2。泵的泄漏连接点松动,或泵的密封圈变薄,各连接点拧紧,或更换密封圈均可解决。
关于高效液相色谱仪的简介
高效液相色谱仪(HPLC)是应用高效液相色谱原理,主要用于分析高沸点不易挥发的、受热不稳定的和分子量大的有机化合物的仪器设备。它由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相) 内,由于样品溶液中
高效液相色谱仪的使用步骤
高效液相色谱仪也叫高压液相色谱、高速液相色谱、高分离度液相色谱等,它是在经典液相色谱法的基础上,于60年代后期引入了气相色谱理论而迅速发展起来的。它与经典液相色谱法的区别是填料颗粒小而均匀,小颗粒具有高柱效,但会引起高阻力,需用高压输送流动相,故又称高压液相色谱。又因分析速度快而称为高速液相色谱。1
高效液相色谱仪维护及保养
1、手动进样器: 平时应该注意使用二次蒸馏水和甲醇在装载状态及进样分析状态清洗;如果出现漏液现象,原因极可能为转子密封垫磨损或污染,一般要申请维修或更换配件。2、排液阀: 此处不能完全密封或漏液时一般是其中的垫片污染或磨损,可卸下后取出其垫片用异丙醇超声波清洗或更换垫圈。3、单向阀:
高效液相色谱仪的优缺点
高效液相色谱仪(HPLC)是应用高效液相色谱原理,主要用于分析高沸点不易挥发的、受热不稳定的和分子量大的有机化合物的仪器设备。它由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相) 内,由于样品溶液中
高效液相色谱仪的分离原理
储液器中的流动相被高压泵打入检测系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样本溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的“吸附-解吸”的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样本浓度被
高效液相色谱仪日常维护保养
1、流动相的要求:高效液相级色谱醇,二次蒸馏水,缓冲盐一定要过滤;流动相脱气至关重要(可采用抽滤,超声波脱气等方法)2、吸滤头:特殊情况下可拆下滤头抽取以判断其中是否堵塞;亦可用注射器吸取流动相通过吸滤头打出以判断其是否堵塞。若有堵塞情况可用异丙醇超声波清洗;清洗不成功则需要更换。3、单向阀:如
高效液相色谱仪脱气常用方法
在食品分析中,无论是残留分析还是成分分析,HPLC 也已成为不可或缺的分析仪器。流动相脱气是HPLC 系统能得到可靠数据的一个很有效的措施。下面分析一下,高效液相色谱脱气的必要性,并总结归纳了脱气常用的方法。一、脱气的必要性 流动相脱气是HPLC 系统能得到可靠数据的一个很有效的措施。HPLC
高效液相色谱仪-操作规程
高效液相色谱仪14.1 开机前1) 510泵开关置0FF,流速置0.0,压力表指针位零处。2) U6K AB阀置 INJECT C阀置左侧。3) 486,745机开关置0FF。14.2 开机接通室内稳压器电源,待电压指针到220V后,接通本机电源总开关。1) 510泵① 抽液约80ml② 开关置0N
高效液相色谱仪的主要部件
高效液相色谱仪主要有分析型、制备型和专用型三类。 一般由五个部分组成: 高压输液系统 —— 进样系统 —— 分离系统—— 检测系统 —— 数据处理系统 一. 高压输液系统 贮液装置、高压输液泵、过滤器、脱气装置等 1. 贮液器:贮液器用于存放溶剂。溶剂必须很纯,贮液器材料要耐腐蚀
高效液相色谱仪脱气常用方法
脱气的必要性 流动相脱气是HPLC 系统能得到可靠数据的一个很有效的措施。HPLC 泵在输送液体时要产生很大的力量,由于气体的压缩比与液体相比大的多,因而当气泡存在时,我们发现瞬间的流速降低和系统压力下降。如果这个气泡足够大,液相泵将不能输送任何溶剂,而且如果压力低于预先设定的压力低限,泵将停
高效液相色谱仪进样系统
进样系统进样器:是将样品送入色谱柱的装置,进样方式可以分为两种:阀进样或自动进样。比较常用的是采用自动进样器装样。
概述高效液相色谱仪的原理
储液器中的流动相被高压泵打入检测系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样本溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的“吸附-解吸”的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样本浓
高效液相色谱仪操作规程
操作过程:启动前,应按待用样品的方法要求配制流动相,标准样品和所用样品流动相0.22μm膜过滤后超声脱气30min在A、B两阶段,A管路与蓝色盖瓶的水相连接,B管路与蓝色盖瓶的有机相连接。确保每天使用超声波和超滤水及有机相。使用后,所有样品均为过膜(0.22或0.45μm膜)。开机步骤:依次打开电脑
高效液相色谱仪滤芯如何清洗
用20%HNO3, 超声30 min, 后用双蒸水, 超30min,重复这一步骤到pH=7. 然后再用50% MeOH (HPLC gradient grade 的水和MeOH)再超30min, 可能会有改进,不过一般俺是直接换个新的.不知你说的滤芯,是指哪个?如果是石英的溶剂过滤头,只能用HNO3