做好免疫组化染色必须注意的问题(四)

九、选择合适的抗体至今为止,应用于临床的常用抗体有几十种,在这当中又可分为两种类型。1.浓缩型抗体根据近几年来使用的情况认为,它有许多优点,但也有许多不足之处:①可作为各种疾病检测的常备抗体。在各单位的常规活检诊断中,有常见的病例,也有罕见的病例,尤其是后者,有时很长时间才遇到一例,这就给抗体的应用和备用提出了更高的要求,如除了常用的抗体外,还需备用一些较为罕见病例的抗体。这样才能解决临床的诊断问题,如临时购买,则需较长的时间,这样就会延误诊断。实践证明:浓缩型抗体,可作为常备检测抗体。当购买抗体后,根据检测病例的数量,在无菌的条件下,将抗体分成小包装,然后用蜡膜封起来,于-30℃的低温冰箱中保存,临用时取出一支,用指温促其回升至室温,然后用PBS稀释即可使用,这种抗体可保存3年左右。②成本低,价格较便宜。它与即用型的抗体相比较,价格要便宜好多,如以某公司2002年-2003年的CK为例,浓缩型的抗体0.1ml,价格260元,该......阅读全文

免疫组化染色结果容易受哪些因素影响

   众所周知免疫组化技术对于研究肿瘤的发展规律,进行良恶性分类及鉴别诊断具有重要的作用,因此在做此类实验过程中一定要加倍谨慎起来,尤其是免疫组化染色实验,其结果很容易受某些因素影响。那么,免疫组化染色结果容易受哪些因素影响?    专家指出:免疫组化染色的结果,与组织的固定、抗原的修复、抗体的保存

免疫组化染色结果容易受哪些因素影响

   众所周知免疫组化技术对于研究肿瘤的发展规律,进行良恶性分类及鉴别诊断具有重要的作用,因此在做此类实验过程中一定要加倍谨慎起来,尤其是免疫组化染色实验,其结果很容易受某些因素影响。那么,免疫组化染色结果容易受哪些因素影响?    专家指出:免疫组化染色的结果,与组织的固定、抗原的修复、抗体的保

免疫组化非特异性染色消除方法

一、非特异性染色的主要因素 组织的非特异性染色的机理很复杂,其产生的原因主要可分为以下几点: (1)一部分荧光素未与蛋白质结合,形成了聚合物和衍化物,而不能被透析除去。 (2)抗体以外的血清蛋白与荧光素结合形成荧光素脲蛋白,可与组织成分结合。 (3)除去检查的抗原以外,组织中还可能存在类属抗原(如F

免疫组化染色机需要进水口吗

显然,免疫组化(IHC)结果获取过程中最关键的步骤是使用正确的抗体和抗原特异结合并对信号进行放大,但其实免疫组化(IHC)过程中所有的步骤对于生成出色的图像结果都十分重要。免疫组化(IHC)染色经常很难获得最优的结果,但通常可以通过对一些实验流程的变量(例如样品制备、抗原修复以及孵育时间等)进行调整

DAKO-EPOS免疫组化一步染色法

自Nakane(1966)建立了免疫酶标记技术以来,这门技术得到了迅速的发展。DAKO EPOS先进的多聚螯合物免疫组化一步染色法,是一种即用型快速而有效的方法,具有更为简便、更为敏感和高特异性的特点。1.、材料和方法(1)材料均为本院日常活检组织共32例,其中肉瘤5例,淋巴瘤7例,上皮癌12例,胶

购买压力变送器时要注意的四个问题

现在,有很多的人喜欢购买一些比较大牌的东西,因为他们认为大牌东西的质量和性能比较好.其实,人们的这种想法是正确的,压力变送器也是一样,压力变送器的品牌不一样那么使用的效果也会不一样.因此,我们在挑选时一定要仔细.    就介质要求来说,若测量介质为清洁度较高的流体,我们可以使用标准生产的压力变送器;

购买压力变送器时要注意的四个问题

现在,有很多的人喜欢购买一些比较大牌的东西,因为他们认为大牌东西的质量和性能比较好.其实,人们的这种想法是正确的,压力变送器也是一样,压力变送器的品牌不一样那么使用的效果也会不一样.因此,我们在挑选时一定要仔细.    就介质要求来说,若测量介质为清洁度较高的流体,我们可以使用标准生产的压力变送器;

四价染色体的概念

由两条以上同源染色体紧密配对形成的构型。在多倍体生物减数第一次分裂前期,多于两条的称之为多价体,多价体中有四条染色体的便是四价体,其中相互易位的杂种的特征十分明显。

免疫组化实验原理和步骤(三)

免疫组化技术的关键问题1.组织处理恰当的组织处理是做好免疫组化染色的先决条件,也是决定染色成败的内部因素,在组织细胞材料准备过程中,不仅要求保持组织细胞形态完整,更要保持组织细胞的抗原性不受损戒弥漫,防止组织自溶。如果出现自溶坏死的组织,抗原已经丢失,即使用很灵敏的检测抗体和高超的技术,也很难检出所

小儿腹泻必须谨记的用药注意要点

"腹泻"是由不同病因引起的一种综合症。是婴幼儿时期发病率较高的常见病之一,多发于夏秋季。夏季腹泻以细菌感染为主,秋季腹泻以病毒感染为主。如饮食不当、气候突变、营养不良、呼吸道感染等,均可导致腹泻。2岁以下的婴幼儿尤易得病。因婴幼儿消化系统发育尚未成热,消化酶的活性较低,常因外界或内在的环境变化而引起

免疫组化技术典型实验案例学习2

7、我做了两张切片:一张用老试剂盒内还剩下一点的血清而另一张用新试剂盒内的封闭血清,其余试剂(二抗、SP)均用新试剂盒提供的,结果是前一张效果很好,而后一张能够看到特异性染色,但背景太深,拍照效果不佳。--看来封闭血清也是罪会祸首之一。结果分析显示:抗体稀释液的PH值偏低和封闭血清的失效导致了我的免

免疫组化实验注意事项

当免疫组化染色没有出现预期结果时,应系统地查找原因,而每一次只能排除一种可能的原因。那么在做免疫组化实验注意事项有哪些呢?下面我们来详细了解一下:    对照/标本无染色    ① 确认是否忽略了应该加的某种试剂,包括一抗、二抗、三抗及底物等。    ② 确认所有的试剂是否按正确的顺序加入,是否孵育

免疫组化的经验总结(1)-常见问题

免疫组织化学的概念: 免疫组化是利用抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学。免疫组化实验中常用的抗体为单克隆抗体和多克隆抗体。免疫组化实验所用的组织和细胞

XRF问题汇总(四)

31.在用X-ray测Pb的时候有PbLb1分析线.请问有没有PbLb2分析线? (1) Pb的La、Lb1是两条最灵敏线。其他线的灵敏度很低,不便于常规使用。 (2) 有PbLb2分析线,但其强度太弱,也就是说相对灵敏度很低,一般情况下都选用Pb的Lb1线。  32.怎么结合谱线的峰值看EDX的测

确保热重分析仪的测量准确性这几个问题您必须注意

  确保热重分析仪的测量准确性,要注意以下问题:   1. 测量样品要放在坩埚中间部位;   2. 温度校准时,炉子下放的磁铁要接近炉子但不要碰上;   3. 当温度小于800℃时,气体流量选择60mL/min;当温度大于800℃时,气体流量选择100mL/min;   4. 当热耦移动或者

选择离心机三个必须重视的问题

用户按使用场合、物料性质等因素选择合适的离心机,以达到预期的目的。选型时有以下三个必须重视的问题:  1 防腐性能:离心机所分离的物料一般都具有一定的腐蚀性,与物料接触部分的材质,必须能够达到耐腐蚀的要求,以保证安全使用。  结构件材料种类(304、321、316L、钛板)、密封圈、密封垫材质,表面

选择离心机三个必须重视的问题

用户按使用场合、物料性质等因素选择合适的离心机,以达到预期的目的。选型时有以下三个必须重视的问题:1 防腐性能:离心机所分离的物料一般都具有一定的腐蚀性,与物料接触部分的材质,必须能够达到耐腐蚀的要求,以保证安全使用。结构件材料种类(304、321、316L、钛板)、密封圈、密封垫材质,表面处理措施

移液器的选购时必须注意的三大

移液器的选择,一般注意从以下几个方面进行考虑: 1.产品性能,即移液器的准确性和重复性 对于绝大多数用户而言,购买之前检测产品性能既有难度又无必要。因此,主要还是依据制造厂商提供的技术数据。但在这里还是要说明两点:其一,不要轻易相信卖家的口头承诺,一定要查阅制造商提供的书面材料;其二,

细胞免疫染色和免疫组化有什么区别

如果你的片子和操作过程都是一样,而一组没信号、另一组却有信号,那出现差异的原因就应该是一抗的反应过程(不知你的显色过程是怎样的);而你要是能确定看到的结果不是基因表达的实际情况,即你所说的非特异染色,那就应该是抗体的原因,单就非特异染色而言,可能是你的抗体稀释度不够,可以尝试倍增稀释比,最好是查询使

免疫组化非特异性染色及控制方法

一、非特异性染色的识别常出现在组织边缘、胶原纤维及血浆渗出处,坏死组织及固定不良的组织中心处。表现为弥漫性,均匀性的背景染色。也可以是随机分布的阳性反应产物点、团或块状。二、非特异性染色的原因1. Ig与Fc受体结合多见于冰冻切片(特别是淋巴造血组织,淋巴细胞,单核细胞,组织细胞表面多),主要是和二

免疫组化常见问题及其解决办法

1、 一抗从4度拿出后,为什么要进行37度复温?(1)一方面,防止切片从4度直接放入PBS易脱片;(2)另一方面,使抗原抗体结合更稳定。一般不需要,但对表达较弱的抗原可能有用,4度和37度时分子运动方式不同,前者分子碰撞机率和运动速度小于后者,后者结合更快,但敏感性也提高了并易造成非特异染色。(3)

免疫组化常见问题及解决方法

当免疫组化染色没有出现预期结果时,应系统地查找原因,而每一次只能排除一种可能的原因。对照/标本无染色① 确认是否忽略了应该加的某种试剂,包括一抗、二抗、三抗及底物等。② 确认所有的试剂是否按正确的顺序加入,是否孵育了足够的时间。③ 对照抗体的标签确认是否使用了正确的抗体,以及所用的检测系统是否和一抗

标本必须在抗体染色后30分内检测吗?

SOP是这么说的:(1)Keep samples after staining covered with aluminum foil and at 4 0C (in the refrigerator) until they are run for flow analysis. The sampl

染色体四联体的概念

四联体(英语:G-quadruplex、G-tetrads或G4-DNA)是一种由富含鸟嘌呤的核酸序列所构成的四股型态。

解析免疫组化染色出现无色片的原因及解决方法

良好的免疫组化染色切片是正确判断染色结果的基础和前提。由于免疫组化染色过程中存在很多步骤或环节,每一个步骤或环节都可能影响到染色的最终结果,因此,要做好一张高质量的免疫组化切片并不是一件非常容易的事。需要病理技术员和病理医生密切配合、相互协调、共同努力才能保证做出合格的免疫组化切片。虽然免疫组化染色

免疫组化抗原修复注意事项

经甲醛固定的部分组织细胞,因固定过程中可能会形成醛键或羧甲基而封闭部分抗原决定簇,使免疫组化标记敏感性明显降低,因此在染色前,有些抗原需进行修复或暴露。抗原修复方法可分为化学方法和物理方法。化学方法是以酶消化方法,常用胰蛋白酶及胃蛋白酶,配制浓度与消化时间要适度。常用的物理方法有单纯加热、微波处理和

冷热温度冲击试验箱必须掌握的技术问题

冷热温度冲击试验箱也称高低温冲击试验箱,它常用于金属、塑料、橡胶、电子等材料行业,用于测试材料结构或复合材料,在瞬间下经极高温及极低温的连续环境下忍受的程度,得以在短时间内检测试样因热胀冷缩所引起的化学变化或物理伤害。任何一台设备在操作中,总会遇到一些技术性的问题,比如说它的性能、控制程序、整体结构

环保第三方治理必须做好三个专业化平台

  5月14日至16日,第十九届SO2、NOX、PM2.5、Hg污染防治技术研讨会在上海召开。北京国能中电节能环保技术有限责任公司董事长,环保部燃煤大气污染控制工程技术中心副主任白云峰就中国环境污染第三方治理发表主旨演讲,借此机会,我们对白云峰董事长进行了专访。   从“中国第一”到为理想的“二次创

免疫组化非特异性背景染色及其控制方法

一、非特异性染色的识别常出现在组织边缘、胶原纤维及血浆渗出处,坏死组织及固定不良的组织中心处。表现为弥漫性,均匀性的背景染色。也可以是随机分布的阳性反应产物点、团或块状。二、非特异性染色的原因1. Ig与Fc受体结合多见于冰冻切片(特别是淋巴造血组织,淋巴细胞,单核细胞,组织细胞表面多),主要是和二